分析紫檀抗白念珠菌生物被膜中药成分筛选及机制期刊
最后更新时间：2024-02-03
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论文导读：膜形成的实验结果显示TET、PTE对白念珠菌生物被膜形成和成熟生物被膜均有较强的抑制意义,IC80值分别为64μg/ml、32μg/ml。激光共聚焦显微镜实验、扫描电镜实验确证了TET、PTE的抗生物被膜活性：32μg/mlTET、16μg/mlPTE加入后破坏了生物被膜的三维空间结构,菌丝的形成被抑制。生物被膜干重测定实验结果进一步证明了TET
摘要：白念珠菌(Candida albicans)是人类最常见的条件致病真菌,可导致深部感染危及生命。白念珠菌易在各种生物材料表面形成生物被膜,其主要特征是对临床常见抗真菌药物高度耐药,并导致反复感染。本课题的探讨目的是筛选具有抗白念珠菌生物被膜意义的中药成分并探讨其意义机制。在体外对29种天然产物进行抗白念珠菌生物被膜活性的检测,发现汉防己甲素(Tetrandrine, TET)、紫檀芪(Pterostilbene, PTE)单用具有明显的体外抗白念珠菌生物被膜活性。XTT法考察生物被膜形成的实验结果显示TET、PTE对白念珠菌生物被膜形成和成熟生物被膜均有较强的抑制意义,IC80值分别为64μg/ml、32μg/ml。激光共聚焦显微镜实验、扫描电镜实验确证了TET、PTE的抗生物被膜活性：32μg/ml TET、16μg/ml PTE加入后破坏了生物被膜的三维空间结构,菌丝的形成被抑制。生物被膜干重测定实验结果进一步证明了TET、PTE能够抑制生物被膜的形成：加入TET、PTE后形成的生物被膜与对照组相比干重明显降低,PTE的意义效果尤为显著。为了研究TET、PTE抑制白念珠菌生物被膜的意义机制,我们考察了这两种天然产物对黏附、生长和菌丝形成的影响。我们首先采取表面疏水性(CSH)实验考查了TET、PTE对白念珠菌黏附意义的影响,结果表明TET、PTE处理后生物被膜CSH值减小,随着TET、PTE浓度的升高,CSH值逐渐降低,呈剂量依赖性,PTE效果强于TET。采取时间-生长曲线实验分析考察TET、PTE对白念珠菌生长意义的影响,结果表明TET浓度低于64μg/ml、PTE浓度低于32μg/ml时对白念珠菌的生长没有影响。在4种菌丝诱导培养基中考查TET、PTE对菌丝形成的影响,结果表明TET在Spider培养基中能够明显影响菌丝的形成,而较低浓度PTE在四种菌丝诱导培养基中均可影响菌丝的形成,抑制菌丝意义强于TET。然后,采取cDNA芯片分析和real-time RT-PCR分析以分子水平上考察PTE处理白念珠菌生物被膜形成从及菌丝形成相关基因表达谱的变化,分析结果显示PTE处理后,与被膜或菌丝形成相关的重要基因表达下调,包括编码RAS信号传导通路的GTPase的基因RAS1从及编码细胞延伸蛋白的基因ECE1。另外,PTE处理后还能引起麦角甾醇合成相关基因论文导读：
、糖酵解/糖异生相关基因表达水平明显降低,热激蛋白编码基因表达上调,这些实验结果可能与PTE意义于Ras/cAMP信号转导通路直接相关。对TET采取real-time RT-PCR分析,结果表明TET处理后,菌丝特异性基因HWP1, ALS3, ECE1表达水平明显降低,编码GTP-ase的基因RAS1、腺甘酸环化酶基因CYR1、编码转录因子Efg1p的基因EFG1表达水平明显降低,这与TET抑制菌丝形成的意义直接相关。动物实验方面,由于TET和PTE能显著抑制白念珠菌菌丝的形成,而菌丝形成是白念珠菌致病的关键因素,我们在秀丽隐杆线虫感染模型上考察TET、PTE的体内抗白念珠菌活性,结果表明TET具有体内抗白念珠菌活性。由于PTE抗生物被膜的意义更强,我们用大鼠插管模型考察PTE的体内抗白念珠菌生物被膜活性,实验结果显示PTE具有明显体内抗白念珠菌生物被膜的意义。本探讨表明TET、PTE具有良好的抗生物被膜活性，为进一步探讨其临床运用价值,发现抗白念珠菌生物被膜的药靶奠定了工作基础。关键词：白念珠菌论文生物被膜论文汉防己甲素论文紫檀芪论文抗被膜活性论文
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中文摘要6-8
Abstract8-10
前言10-13
第一部分 抗白念珠菌生物被膜中药成分的筛选13-22
1 实验材料13-15
2 实验办法15-17
3 实验结果17-20
4 讨论20-22
第二部分 汉防已甲素(Tetrandrine,TET)抗白念珠菌生物被膜的意义及机制探讨22-59
1 实验材料与办法22-38
2 实验结果38-56
3 讨论56-59
第三部分 紫檀芪(Pterostilbene,PTE)抗白念珠菌生物被膜的意义及机制探讨59-83
1 实验材料与办法59-66
2 实验结果66-81
3 讨论81-83
参考文献83-91
致谢91-93
文献综述93-99
参考文献95-99
作者简历99-100
摘要：白念珠菌(Candida albicans)是人类最常见的条件致病真菌,可导致深部感染危及生命。白念珠菌易在各种生物材料表面形成生物被膜,其主要特征是对临床常见抗真菌药物高度耐药,并导致反复感染。本课题的探讨目的是筛选具有抗白念珠菌生物被膜意义的中药成分并探讨其意义机制。在体外对29种天然产物进行抗白念珠菌生物被膜活性的检测,发现汉防己甲素(Tetrandrine, TET)、紫檀芪(Pterostilbene, PTE)单用具有明显的体外抗白念珠菌生物被膜活性。XTT法考察生物被膜形成的实验结果显示TET、PTE对白念珠菌生物被膜形成和成熟生物被膜均有较强的抑制意义,IC80值分别为64μg/ml、32μg/ml。激光共聚焦显微镜实验、扫描电镜实验确证了TET、PTE的抗生物被膜活性：32μg/ml TET、16μg/ml PTE加入后破坏了生物被膜的三维空间结构,菌丝的形成被抑制。生物被膜干重测定实验结果进一步证明了TET、PTE能够抑制生物被膜的形成：加入TET、PTE后形成的生物被膜与对照组相比干重明显降低,PTE的意义效果尤为显著。为了研究TET、PTE抑制白念珠菌生物被膜的意义机制,我们考察了这两种天然产物对黏附、生长和菌丝形成的影响。我们首先采取表面疏水性(CSH)实验考查了TET、PTE对白念珠菌黏附意义的影响,结果表明TET、PTE处理后生物被膜CSH值减小,随着TET、PTE浓度的升高,CSH值逐渐降低,呈剂量依赖性,PTE效果强于TET。采取时间-生长曲线实验分析考察TET、PTE对白念珠菌生长意义的影响,结果表明TET浓度低于64μg/ml、PTE浓度低于32μg/ml时对白念珠菌的生长没有影响。在4种菌丝诱导培养基中考查TET、PTE对菌丝形成的影响,结果表明TET在Spider培养基中能够明显影响菌丝的形成,而较低浓度PTE在四种菌丝诱导培养基中均可影响菌丝的形成,抑制菌丝意义强于TET。然后,采取cDNA芯片分析和real-time RT-PCR分析以分子水平上考察PTE处理白念珠菌生物被膜形成从及菌丝形成相关基因表达谱的变化,分析结果显示PTE处理后,与被膜或菌丝形成相关的重要基因表达下调,包括编码RAS信号传导通路的GTPase的基因RAS1从及编码细胞延伸蛋白的基因ECE1。另外,PTE处理后还能引起麦角甾醇合成相关基因论文导读：
、糖酵解/糖异生相关基因表达水平明显降低,热激蛋白编码基因表达上调,这些实验结果可能与PTE意义于Ras/cAMP信号转导通路直接相关。对TET采取real-time RT-PCR分析,结果表明TET处理后,菌丝特异性基因HWP1, ALS3, ECE1表达水平明显降低,编码GTP-ase的基因RAS1、腺甘酸环化酶基因CYR1、编码转录因子Efg1p的基因EFG1表达水平明显降低,这与TET抑制菌丝形成的意义直接相关。动物实验方面,由于TET和PTE能显著抑制白念珠菌菌丝的形成,而菌丝形成是白念珠菌致病的关键因素,我们在秀丽隐杆线虫感染模型上考察TET、PTE的体内抗白念珠菌活性,结果表明TET具有体内抗白念珠菌活性。由于PTE抗生物被膜的意义更强,我们用大鼠插管模型考察PTE的体内抗白念珠菌生物被膜活性,实验结果显示PTE具有明显体内抗白念珠菌生物被膜的意义。本探讨表明TET、PTE具有良好的抗生物被膜活性，为进一步探讨其临床运用价值,发现抗白念珠菌生物被膜的药靶奠定了工作基础。关键词：白念珠菌论文生物被膜论文汉防己甲素论文紫檀芪论文抗被膜活性论文
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Abstract8-10
前言10-13
第一部分 抗白念珠菌生物被膜中药成分的筛选13-22
1 实验材料13-15
2 实验办法15-17
3 实验结果17-20
4 讨论20-22
第二部分 汉防已甲素(Tetrandrine,TET)抗白念珠菌生物被膜的意义及机制探讨22-59
1 实验材料与办法22-38
2 实验结果38-56
3 讨论56-59
第三部分 紫檀芪(Pterostilbene,PTE)抗白念珠菌生物被膜的意义及机制探讨59-83
1 实验材料与办法59-66
2 实验结果66-81
3 讨论81-83
参考文献83-91
致谢91-93
文献综述93-99
参考文献95-99
作者简历99-100