探讨芍药芍药花抗氧化活性成分分离和鉴定书写

论文导读：萄糖苷(5)，1,2,3,4,6-没食子酸酰-β-D-葡1234下一页
摘要：芍药(Paeonialactiflora)为芍药科(Paenoiaeeae)芍药属(Paeonia)的著名草本花卉，是我国传统中药，其根具有行瘀、止痛、凉血、消肿等多种药用功能，广泛的运用于保健品、医药等领域。而芍药花是副产物，产量很大，具有较强的药理活性。本文重点对芍药花中化学成分进行提取、分离、分析和结构鉴定，并对比不同干燥模式处理的芍药花的抗氧化活性，为芍药花的开发运用提供论述基础。主要结论如下：1.采取分光光度法测定三种干燥模式处理的芍药花总黄酮和总酚的含量，其中在冷冻干燥处理的芍药花提取液中的总酚和总黄酮含量最高，分别为52.40±1.55mg/g和81.24±7.62mg/g。在自然阴干4天的条件下，芍药花提取液中的总黄酮和总酚的含量最低，分别为46.22±1.66mg/g和62.50±2.18mg/g。因此可从得出，冷冻干燥处理的芍药花总酚和总黄酮含量最高。2.采取化学发光法测定三种干燥模式处理的芍药花的抗氧化活性。分别测定了其提取液对O2-、H2O2和HO-的清除意义，通过对比其清除率IC50得出抗氧化活性大小为阴干烘干冻干，这与总酚和总黄酮的含量呈正相关，这表明，过长的干燥时间会导致活性物质的流失，不利于保持芍药花的活性成分。3.建立了立高效液相色谱-二极管阵列检测器/电喷雾质谱联用技术探讨芍药花中的花色苷类化合物的成分分析的办法，首先用含0.1%HCl的甲醇溶液提取芍药中的花色苷，然后经AB-8大孔树脂纯化，最后用高效液相色谱-电喷雾串联质谱（HPLC-DAD-ESI-MS2）进行紫外-可见光谱和质谱分析，鉴定出4种花色苷。经紫外-可见光谱、质谱和文献报道综合分析确定了芍药花中的主要花色苷是芍药素-3，5-二葡糖苷，含量为77.14%。含量较低的三种花色苷为矢车菊素-3，5-二葡糖苷，芍药素-3，5-乙酸酰二葡糖苷，飞燕草素-3-葡萄糖苷。4.采取聚酰胺柱层析、C18柱色谱、高效制备液相色谱、高速逆流色谱等对芍药花的化学成分进行初步探讨，首次以该部位分离得到16个化合物，经过质谱、1H-NMR和13C-NMR并和参考文献比较，鉴定为没食子酸(1)、没食子酸甲酯(2)、没食子酸乙酯(3)、1,2,3,6-没食子酸酰-β-D-葡萄糖苷(4)、异槲皮素-3-O-β-D-(2'-没食子酸酰)葡萄糖苷(5)，1,2,3,4,6-没食子酸酰-β-D-葡论文导读：摘要7-9Abstract9-12第一章综述12-211选材概况简介12-131.1芍药花探讨发展12-132.芍药花抗氧化性概述13-142.1自由基的概述132.2自由基的危害13-142.4抗氧化探讨的作用143芍药花中的花色苷14-183.1花色苷介绍143.2花色苷的结构14-153.3花色苷的提取、分离及纯化办法15-183.3.1花色苷的提取1
萄糖苷(6)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(7)、山奈酚-3-O-β-D-(2'-没食子酸酰)葡萄糖苷(8)、异鼠李素-3-O-D-葡萄糖苷(9)、山奈酚(10)、山奈酚-7-O-β-D-葡萄糖苷(11)、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(12)、1-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(13)、山奈酚-3,7-O-β-D-二葡萄糖苷(14)、芍药苷(15)、芍药内酯苷(16)。其中化合物5、7、8、9、10、11、12、14首次以在该种植物分出，化合物5、8、9首次以该属中分出。以物质基础的角度进一步说明芍药花的开发运用价值。5.采取HSCCC分离了芍药花中主要黄酮苷和没食子酸鞣质化合物。逆流色谱最佳两相溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-水（1:9:10，v/v/v）和石油醚-乙酸乙酯-正丁醇-水（1:9:0.5::10，v/v/v/v），共分离得到异槲皮素-3-O-β-D-(2'-没食子酸酰)葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D-(2'-没食子酸酰)葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-D-葡萄糖苷、山奈酚、山奈酚-7-O-β-D-葡萄糖苷和山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷7个黄酮苷类化合物，1,2,3,4,6-没食子酸酰-β-D-葡萄糖苷1个没食子酸鞣质。样品纯度高、分离时间快。高速逆流色谱法非常适合于芍药中活性成分的分离，是一种高效快速的分离办法。本探讨也为分离其他高极性化合物提供了一个好的办法和对策。关键词：芍药花论文抗氧化论文花色苷论文分离论文鉴定论文
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Abstract9-12
第一章 综述12-21
1 选材概况简介12-13

1.1 芍药花探讨发展12-13

2. 芍药花抗氧化性概述13-14

2.1 自由基的概述13

2.2 自由基的危害13-14

2.4 抗氧化探讨的作用14

3 芍药花中的花色苷14-18

3.1 花色苷介绍14

3.2 花色苷的结构14-15

3.3 花色苷的提取、分离及纯化办法15-18

3.1 花色苷的提取15

3.2 花色苷的分离15-16

3.3 花色苷的定性分析（结构鉴定）16-17

3.3.4 花色论文导读：芍药花提取物抗氧化活性实验23-242.3.1O_2-清除率的测定232.3.2H_2O_2清除率的测定232.3.3HO-清除率的测定23-243结果与讨论24-273.1不同干燥办法处理的芍药花提取液中的总酚总黄酮含量243.2芍药花提取物对O_2-的清除意义24-253.3芍药花提取物对H_2O_2的清除意义25-263.4芍药花提取物对HO-的清除意义26-274结论27-2
苷的定量分析17-18
4 芍药花活性化合物概述18-19

4.1 化合物常用分离技术18-19

4.

1.1 聚酰胺柱色谱法18

4.

1.2 硅胶柱色谱法18

4.

1.3 葡聚糖凝胶柱色谱18

4.

1.4 大孔吸附树脂法18-19

4.

1.5 高效液相（HPLC）分离法19

4.

1.6 薄层色谱法19

4.

1.7 高速逆流色谱19

5 本探讨的目的和作用19-21
第二章 芍药花抗氧化活性测定21-28
1 材料和仪器21-22

1.1 仪器21

1.2 材料试剂21-22

2. 试验办法22-24

2.1 芍药花的干燥和提取22

2.2 芍药花提取液化学成分的测定22-23

2.1 总黄酮含量的测定22

2.2 总酚含量的测定22-23

2.3 芍药花提取物抗氧化活性实验23-24

2.3.1 O_2-清除率的测定23

2.3.2 H_2O_2清除率的测定23

2.3.3 HO-清除率的测定23-24

3 结果与讨论24-27

3.1 不同干燥办法处理的芍药花提取液中的总酚总黄酮含量24

3.2 芍药花提取物对O_2-的清除意义24-25

3.3 芍药花提取物对H_2O_2的清除意义25-26

3.4 芍药花提取物对HO-的清除意义26-27

4 结论27-28
第三章 芍药花中的花色苷提取和鉴定28-34
1 试剂与仪器28

1.1 试剂28

1.2 仪器28

2 办法28-30

2.1 花色苷的提取28-29

2.2 花色苷含量测定29

2.3 花色苷纯化29

2.4 花色苷酸解和糖基部分的鉴定29-30

2.5 HPLC和MS条件30

3 结果与分析30-33

3.1 pH值示差法测定芍药花中花色苷含量30

3.2 芍药花色苷提取液的液相色谱分析30-31

3.3 芍药花色苷提取液的紫外-可见光谱分析31-32

3.4 花色苷酸解后糖基部分的鉴定32

3.5 花色苷的质谱分析32-33

4 小结33-34
第四章 芍药花中活性化合物探讨34-60
1 试剂与仪器34

1.1 实验材料和试剂34

1.2 仪器设备34

2 实验办法与结果34-59

2.1 芍药花化学成分提取与初步分离34-35

2.2 乙酸乙酯部位化学成分的分离35-40

2.1 AA部分制备液相分离36

2.2 高速逆流色谱（HSCCC）分离纯化AB和AC部分36-37

2.1 分配系数（K）的测定36

2.2 两相溶剂系统及样品溶液的制备36

2.2.2.3 HSCCC的论文导读：分离制备历程36-372.2.2.4HPLC条件372.2.3讨论37-402.2.3.1HPLC条件的优化372.2.3.2HSCCC溶剂系统的优化37-402.3水相化合物的制备40-412.4结构鉴定41-593.小结59-60结论60-62参考文献62-65附图65-77致谢77-78攻读学位期间发表论文状况78上一页1234
分离制备历程36-37

2.4 HPLC条件37

2.3 讨论37-40

2.3.1 HPLC条件的优化37

2.3.2 HSCCC溶剂系统的优化37-40

2.3 水相化合物的制备40-41

2.4 结构鉴定41-59

3. 小结59-60
结论60-62
参考文献62-65
附图65-77
致谢77-78
攻读学位期间发表论文状况78