探讨基因犬细小病毒分离鉴定及其蛋白基因序列

论文导读：-CATGAGTGATGGAGCAGTTCAACCAGAC-3'下游引物：5'-CTAGGTGCTAGTTGATATGTAATAAAC-3'。CPVVP2采取分子克隆技术对对所分离的11株CPVVP2蛋白基因进行了序列浅析。根据CPVVP2蛋白10个关键位点氨基酸的突变情况,结果CPV08-011、CPV09-02为CPV-2a；CPV09-04和CPV10-05与CPV-2a的联系最为密切,但是其VP2第898位核苷酸发生G-→A替换使
摘要：本探讨进行了犬细小病毒(CPV)的分离鉴定及其VP2蛋白基因的序列浅析探讨。用F81细胞以2008-2010年间不同地区送检的30份肠炎犬病料中分离出11株细小病毒,经形态学、理化学、生物学和分子病毒学等鉴定。结果这11株病毒均能在F81细胞上生长,产生典型的CPV细胞病变；,抗氯仿,耐酸,耐热,能被5-IUDR抑制,为DNA病毒,可凝集猪、马、猫的红细胞,不能凝集人、鸡、豚鼠、兔的红细胞,HA试验能被抗CPV的特异性抗体所抑制。鉴定结果证明这10株病毒均为细小病毒。根据Genbank上发表的CPV与FPV基因序列,利用DNAstar软件分别设计扩增CPV VP2基因。扩增CPV VP2基因的引物,上游引物：5'-C ATGAGTGATGGAGCAGTTCAACCAGAC-3'下游引物：5'-CTAGGTGCTAGTTGATATGTAATAAAC-3'。CPV VP2采取分子克隆技术对对所分离的11株CPV VP2蛋白基因进行了序列浅析。根据CPV VP2蛋白10个关键位点氨基酸的突变情况,结果CPV08-011、CPV09-02为CPV-2a；CPV09-04和CPV10-05与CPV-2a的联系最为密切,但是其VP2第898位核苷酸发生G-→A替换使其第300位氨基酸发生G→S替换(300G-)S)。CPV08-022、CPV09-01、CPV09-03、CPV10-01、CPV10-02、CPV10-03、CPV10-04为CPV-2b。不同毒株的VP2蛋白还发生其他的氨基酸替换,CPV09-04和CPV10-05的核苷酸发生700C-→T替换使氨基酸发生234H→Y替换；CPV10-03的核苷酸发生767G-→A替换,氨基酸发生256R--→K替换；CPV09-03、CPV09-04、CPV10-01、CPV10-02的核苷酸发生800T→A替换,氨基酸发生267F→Y替换。CPV08-011、CPV09-02的核苷酸发生889T-→G替换,氨基酸发生297S-→A替换。所分离的CPV毒株与参考毒株的核酸总体同源性在98%以上,CPV不同突变株的出现顺序及进化方式与文献报道一致,没有形成显著的CPV中国支。该探讨丰富了我国CPV的流行病学资料,为更为有效的防制CPV提供了实验数据。关键词：分离鉴定论文CPV论文VP2蛋白基因论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。摘要5-6
Abstract6-7
前言7-8
文献综述犬细小病毒的探讨进展8-17
1 CPV形态、基因组、复制以及装配特点8-10
2 CPV的理化性质、致病性10-11
3 CPV的起源及进化11-15
4 CPV疫苗的探讨近况15-17
犬细小病毒分离和鉴定17-27

1. 策略与材料17-18

1.1 病毒分离17

1.2 常规病毒学鉴定17-18

2 结果18-24

2.1 病毒分离18-19

2.2 常规病毒学鉴定结果19-24

3 讨论24-27

3.1 病毒分离24

3.2 CPV分型24-25

3.3 非同义替代25

3.4 进化方式25-27

结论27-28
参考文献28-35
CPV18-01135-47
致谢47