论比色酯交换大豆油技术及植物甾醇快速检测策略建立题目

论文导读：
摘要：植物甾醇有着于植物细胞中,具有十分重要的生理价值,被广泛运用在医学、食品、化工、植物基因工程等领域。自以发现植物甾醇至今,其定量浅析一直处于改善改善之中,各种浅析手段有利有弊,目前尚无测定植物油中植物甾醇含量的国标检测策略。本探讨借鉴现有的检测食品和食用油中甾醇含量的紫外比色浅析策略,以酯交换技术获得的富含甾醇的大豆油为探讨系统,分别采取紫外比色法、气相色谱法对甾醇进行了定量及定性浅析,旨在建立一种快捷、简单、准确且低成本的甾醇测定策略,为添加植物甾醇的功能性植物油中甾醇的测定提供快速和简单的浅析策略。初步建立测定酯交换大豆油中植物甾醇含量的紫外比色法,并探讨了测定条件对显色反应的影响,确定了最佳测定参数和条件。通过测定结果的比较浅析,紫外比色法测定植物甾醇总含量接近气相色谱法测定值,可方便、快捷、准确地测定酯交换大豆油中植物甾醇的含量,为植物甾醇酯交换反应历程探讨提供浅析的论述依据和技术参数,填补了我国添加植物甾醇的功能性植物油的日常生产监控策略的空白。本探讨的主要内容：(1)气相色谱法的建立运用气相色谱法对酯交换大豆油中甾醇进行了浅析测定,试验采取HP-5毛细管柱(30m×0.32mm×0.25μm)为色谱浅析柱,实验结果表明,采取该法可对酯交换大豆油中甾醇进行定量及定性浅析,克服了气相色谱法测定植物甾醇样品时需要衍生化预处理的缺点,该法测定植物甾醇的响应时间小于16min,且各种甾醇的分离效果较好。(2)紫外比色法的建立及评价紫外比色法测定条件的确定：利用甾醇与铁矾试剂发生显色反应,产生紫外吸收的原理,测定酯交换大豆油中甾醇的紫外光谱,经前处理后的植物甾醇通过紫外光谱扫描确定最大吸收波长为564nm,测定植物甾醇的标准曲线。探讨了显色剂用量、显色剂组成比例、显色时间和显色温度对紫外吸收光谱的影响,确定了最优测定参数为：显色剂用量2mL,显色剂组成比例2：8,显色时间30min,显色温度20℃,确定紫外比色法的测定条件。酯交换大豆油的前处理：通过单因素和正交试验,对皂化法提取植物甾醇的条件进行了优化。得到了最优提取参数为：皂化时间30min,皂化温度80℃,碱浓度1.5mol/L,料液比0.05g/mL。紫外比色法测定结果略高于气相色谱法,紫外比色法测定绝对值平均高0.14%,绝对误差最大为0.21%,平均偏高0.14%,相对误差最大为3.7%,平均偏高2.95%。差别幅度与甾醇含量不有着关联,紫外比色法测定植物甾醇总含量接近气相色谱法测定值。紫外比色法的测定结果的精密度较高,平均回收率为98.61%,相对标准偏差为0.57%,测定结果准确可靠。(3)高含量甾醇的酯交换大豆油的制备采取紫外比色法监测酯交换大豆油中甾醇的含量,通过响应面试验设计确定了最优加工工艺,甾醇添加量5%,反应温度70℃,酶用量1.02%,反应时间3h,在此条件下,酯化率的预测值为88.16%,而实际测得的酯化率为87.81%,实际值与预测值之间的相对误差为0.35%,预测值与试验值之间的良好拟合性证实了模型的有效性。本探讨的作用：通过系统的探讨,本课题建立了一种方便、快捷、准确的测定高含量植物甾醇的策略,对添加植物甾醇的功能性植物油新产品的开发起着重要作用,为其探讨和产业化生产提供快捷和简便的监测手段。关键词：植物甾醇论文气相色谱法论文紫外比色法论文酯交换大豆油论文含量测定论文
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Abstract12-14
1 引言14-28

1.1 植物甾醇介绍14-20

1.1 植物甾醇的来源及分类14-15

1.2 植物甾醇的结构及功能15-18

1.3 植物甾醇的安全性18-19

1.4 植物甾醇的开发及运用展望19-20

1.2 国内外植物甾醇检测策略探讨近况20-24

1.2.1 毛地黄皂甙法20-21

1.2.2 Liebermann-Burchard比色法21

1.2.3 红外光谱法21-22

1.2.4 薄层色谱法(TLC)22

1.2.5 气相色谱法(GC)22-23

1.2.6 高效液相色谱法(HPLC)23-24

1.2.7 核磁共论文导读：剂组成比例对显色反应的影响473.3.5紫外比色法最优显色条件的确定47-493.4紫外比色法测定酯交换大豆油中甾醇的预处理试验49-533.4.1皂化时间的影响493.4.2皂化温度的影响49-503.4.3碱浓度的影响50-513.4.4料液比的影响513.4.5紫外比色法预处理最优条件的确定51-533.4.6结果与气相色谱法的比较验证533.5紫外比色法评
振法(NMR)24

1.3 甾醇酯的探讨介绍24-26

1.4 课题探讨目的和作用26-27

1.5 课题探讨的主要内容27-28

2 材料与策略28-38

2.1 材料及仪器28-29

2.

1.1 材料及试剂28

2.

1.2 仪器与设备28-29

2.2 试验策略29-38

2.1 探讨工作的技术路线29-30

2.2 气相色谱法的浅析测定30-31

2.3 紫外比色法标准曲线的测定31

2.4 紫外比色法显色条件的优化设计31-33

2.5 紫外比色法预处理试验33-34

2.6 紫外比色法的评价34-35

2.7 高含量甾醇的酯交换大豆油的制备35-37

2.8 数据处理策略37-38

3 结果与浅析38-68

3.1 气相色谱法的浅析测定38-43

3.

1.1 色谱柱的选择38

3.

1.2 出峰顺序与定性浅析38-39

3.

1.3 柱温与出峰时间39

3.

1.4 标准曲线绘制39-40

3.

1.5 气相色谱测定甾醇含量40-41

3.

1.6 气相色谱法重复性、精确度、回收率的测定41-43

3.2 植物甾醇标准曲线的测定43-45
3.

2.1 紫外比色法最大吸收波长的确定43-44

3.

2.2 紫外比色法甾醇标准曲线的测定44

3.

2.3 紫外比色法稀释倍数的确定44-45

3.3 紫外比色法显色条件的单因素与正交试验45-49

3.1 显色剂用量对显色反应的影响45-46

3.2 显色温度对显色反应的影响46

3.3 显色时间对显色反应的影响46-47

3.4 显色剂组成比例对显色反应的影响47

3.5 紫外比色法最优显色条件的确定47-49

3.4 紫外比色法测定酯交换大豆油中甾醇的预处理试验49-53

3.4.1 皂化时间的影响49

3.4.2 皂化温度的影响49-50

3.4.3 碱浓度的影响50-51

3.4.4 料液比的影响51

3.4.5 紫外比色法预处理最优条件的确定51-53

3.4.6 结果与气相色谱法的比较验证53

3.5 紫外比色法评价53-56

3.5.1 紫外比色法与气相色谱法测定结果的比较浅析53-55

3.5.2 紫外比色法稳定性测定55

3.5.3 紫外比色法精密度测定55

3.5.4 紫外比色法回收率试验55-56

3.6 高含量甾醇的酯交换大豆油的制备56-62

3.6.1 酯交换大豆油的合成工艺56

3.6.2 脂肪酶对酯化率的影响56-60

3.6.3 反应时间对酯化率的影响60

3.6.4 甾醇添加量对酯化率的影响60-61

3.6.5 酶用量对酯化率的影响61-62

3.6.6 反应温度对酯化率的影响62

3.7 Box-Benhnken响应面浅析法优化工艺参数62-68

3.7.1 响应面试验结果及浅析62-66

3.7.2 最适合成条件和回归模型的验证66-68

4 讨论68-69

4.1 气相色谱法的建立68

4.2 紫外比色法的建立68

4.3 高含量甾醇的酯交换大豆油的制备68-69

5 结论69-70
致谢70-71
参考文献71-76
攻读硕士期间发表的学术论文76