谈谈姜黄姜黄素衍生物抗实验性大鼠肝纤维化作用及其机制流程

论文导读：
摘要：目的观察姜黄素衍生物抗肝纤维化的作用并探讨其可能的作用机制。策略（1）实验性大鼠肝纤维化模型的建立：雄性SD大鼠共60只，共分四组，每组15只，分别为正常组、模型组、普通姜黄素组、姜黄素衍生物组。除正常组外其余三组分别用四氯化碳混合液（CCL4:橄榄油=2:3）在大鼠四肢内侧皮射，首次5ml/kg,后每次2ml/kg,每周2次，诱导大鼠形成肝纤维化模型。（2）检测姜黄素衍生物的抗肝纤维化的作用及可能的相关机制：以第5周开始，姜黄素衍生物组每日给予姜黄素衍生物100mg/kg尾静脉注射治疗，姜黄素组每日给予普通姜黄素300mg/kg灌胃治疗，正常组和模型组每日给予生理盐水0.2ml每只尾静脉注射，共治疗6周。10周后治疗结束，常规麻醉后取大鼠心脏采血做肝功能及肝纤维化血清学指标检测，并取肝组织做羟脯氨酸（Hpy）水平检测，剖腹取肝脏左叶同一部位，10%中性甲醛常规固定，做HE及天狼星红染色观察肝脏病理学转变，同时对肝脏纤维化程度进行评估并予以分级；用免疫组化策略观察TGF-β1及α-A细胞因子和I型胶原在大鼠肝脏组织中的表达及分布情况；用RT-PCR策略检测肝组织中TGF-β1的mRNA的水平；用WesternBlot策略检测TGF-β1及α-A蛋白在大鼠肝脏中的蛋白表达量。结果(1)肝功及肝纤维化指标的比较：与模型组比较，姜黄素及姜黄素衍生物均能有效地改善肝功能，降低大鼠血清中肝纤维化指标水平，降低肝组织羟脯氨酸（Hpy）含量，姜黄素衍生物组与模型组ALT、AST、HA、LN、PCIII、Hyp检测结果分别为（220.1±148.2）U/L比较（513.2±279.6）U/L、（366.7±157.3）U/L比较（700.5±305.9）U/L、（150.0±26.0）ug/L比较（292.8±105.6）ug/L、（28.2±4.8）ug/L比较（48.8±7.1）ug/L、（30.2±3.8）ug/L比较（46.3±6.4）ug/L、（293.8±54.3）ug/g比较（412.8±53.8）ug/g，二者差别均有统计学作用（P值均0.05）；(2)病理图片与病理分级的比较：与模型组比较，姜黄素衍生物组能显著降低肝脏病理学分级（姜黄素衍生物组病理学分级主要发布于2级，而模型组主要分布于5、6级），姜黄素衍生物组肝小叶结构较正常，有少量纤维组织增生，可见少量炎细胞浸润及脂肪变和空泡变，未见假小叶形成，纤维组织增生不显著，而模型组肝小叶结构破坏显著，炎细胞浸润及肝脂肪变显著，肝索排列紊乱，汇管区纤维组织显著增生，部分形成假小叶，姜黄素衍生物组较模型组显著抑制纤维增生，改善肝脏病理学组织结构；（3）用免疫组化策略检测，发现经过姜黄素衍生物治疗后的大鼠肝内TGF-β1和α-A分子表达较模型组显著减少，且I型胶原在姜黄素衍生物组中沉积显著减少。（4）RT-PCR法检测结果显示姜黄素衍生物组中TGF-β1的mRNA水平较模型组显著减少；WesternBlot策略检测结果显示TGF-β1和α-A蛋白表达量在肝组织中的表达较模型组显著减少降低，二者差别有统计学作用（P值0.05）。结论本探讨表明姜黄素衍生物具有显著的抗肝纤维化作用，而降低TGF-β1及α-A细胞因子表达，抑制肝星状细胞活化可能是其抗肝纤维化作用机制之一。关键词：肝纤维化论文姜黄素论文姜黄素衍生物论文转化生长因子β1论文平滑肌肌动蛋白α论文
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摘要6-8
ABSTRACT8-12
前言12-14
1 材料与策略14-21

1.1 实验材料14-17

1.1 主要药物及试剂14

1.2 主要仪器14-15

1.3 实验动物15

1.4 常用试剂的配置15-17

1.2 实验策略17-21

1.2.1 动物分组及实验设计17

1.2.2 标本采集17

1.2.2.1 血清标本采集17

1.2.2.2 肝组织标本采集17

1.2.3 测定指标及操作策略17-20

1.2.4 统计学数据浅析20-21

2 结果21-28
2.1 血清肝功能论文导读：及肝脏羟脯氨酸含量检测212.2血清肝纤维化指标检测结果21-222.3肝脏病理学变化22-242.4肝脏免疫组化检测结果24-262.5RT-PCR检测结果262.6Western-Blot检测结果26-283讨论28-30全文总结30-31参考文献31-33文献综述33-46参考文献42-46致谢46-47攻读硕士学位期间发表的文章47-48上一页12
及肝脏羟脯氨酸含量检测21

2.2 血清肝纤维化指标检测结果21-22

2.3 肝脏病理学变化22-24

2.4 肝脏免疫组化检测结果24-26

2.5 RT-PCR检测结果26

2.6 Western-Blot检测结果26-28

3 讨论28-30
全文总结30-31
参考文献31-33
文献综述33-46
参考文献42-46
致谢46-47
攻读硕士学位期间发表的文章47-48