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阐述致病性高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗生产工艺题目

最后更新时间:2024-01-29 作者:用户投稿原创标记本站原创 点赞:15776 浏览:61795
论文导读:
摘要:高致病性猪繁殖与呼吸综合征(Highly pathogenic porcine reproductive andrespiratory syndrome, HP-PRRS),俗称“高致病性猪蓝耳病”,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)变异株引起的一种急性高致死性传染病。HP-PRRSV与PRRSV间最主要的差别是HP-PRRSV在NSP2蛋白中有着30个氨基酸的缺失,临床主要体现体温高、发病率高和死亡率高”三高”特点,自2006年以来HP-PRRS给我国养猪业带来了巨大损失。该病无特效治疗药物,主要靠疫苗接种来预防制约。我国用于预防HP-PRRS的疫苗,活疫苗占75%,主要由于活疫苗具有免疫力坚强、疫苗免疫产生期快、免疫效果好、免疫期长等优点。病毒含量和免疫原性是活疫苗的主要指标,我国兽用疫苗行业主要以转瓶培养方式生产疫苗,批次间差别大,疫苗质量不稳定是疫苗厂家共性不足,要保证疫苗质量稳定,必须进行疫苗生产工艺优化,本探讨主要通过筛选并建立种子库,优化Marc-145细胞培养条件,优化Marc-145细胞微载体培养对高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗生产工艺进行探讨。力求优化工艺,为其它产品工艺提供有效参考。通过细胞传代、接毒、效力测定等实验,筛选出适应性好的细胞株及种毒,成功建立了细胞库、种毒库,冻存种细胞18株、种毒15株,经鉴别鉴定后安全性和纯净性良好,回归实验显示种细胞和种毒的优势有可复制性,达到筛选和建库的目的,为生产工艺优化奠定了基础。通过比对试验、正交实验,浅析各因素对转瓶培养工艺的影响,证明DMEM(高糖)、含8%-10%FBS的生长液更适合Marc-145细胞生长,转速10次/h、温度37.5℃、2%FBS维持液、Ph7.3的案例更适合病毒增殖。在适当范围调节生产案例使生产更稳定,优化效果显著。利用生物反应器,通过微载体培养技术,成功的进行了Marc-145培养和接毒,结果显示最佳细胞接种密度为2.6×10~5/ml,微载体培养细胞密度比转瓶培养高2.1倍,产毒滴度比转瓶培养高0.46,为大规模生产技术升级提供了基础数据。关键词:高致病性猪繁殖与呼吸综合征论文疫苗论文细胞培养论文生产工艺论文微载体论文
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Abstract6-10
缩略语中英文对照表10-12
第一篇 文献综述12-34
第1章 高致病性猪繁殖与呼吸综合征分子流行病学12-27

1.1 HP-PRRSV分子生物学特点13-15

1.2 HP-PRRSV的宿主及传染源15

1.3 HP-PRRSV的传播途径及致病机理15-17

1.3.1 直接传播途径15-16

1.3.2 间接传播途径16

1.3.3 致病机理16-17

1.4 HP-PRRS的流行情况17-22

1.5 HP-PRRS的临床症状及病理变化22-23

1.5.1 临床症状22

1.5.2 病理变化22-23

1.6 HP-PRRS的流行特点及诊断23-25

1.6.1 流行特点23-24

1.6.2 HP-PRRS诊断24-25

1.7 HP-PRRS的防治措施25-27

1.7.1 加强饲养管理25-26

1.7.2 制订合理的免疫程序26

1.7.3 药物预防与保健26-27

第2章 国内外猪繁殖与呼吸综合征疫苗探讨进展27-34

2.1 常规PRRS疫苗的探讨进展27-30

2.

1.1 灭活疫苗27-29

2.

1.2 弱毒活疫苗29-30

2.

1.3 新技术在常规疫苗中的运用30

2.2 PRRS的基因工程疫苗探讨进展30-33

2.1 核酸疫苗31-32

2.2 活载体疫苗32-33

2.3 探讨的目的33-34

第二篇 探讨内容34-66
第1章 Marc-145细胞库及HP-PRRS种毒库的建立34-46

1.1 材料35-37

1.2 策略37-40

1.3 结果40-43

1.4 讨论43-44

1.5 小结44-46

第2章 Marc-145细胞培养条件优化46-57

2.1 材料46-48

2.2论文导读:策略48-492.3结果49-542.4讨论54-562.5小结56-57第3章Marc-145细胞微载体培养57-663.1材料57-583.2策略58-603.3结果60-633.4讨论63-653.5小结65-66结论66-67参考文献67-76导师介绍76-77作者介绍77-78致谢78上一页12
策略48-49

2.3 结果49-54

2.4 讨论54-56

2.5 小结56-57

第3章 Marc-145细胞微载体培养57-66

3.1 材料57-58

3.2 策略58-60

3.3 结果60-63

3.4 讨论63-65

3.5 小结65-66

结论66-67
参考文献67-76
导师介绍76-77
作者介绍77-78
致谢78