谈抗原性2010年H5N1亚型禽流感病毒分子特点及致病性结论

论文导读：11.3.2国外禽感染H5N1亚型HPAI的流行近况11-121.3.3人感染H5N1亚型HPAI的流行近况12-131.4AIV的流行病学特点13-141.4.1传染源131.4.2易感动物13-141.4.3发病季节141.4.4传播途径141.4.5生态学特点141.5AIV的遗传变异特点14-151.5.1抗原性变异14-151.5.2致病性变异151.6AIV的致病性分子基础15-181.

6.1HA15-161.

摘要：为了解2010年我国H5N1亚型禽流感病毒（AIV）的生物学特性，对2010年我国南方重点省市活禽市场监测分离到的12株H5N1亚型AIV进行了相关探讨。采取交叉血凝抑制试验进行抗原性浅析，结果表明：不同类型的病毒抗血清和病毒分离株的反应性有显著差别；两种新出现的病毒群Clade2.3.2C和Clade2.3.4B与目前利用的（Clade7）Re-4疫苗株和（Clade2.3.4）Re-5疫苗株之间有着一定的抗原差别。运用有限稀释法将病毒稀释后接种鸡胚纯化，提取病毒核酸，经反转录、PCR、扩增病毒基因组DNA，并进行全基因组序列测定，绘制遗传进化数，序列浅析结果显示：12株病毒全基因组核苷酸同源性均在95%以上，病毒的8片段基因大部分与野鸟源病毒A/greatcrested-grebe/Qinghai/1/2009(H5N1)和A/black-crownednightheron/HongKong/659/2008（H5N1）的核苷酸高度同源；CK/JS/S1006/2010的PB1基因与我国早期的H9N2病毒分离株高度同源，可见这些基因的来源比较复杂，可能属于多重重组病毒；HA蛋白裂解位点序列基序为341RRRKR345或341RRRRKR346，呈现典型的高致病力分子特点。在实验室环境下，用105EID50病毒剂量人工鼻腔感染4周龄SPF鸭发现，12株病毒对鸭的致死率有一定的差别，对鸭的致病性分为高、中、低三种类型，病毒在鸭体内呈全身性复制，并可通过呼吸道和消化道向外界排毒。模拟自然感染途径的方式用101EID50～106EID50病毒剂量人工鼻腔感染6周龄BALB/C小鼠，结果显示：H5亚型AIV对BALB/c小鼠的致病性不同，主要分为高、中致病性两种类型，大部分病毒对小鼠体现为高致病力，均在肺脏中高拷贝复制。关键词：H5N1论文AIV论文抗原性浅析论文序列浅析论文致病性论文
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Summary4-5
英文缩略表5-8
第1章 禽流感病毒的探讨进展8-20

1.1 引言8-9

1.2 AIV的结构组成及功能9-10

1.3 H5N1亚型HPAI的流行概况10-13

1.3.1 我国禽感染H5N1亚型HPAI的流行近况10-11

1.3.2 国外禽感染H5N1亚型HPAI的流行近况11-12

1.3.3 人感染H5N1亚型HPAI的流行近况12-13

1.4 AIV的流行病学特点13-14

1.4.1 传染源13

1.4.2 易感动物13-14

1.4.3 发病季节14

1.4.4 传播途径14

1.4.5 生态学特点14

1.5 AIV的遗传变异特点14-15

1.5.1 抗原性变异14-15

1.5.2 致病性变异15

1.6 AIV的致病性分子基础15-18

1.6.1 HA15-16

1.6.2 PB216

1.6.3 PB1-F2916-17

1.6.4 NS117-18

1.7 预防HPAI的公共卫生作用18-19

1.8 本探讨的目的及作用19-20

第2章 2010年H5N1亚型AIV的抗原性浅析20-23

2.1 材料与策略20

2.

1.1 病毒20

2.

1.2 血清20

2.

1.3 血清的交叉血凝-血凝抑制（HA-HI）试验20

2.2 结果20-21

2.3 讨论21-23

第3章 2010年H5N1亚型AIV的遗传演化浅析23-37

3.1 材料和策略23-27

3.

1.1 病毒和SPF鸡胚23

3.

1.2 试剂23

3.

1.3 引物23

3.

1.4 病毒的纯化与增殖23-24

3.

1.5 病毒的核酸提取24-25

3.

1.6 目的片段的扩增25

3.

1.7 琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物25

3.

1.8 PCR产物的回收与纯化25-26

3.

1.9 基因组序列测定及浅析26-27

3.2 结果27-35
3.

2.1 HA基因的遗传进化浅析27-29

3.

2.2 NA基因的遗传进化浅析29-33

3.

2.3 内部基因的遗传演化浅析33-35

3.3 讨论35-37
第4章 2010年H5N1亚型AIV对SPF鸭的致病性探讨37-41

4.1 材料与策略37-38

4.

1.1 病毒37

4论文导读：46参考文献46-55致谢55-56个人介绍56-57导师介绍57-58上一页12
.

1.2 实验动物37

4.

1.3 鸡胚半数感染量(EID50)测定37

4.

1.4 病毒在鸭体内的复制情况37-38

4.2 结果38-39

4.3 讨论39-41

第5章 2010年H5N1亚型AIV对BALB/c小鼠的致病性探讨41-45

5.1 材料与策略41-42

5.

1.1 病毒41

5.

1.2 实验动物41

5.

1.3 鸡胚半数感染量(EID50)测定41

5.

1.4 病毒在小鼠体内的复制情况41-42

5.

1.5 病毒MLD50的测定42

5.2 结果42-43
5.

2.1 病毒在小鼠体内的复制情况42-43

5.

2.2 病毒的MLD503643

5.3 讨论43-45
全文结论45-46
参考文献46-55
致谢55-56
个人介绍56-57
导师介绍57-58