研讨浙贝母暗紫贝母及浙贝母比较中心

论文导读：物组、浙贝母水提取物组、浙贝母醇提物组痰液排出量高于阴性对照组,差别有统计学作用(P0.05)；暗紫贝母与浙贝母水提物痰液排出量高于其余各组,两两比较结果显示：浙贝母水提物痰液排出量,与其余各组比较,差别有统计学作用(P0.05)。4.暗紫贝母及浙贝母全粉2.5g·kg-1·d-1(小鼠)、

1.5g·kg-1·d-1(豚鼠)灌胃给药时,2个贝母组延长小

摘要：目的：借鉴比较医学探讨的策略并结合现代实验药理探讨策略系统比较暗紫贝母及浙贝母的差别。为2种贝母临床合理运用提供科学依据。策略：借鉴前瞻性比较探讨的策略对暗紫贝母及浙贝母进行了本草考证、比较浅析了2者原植物及鳞茎形态特点、化学成分异同、药理及临床运用方面的特点,并运用整体动物实验法系统比较了暗紫贝母及浙贝母粉末及提取物的镇咳、祛痰、平喘作用差别；整体动物引喘实验法、离体器官实验法、体外细胞筛选实验法深入探讨了暗紫贝母及浙贝母总生物碱平喘作用,总碱及4种代表性生物碱单体的平喘作用机理。结果：1.“川贝母”和“浙贝母”区分明确起自清代《本草纲目拾遗》,作为川贝母代表基源种的暗紫贝母与浙贝母之间以形态、化学成分、药效及临床运用方面,尤其是临床运用有着差别。2.暗紫贝母及浙贝母全粉2.0g·kg-1·d-1(小鼠)、1.0g·kg-1·d-1(大鼠)灌胃给药,通过小鼠酚红排痰实验法比较,2个贝母组酚红排泌量均高于阴性对照组,差别有统计学作用(P0.01)；通过大鼠毛细玻管排痰实验法比较,2个贝母组痰液排出量与阴性对照组比较,差别亦有统计学作用(P0.05)。3.暗紫贝母及浙贝母提取物2.0g·kg-1·d-1(小鼠)、1.0g·kg-1·d-1(大鼠)灌胃给药,通过小鼠酚红排痰实验法比较,暗紫贝母水提物组、暗紫贝母醇提物组、浙贝母水提物组酚红排泌量高于阴性对照组,差别有统计学作用(P0.05),两两比较结果显示：暗紫贝母水提物组酚红排出量略高于暗紫贝母醇提物组及浙贝母水提物组(P0.05),后2组两两比较,差别无统计学作用；通过大鼠毛细玻管排痰实验法比较,暗紫贝母水提取物组、浙贝母水提取物组、浙贝母醇提物组痰液排出量高于阴性对照组,差别有统计学作用(P0.05)；暗紫贝母与浙贝母水提物痰液排出量高于其余各组,两两比较结果显示：浙贝母水提物痰液排出量,与其余各组比较,差别有统计学作用(P0.05)。4.暗紫贝母及浙贝母全粉2.5g·kg-1·d-1(小鼠)、1.5g·kg-1·d-1(豚鼠)灌胃给药时,2个贝母组延长小鼠氨水引咳ET50不显著,浙贝母组R值为91.39%,暗紫贝母组R值为123.06%；减少豚鼠枸橼酸引咳后5min内咳嗽次数与阴性对照组比较,差别有统计学作用(P0.05)；5.暗紫贝母及浙贝母提取物5g·kg-1·d-1(小鼠)、1.5g·kg-1·d-论文导读：优于浙贝母(小鼠氨水引咳模型)或强度相当(豚鼠枸橼酸引咳模型)；3.2种贝母全粉给药时,具有相当强度的平喘作用,其有效成分没有显著分布走势；4.2种贝母研粉冲服均能使其有效成分较好吸收；5.2种贝母祛痰作用有效剂量小于其镇咳及平喘有效剂量；6.2种贝母总生物碱不能完全代表其平喘有效成分；

7.暗紫贝母及浙贝母生物碱成分可能主要

1(豚鼠)灌胃给药时,暗紫贝母醇提物组延长小鼠氨水引咳ETso显著,R值为143.21%,体现出镇咳效应；2种贝母的醇提物减少豚鼠枸橼酸引咳后5min内咳嗽次数与阴性对照组比较,差别有统计学作用(P0.05)。6.暗紫贝母及浙贝母全粉1g·kg-1·d-1(豚鼠)灌胃给药时,暗紫贝母组延长哮喘潜伏期,与阴性对照组比较,P0.05；7.暗紫贝母及浙贝母提取物1.5g·kg-1·d-1(豚鼠)灌胃给药时,暗紫贝母及浙贝母各提取物组均未体现出显著的平喘作用,哮喘潜伏期与阴性组比较,差别无统计学作用。8.暗紫贝母总生物碱及浙贝母总生物碱50mg·kg-1灌胃给药,延长豚鼠哮喘潜伏期,与阴性对照组比较,差别有统计学作用(P0.05),作用强度略弱于沙丁胺醇组(4.5×10-3g·kg-1),两两比较结果显示：暗紫贝母组与阳性组比较差别有统计学作用。9.基于β2受体通路体外细胞筛选实验结果显示：西贝素、贝母辛、贝母素甲及贝母素乙均未体现出激动β2受体的活性；暗紫贝母及浙贝母总生物碱中亦未发现有着其他可能具有激动β2受体的活性物质。10.基于M胆碱受体通路离体平滑肌实验结果显示：暗紫贝母总生物碱低(2g·L-1)、中(10g·L-1)、高(50g·L-1)剂量对氯贝胆碱引起的豚鼠离体支气管平滑肌收缩的抑制率分别为：27.5%、26.4%、40.6%,浙贝母总生物碱低(2g·L-1)、中(10g·L-1)、高(50g·L-1)剂量对氯贝胆碱引起的豚鼠离体支气管平滑肌收缩的抑制率分别为：11.4%、22.7%、37.5%；西贝素、贝母素甲、贝母素乙、贝母辛拮抗氯贝胆碱的PA2值分别为：7.32、7.26、9.04、7.76。结论：1.暗紫贝母与浙贝母均具有较显著的祛痰作用,暗紫贝母祛痰作用强度略优于浙贝母,其祛痰有效成分主要集中在其水提物部分；2.2种贝母镇咳有效成分主要集中在其醇提物部分,暗紫贝母镇咳作用略优于浙贝母(小鼠氨水引咳模型)或强度相当(豚鼠枸橼酸引咳模型)；3.2种贝母全粉给药时,具有相当强度的平喘作用,其有效成分没有显著分布走势；4.2种贝母研粉冲服均能使其有效成分较好吸收；5.2种贝母祛痰作用有效剂量小于其镇咳及平喘有效剂量；6.2种贝母总生物碱不能完全代表其平喘有效成分；7.暗紫贝母及浙贝母生物碱成分可能主要通过拮抗支气管平滑肌M3受体实现舒张支气管平滑肌的作用；论文导读：
关键词：暗紫贝母论文浙贝母论文祛痰论文镇咳论文平喘论文比较探讨论文作用机制论文
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Abstract5-12
缩略词表12-13
前言13-14
论述探讨部分14-24

1. 资料和策略14

1.1 资料来源14

1.2 探讨策略14

2 结果14-24

2.1 “川贝母”“浙贝母”本草考证14-17

2.2 暗紫贝母及浙贝母形态比较17-21

2.1 暗紫贝母及浙贝母原植物比较17-19

2.2 鳞茎形态及采收季节比较19-21

2.3 暗紫贝母及浙贝母化学成分比较21-22

2.3.1 生物碱21-22

2.3.2 非生物碱类22

2.4 暗紫贝母及浙贝母现代药理比较探讨概况22-23

2.5 暗紫贝母及浙贝母临床运用比较23-24

实验探讨部分24-58
第一部分 暗紫贝母及浙贝母粉末止咳、化痰、平喘药效学比较实验探讨24-33
1 实验材料24-25

1.1 受试药物24

1.2 对照药物24-25

1.3 实验试剂25

1.4 实验仪器及主要器材25

1.5 实验动物25

2. 实验策略25-30

2.1 化学刺激引咳实验比较暗紫贝母及浙贝母粉末止咳作用25-27

2.

1.1 小鼠氨水引咳实验法比较暗紫贝母及浙贝母粉末止咳作用25-27

2.

1.2 豚鼠枸橼酸引咳实验法比较暗紫贝母及浙贝母粉末止咳作用27

2.2 呼吸道分泌液量测定法比较暗紫贝母及浙贝母粉末化祛痰作用27-29

2.1 小鼠酚红排痰法比较暗紫贝母及浙贝母粉末祛痰作用27-29

2.2 大鼠毛细玻管法比较暗紫贝母及浙贝母粉末祛痰作用29

2.3 整体动物引喘实验法比较暗紫贝母及浙贝母粉末平喘作用29-30

3. 实验结果30-32

3.1 化学刺激引咳实验比较暗紫贝母及浙贝母粉末止咳作用30-31

3.

1.1 小鼠氨水引咳实验法比较暗紫贝母及浙贝母粉末止咳作用30

3.

1.2 豚鼠枸橼酸引咳实验法比较暗紫贝母及浙贝母粉末止咳作用30-31

3.2 呼吸道分泌液量测定法比较暗紫贝母及浙贝母粉末化祛痰作用31
3.

2.1 小鼠酚红排痰法比较暗紫贝母及浙贝母粉末祛痰作用31

3.2.2 大鼠毛细玻管法比较暗紫贝母及浙贝母粉末祛痰作用论文导读：实验试剂432.1.4实验动物432.1.5主要仪器及器材43-442.2实验策略442.3实验结果443基于β_2受体通路暗紫贝母总生物碱上一页12345下一页
31

3.3 整体动物引喘实验法比较暗紫贝母及浙贝母粉末平喘作用31-32

4 小结32-33
第二部分 暗紫贝母及浙贝母提取物止咳、化痰、平喘药效学比较实验探讨33-40
1 实验材料33-34

1.1 受试药物33-34

1.1 药材来源33

1.2 受试药物制备33-34

1.2 对照药物34

1.3 实验试剂34

1.4 实验仪器及主要器材34

1.5 实验动物34

2. 实验策略34-36

2.1 化学刺激引咳实验比较暗紫贝母及浙贝母提取物止咳作用34-35

2.

1.1 小鼠氨水引咳实验法比较暗紫贝母及浙贝母提取物止咳作用35

2.

1.2 豚鼠枸橼酸引咳实验法比较暗紫贝母及浙贝母提取物止咳作用35

2.2 呼吸道分泌液量测定法比较暗紫贝母及浙贝母提取物祛痰作用35

2.1 小鼠酚红排痰法比较暗紫贝母及浙贝母提取物祛痰作用35

2.2 大鼠毛细玻管法比较暗紫贝母及浙贝母提取物祛痰作用35

2.3 整体动物引喘实验法比较暗紫贝母及浙贝母提取物平喘作用35-36

3. 实验结果36-39

3.1 化学刺激引咳实验比较暗紫贝母及浙贝母提取物止咳作用36-37

3.

1.1 小鼠氨水引咳实验法比较暗紫贝母及浙贝母提取物止咳作用36

3.

1.2 豚鼠枸橼酸引咳实验法比较暗紫贝母及浙贝母提取物止咳作用36-37

3.2 呼吸道分泌液量测定法比较暗紫贝母及浙贝母提取物祛痰作用37-38
3.

2.1 小鼠酚红排痰法比较暗紫贝母及浙贝母提取物祛痰作用37-38

3.

2.2 大鼠毛细玻管法比较暗紫贝母及浙贝母提取物祛痰作用38

3.3 整体动物引喘实验法比较暗紫贝母及浙贝母提取物平喘作用38-39
4 小结39-40
第三部分 暗紫贝母及浙贝母总生物碱平喘作用及平喘作用机理探讨40-49
1 暗紫贝母及浙贝母总生物碱提取及总生物碱含量测定40-43

1.1 实验材料41

1.2 实验仪器41

1.3 实验策略及结果41-43

1.3.1 总生物碱提取41

1.3.2 酸性染料比色法-紫外可见分光光度法测定总生物碱含量41-43

2 整体动物引喘实验法探讨暗紫贝母总生物碱及浙贝母总生物碱平喘作用43-44

2.1 实验材料43-44

2.

1.1 受试药物43

2.

1.2 对照药物43

2.

1.3 实验试剂43

2.

1.4 实验动物43

2.

1.5 主要仪器及器材43-44

2.2 实验策略44

2.3 实验结果44

3 基于β_2受体通路暗紫贝母总生物碱论文导读：0致谢70-71参考文献71-76附录Ⅰ文献综述一76-83参考文献]80-83附录Ⅱ：在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果83-84上一页12345
与浙贝母总生物碱平喘作用机理探讨44-47

3.1 实验材料44-45

3.

1.1 受试药物44

3.

1.3 其他试药及试剂44-45

3.

1.4 细胞株45

3.

1.5 主要仪器45

3.2 实验策略45-46
3.

2.1 p2AR- HEK293 细胞系培养45

3.

2.2 双荧光素酶报告基因质粒瞬时共转染45

3.

2.3 加药处理45

3.

2.4 细胞裂解及荧光检测45-46

3.3 实验结果46-47

3.1 细胞活性评价系统评价结果46

3.2 2种贝母生物总碱激动β_2受体活性评价结果46-47

4 基于M胆碱受体通路探讨暗紫贝母与浙贝母生物碱平喘作用机理47-49

4.1 实验材料47

4.

1.1 受试药物47

4.

1.2 其他试药及试剂47

4.

1.3 实验动物47

4.

1.4 主要仪器及器材47

4.2 实验策略47-48
4.

2.1 豚鼠气管螺旋条制备47-48

4.

2.2 加药处理48

4.3 实验结果48-49
4.

3.1 暗紫贝母总生物碱舒张支气管平滑肌作用48

4.

3.2 浙贝母总生物碱舒张支气管平滑肌作用48-49

5 小结49
第四部分 4种代表性异甾体生物碱单体平喘作用机理探讨49-58
1 基于β_2受体通路4种代表性异甾体生物碱单体平喘作用机理探讨49-51

1.1 实验材料49-50

1.1 受试药物49-50

1.2 其他试药及试剂50

1.3 细胞株50

1.4 主要仪器50

1.2 实验策略50

1.2.1 β_2AR-HEK293细胞系培养50

1.2.2 双荧光素酶报告基因质粒瞬时共转染50

1.2.3 加药处理50

1.2.4 细胞裂解及荧光检测50

1.3 实验结果50-51

2 基于M胆碱受体通路探讨4种代表性异甾体生物碱单体平喘作用机理探讨51-58

2.1 实验材料51

2.

1.1 受试药物51

2.

1.2 其他试药及试剂51

2.

1.3 实验动物51

2.

1.4 主要仪器及器材51

2.2 实验策略51-53

2.1 豚鼠气管螺旋条制备51

2.2 加药处理51-53

2.3 实验结果53-58

3 小结58
讨论58-67
结论67-68
不足与展望68-70
致谢70-71
参考文献71-76
附录Ⅰ 文献综述一76-83
参考文献]80-83
附录Ⅱ：在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果83-84