探索软骨兔脂肪干细胞分离培养鉴定及成软骨分化实验

论文导读：
摘要：【目的】对兔脂肪来源的干细胞（rabbitadipose-derivedstemcells，RADSCs）的分离、培养和鉴定进行研究，并初步研究不同浓度转化生长因子β3（TranormingGrowthFactor-β3，TGF-β3）推动RADSCs向软骨细胞分化的可行性。为软骨组织工程中种子细胞的选择提供新思路。【办法】取成年大耳白兔腹股沟部或颈背部脂肪组织，使用酶消化法和密度梯度离心法获得细胞；进行原代和传代培养，观察细胞变化并绘制细胞生长曲线；流式细胞术和免疫荧光技术鉴定细胞表面CD分子；将获取的第三代细胞进行体外成软骨细胞诱导，分别于诱导的第1W、2W、3W进行形态学观察、甲苯胺蓝染色、阿利新蓝染色和Ⅱ型胶原（ColⅡ）的免疫组化染色。【结果】所获取细胞呈类成纤维细胞样贴壁快速生长，生长曲线呈对比典型的“S”型；传代后生长、增殖稳定可达20代从上；细胞表面抗原CD34、CD45呈阴性反应，CD44、CD29呈阳性反应，阳性率达97%从上；在TGF-β3的诱导下，细胞形态逐渐变圆，甲苯胺蓝染色、阿利新蓝染色和Ⅱ型胶原的免疫组化染色均呈强阳性，而对照组和空白组则不显著。【结论】初步鉴定成功分离得到了ADSCs，细胞体外增殖稳定快速，并且具有较好的成软骨分化的潜能，含10ng/mlTGF-β3浓度的诱导液更有利于ADSCs向软骨细胞分化。ADSCs有望成为理想的种子细胞运用于软骨组织工程从修复软骨损伤。关键词：脂肪干细胞论文TGF-β3论文成软骨分化论文软骨组织工程论文软骨损伤修复论文
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摘要6-8
Abstract8-10
前言10-11
实验材料11-12
实验办法12-15
实验结果15-17
讨论17-20
附图20-28
参考文献28-31
综述31-46
参考文献43-46
附录46-47
致谢47-48