谈述序列猪源H5N1亚型禽流感病毒分离、鉴定及其进化要求
最后更新时间：2024-03-12
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论文导读：动物流行病学和公共卫生学具有重要的作用。关键词：猪源H5N1亚型禽流感病毒论文全基因序列论文系统进化浅析论文本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。摘要4-6Abstract6-9第一篇文献综述9-271禽流感的探讨进展9-102禽流感病
摘要：2003年以来,亚洲很多地区爆发H5N1亚型禽流感疫情,给很多地区带来严重的经济损失。很多国家和地区都有H5N1亚型禽流感病毒感染人事件的报道,据世界卫生组织统计,截至2012年2月世界上已有586人感染,346人死亡,病死率高达59%。H5N1高致病性禽流感病毒跨越种间屏障感染其它哺乳动物的事件也不断发生。当前已经发现猪、狐狸、豚鼠、猴、猫和虎等哺乳动物都能够感染H5N1亚型禽流感病毒。很多探讨者都一直关注H5N1亚型禽流感病毒是否会通过不断适应而在人群间引发新的流感大流行。猪在流感病毒的传播与储存中扮演着重要的角色。猪呼吸道内的上皮细胞中同时有着SA-a-2,6Gal(人流感病毒受体)年SA-a-2,3Gal(禽流感病毒受体)。这就意味着猪既可以感染人流感,也可以感染禽流感,甚至可以同时感染两种流感。猪作为流感病毒天然的混合器,有着着人-禽流感病毒在猪体内发生重组的可能性。这种可能性一旦成为事实,则会产生新的能够适应人间传播的流感病毒,以而引起人群间的流感大流行。由此,开展猪源禽流感病毒探讨具有重要的科学作用。本探讨收集了600余份疑似流感病猪肺部组织,经研磨处理后,在SPF鸡胚上进行病毒的分离,并对收获的鸡胚尿囊液进行血凝试验。结果以600份猪的样品中分离得到一株具有血凝性阳性的病毒株,将此病毒株经过SPF鸡胚增殖,提取病毒RNA,利用A型流感病毒通用引物进行核酸PCR扩增,通过1%琼脂糖凝胶电泳鉴定后,确定所分离毒株为流感病毒。为进一步确定所分离流感病毒的亚型,利用H5N1亚型流感病毒特异性鉴定引物进行PCR扩增,1%琼脂糖凝胶电泳,可见显著扩增的目的条带,进一步鉴定所分离毒株为H5N1亚型流感病毒。以GenBank数据库中收录的H5N1亚型禽流感病毒各片段基因序列为模板,运用Primer50引物设计软件设计H5N1亚型禽流感病毒的全基因测序引物,并委托北京华大生物科技有限公司合成,运用全基因测序引物对该株病毒全基因测序,最后进行基因序列浅析。系统进化浅析后发现,该株毒的大部分基因与A/Jiangsu/1/2007(H5N1)株进化树距离较近,其分支落在2000年～2010年我国人体内分离到的H5N1亚型流感病毒的分支内。对该株毒的血凝素蛋白(HA)的氨基酸浅析,该猪源禽流感病毒的HA裂解位点处有着着由多个碱性氨基酸组成的连接肽(PLRERRRKRG),与高致病性禽流感病毒的分子特点相一致。进一步证明了,猪体内的禽流感病毒有传播给人类的可能。本探讨为猪源H5N1AIV的监测、探讨和防制提供初步的试验依据,并对动物流行病学和公共卫生学具有重要的作用。关键词：猪源H5N1亚型禽流感病毒论文全基因序列论文系统进化浅析论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。摘要4-6
Abstract6-9
第一篇 文献综述9-27
1 禽流感的探讨进展9-10
2 禽流感病毒分子生物学探讨10-16
3 禽流感病毒的复制及致病性16-18
4 禽流感流行历史及近况18-20
5 H5N1亚型禽流感流行近况20-21
6 禽流感病毒的分离、鉴定21-26
7 本探讨的目的和作用26-27
第二篇 探讨内容27-46
第1章 病毒的分离与鉴定27-36
1 材料与策略27-31
2 结果31-34
3 讨论34-35
4 实验小结35-36
第2章 猪源H5N1亚型禽流感病毒的序列浅析36-46
1 材料与策略36-40
2 结果40-43
3 讨论43-44
4 实验小结44-46
结论46-47
参考文献47-54
致谢54-55
作者介绍55
摘要：2003年以来,亚洲很多地区爆发H5N1亚型禽流感疫情,给很多地区带来严重的经济损失。很多国家和地区都有H5N1亚型禽流感病毒感染人事件的报道,据世界卫生组织统计,截至2012年2月世界上已有586人感染,346人死亡,病死率高达59%。H5N1高致病性禽流感病毒跨越种间屏障感染其它哺乳动物的事件也不断发生。当前已经发现猪、狐狸、豚鼠、猴、猫和虎等哺乳动物都能够感染H5N1亚型禽流感病毒。很多探讨者都一直关注H5N1亚型禽流感病毒是否会通过不断适应而在人群间引发新的流感大流行。猪在流感病毒的传播与储存中扮演着重要的角色。猪呼吸道内的上皮细胞中同时有着SA-a-2,6Gal(人流感病毒受体)年SA-a-2,3Gal(禽流感病毒受体)。这就意味着猪既可以感染人流感,也可以感染禽流感,甚至可以同时感染两种流感。猪作为流感病毒天然的混合器,有着着人-禽流感病毒在猪体内发生重组的可能性。这种可能性一旦成为事实,则会产生新的能够适应人间传播的流感病毒,以而引起人群间的流感大流行。由此,开展猪源禽流感病毒探讨具有重要的科学作用。本探讨收集了600余份疑似流感病猪肺部组织,经研磨处理后,在SPF鸡胚上进行病毒的分离,并对收获的鸡胚尿囊液进行血凝试验。结果以600份猪的样品中分离得到一株具有血凝性阳性的病毒株,将此病毒株经过SPF鸡胚增殖,提取病毒RNA,利用A型流感病毒通用引物进行核酸PCR扩增,通过1%琼脂糖凝胶电泳鉴定后,确定所分离毒株为流感病毒。为进一步确定所分离流感病毒的亚型,利用H5N1亚型流感病毒特异性鉴定引物进行PCR扩增,1%琼脂糖凝胶电泳,可见显著扩增的目的条带,进一步鉴定所分离毒株为H5N1亚型流感病毒。以GenBank数据库中收录的H5N1亚型禽流感病毒各片段基因序列为模板,运用Primer50引物设计软件设计H5N1亚型禽流感病毒的全基因测序引物,并委托北京华大生物科技有限公司合成,运用全基因测序引物对该株病毒全基因测序,最后进行基因序列浅析。系统进化浅析后发现,该株毒的大部分基因与A/Jiangsu/1/2007(H5N1)株进化树距离较近,其分支落在2000年～2010年我国人体内分离到的H5N1亚型流感病毒的分支内。对该株毒的血凝素蛋白(HA)的氨基酸浅析,该猪源禽流感病毒的HA裂解位点处有着着由多个碱性氨基酸组成的连接肽(PLRERRRKRG),与高致病性禽流感病毒的分子特点相一致。进一步证明了,猪体内的禽流感病毒有传播给人类的可能。本探讨为猪源H5N1AIV的监测、探讨和防制提供初步的试验依据,并对动物流行病学和公共卫生学具有重要的作用。关键词：猪源H5N1亚型禽流感病毒论文全基因序列论文系统进化浅析论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。摘要4-6
Abstract6-9
第一篇 文献综述9-27
1 禽流感的探讨进展9-10
2 禽流感病毒分子生物学探讨10-16
3 禽流感病毒的复制及致病性16-18
4 禽流感流行历史及近况18-20
5 H5N1亚型禽流感流行近况20-21
6 禽流感病毒的分离、鉴定21-26
7 本探讨的目的和作用26-27
第二篇 探讨内容27-46
第1章 病毒的分离与鉴定27-36
1 材料与策略27-31
2 结果31-34
3 讨论34-35
4 实验小结35-36
第2章 猪源H5N1亚型禽流感病毒的序列浅析36-46
1 材料与策略36-40
2 结果40-43
3 讨论43-44
4 实验小结44-46
结论46-47
参考文献47-54
致谢54-55
作者介绍55