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谈述污染造纸工艺污染对大凌河底泥细菌群落影响学年

最后更新时间:2024-03-06 作者:用户投稿原创标记本站原创 点赞:5364 浏览:12137
论文导读:
摘要:金城造纸有限公司污水是大凌河的一个主要污染源,由于其造纸工艺中大量利用到硫,导致其污水中硫酸盐含量较高。硫酸盐本身不会直接对水体造成危害,故一直从来对其污染都不够重视,但由于其性质稳定,不易自然消除,容易形成污染积累。大量的无机硫沉积在底泥中,会对底泥的环境情况产生较大的影响,进而影响整个生态体系。在自然环境中硫酸盐经过SRB的还原意义会产生大量的硫化物、硫代硫化物等有毒物质,也包括毒臭气H2S,严重污染大气,毒害水生生物,导致棘手的环境不足。与此同时,SOB菌群的含量和活性也会发生变化,由此有必要以SRB和SOB的角度探讨造纸工艺硫污染对底泥细菌群落的影响。本论文以硫代谢功能基因的角度,采取DGGE技术,针对SRB和SOB菌群,对大凌河流域金城造纸排污区域极为上下游的12个采样点连续3年的底泥样品的菌群进行分析,综合评价造纸工艺硫污染对大凌河流域底泥细菌群落的影响。论文取得探讨结果如下:1.金城造纸污水中硫酸盐含量较大凌河水高4倍左右,排污区域底泥中硫酸盐浓度也较高。2.三年16srDNA图谱的结果均表明,所有位点微生物的种类都对比丰富,但是排污区域和其他位点图谱的相似度都对比低,多样性较高,排污区域下游样品间菌落相似度较高。3.硫代谢相关基因Apr的DGGE图谱中硫代谢相关细菌的种类总体对比少,但是2011年5月和2012年5月排污区域样品中硫代谢细菌种类较其他位点更丰富,说明该区域硫代谢意义较其他位点更强,与高浓度的硫酸盐含量密切相关。4.测序结果表明,大多数测序结果为SRB,而SOB种类较少,SRB中大多数为脱硫叶菌属(不完全氧化SRB),少数为脱硫杆菌属(完全氧化SRB),SOB中主要为着色菌科硫球菌属。关键词:硫污染论文底泥论文DGGE论文生物评价论文
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ABSTRACT6-10
引言10-11
第1章 绪论11-26

1.1 造纸污染11-17

1.1 造纸工艺污染的危害11

1.2 硫酸盐废水的危害11-12

1.3 硫酸盐废水的排放对硫平衡的影响12-16

1.4 SRB和SOB的生态学作用16-17

1.2 环境微生物群落生态学探讨办法17-19

1.2.1 群落组成17-18

1.2.2 物种功能18-19

1.2.3 种间相互意义19

1.2.4 群落水平的预测19

1.3 环境微生物群落组成探讨办法19-24

1.3.1 从生化技术为基础的探讨办法20-21

1.3.2 从分子生物学技术为基础的探讨办法21-24

1.4 硫代谢功能基因的筛选24-25

1.5 本课题的探讨目的和作用25-26

第2章 材料与办法26-47

2.1 实验材料26-30

2.

1.1 底泥实验材料26-27

2.

1.2 主要试剂及酶27-30

2.

1.3 主要仪器设备30

2.2 实验办法30-45

2.1 样品硫酸盐含量的测定30-31

2.2 底泥样品宏基因组DNA的提取31

2.3 琼脂糖凝胶电泳检测及核酸浓度测定31-32

2.4 PCR扩增条件的选择32-34

2.5 DGGE上样量定量分析34

2.6. DGGE胶的制备及电泳历程34-38

2.7 DGGE胶银染历程38

2.8 PAGE胶切胶及胶回收历程38-40

2.9 PAGE胶回收中微量DNA扩增历程及办法40-41

2.10 琼脂糖胶凝胶DNA切胶回收历程及办法41-42

2.11 体会态细胞的制备及连接转化历程和办法42-44

2.12 菌落PCR验证44-45

2.3 数据分析45-47

2.3.1 DGGE图谱分析及进化树的构建45

2.3.2 细菌遗传多样性的统计学分析45-46

2.3.3 测序结果的比对分析46-47

第3章 实验结果及结果分析47-76

3.1 排污口硫酸盐污染的确定47-51

3.2 大凌河底泥样品16srDNA DGGE实验结果51-67

3.

2.1 底泥样品宏基因组DNA的提取51-52

3.

2.2 大凌河底泥样品16srDNA扩增结果52-54

3.

2.3 大凌河底泥样品16srDNA DGGE图谱54-56

3.2.4 从s论文导读:文献78-85附录Apr基因相关条带测序结果85-103致谢103-104作者介绍104上一页12
ewage位点群落结构为基础的对比分析56-59
3.

2.5 样品多样性指数和均匀度指数分析59-60

3.

2.6 样品间群落结构的相似度分析60-64

3.

2.7 不同年份样品图谱聚类结果及分析64-66

3.

2.8 小结66-67

3.3 大凌河底泥样品Apr基因DGGE实验结果67-76

3.1 大凌河底泥样品Apr基因特异引物扩增结果67-68

3.2 大凌河底泥样品Apr基因DGGE图谱68-71

3.3 Apr基因DGGE条带克隆测序结果及分析71-73

3.4 Apr基因测序结果进化树的构建73-75

3.5 小结75-76

第4章 结论与展望76-78

4.1 结论76-77

4.2 展望77-78

参考文献78-85
附录 Apr基因相关条带测序结果85-103
致谢103-104
作者介绍104