试谈耐药TRAIL耐药Kasumi-1细胞株建立及mRNA表达谱差别电大
最后更新时间：2024-04-04
作者：用户投稿
本站原创
点赞:22854
浏览:97782
本站原创
点赞:22854
浏览:97782
论文导读：
摘要：探讨背景：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor related apoptosis inducing pgand, TRAIL)对人类白血病细胞有杀伤作用,而不损伤正常细胞,但其普遍耐药也限制了它的运用。体外对重组可溶性TRAIL(recombinant soluble TRAIL, rsTRAIL)诱导急性髓系白血病伴t(8；21)细胞株Kasumi-1凋亡的探讨发现,rsTRAIL到达一定浓度后,(?)Kasumi-1细胞株的存活率不再有显著下降,提示Kasumi-1细胞株对TRAIL有着一定的耐药性。第一部分TRAIL耐药的Kasumi-1细胞株的建立目的：建立TRAIL耐药的Kasumi-1细胞株,测定计算耐药相关指标。比较亲本株和耐药株的形态、分子生物学及TRAIL和受体的表达。策略：1)逐步递增培养液中rsTRAIL的浓度,使其间歇作用于Kasumi-1细胞,通过体外诱导筛选得到耐药株Kasumi-1R(Kasumi-1resistant cell pne,Kasumi-1R);2)采取CCK-8比色法,分别测定Kasumi-1和Kasumi-1R的生长曲线,以及加入不同浓度的rsTRAIL后24h、48h的生长曲线,计算两种细胞的IC50、耐药指数(Resistance Index, RI);3)瑞氏染色显微镜下观察两种细胞及用药后的形态；4) Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡；5)RT-PCR检测细胞AML1-ETO融合基因、ETO外显子9a、TRAIL的三个异构体及TRAIL受体1-4的mRNA表达；6)流式细胞术检测细胞表面TRAIL和TRAIL受体1-4的表达。结果：1)Kasumi-1R细胞增殖较Kasumi-1细胞快；2)Kasumi-1细胞24小时IC50为756.833ng/ml(logIC50为2.879±0.148),Kasumi-1R细胞24小时IC50为1634646.005ng/ml(logIC50为6.213±0.637), Kasumi-1R细胞24小时耐药系数RI为2159；(?)Kasumi-1细胞48小时IC50为345.390ng/ml(logIC50为2.538±0.153),Kasumi-1R细胞48小时IC50为33642.641ng/ml(logIC50为4.257±0.317),Kasumi-1R细胞48小时耐药系数RI为97；3)相同浓度rsTRAIL作用两株细胞后,Kasumi-1R细胞凋亡率低于Kasumi-1细胞；4) Kasumi-1细胞和Kasumi-1R细胞(?)AML1-ETO融合基因、ETO外显子9a和TRAIL的三个异构体及其受体1-4mRNA均有表达；5)Kasumi-1细胞和Kasumi-1R细胞表面TRAIL和TRAIL受体1-4的表达没有差别。结论：Kasumi-1R对rsTRAIL高度耐药。第二部分基因芯片检测细胞mRNA表达谱差别目的：比较Kasumi-1细胞和Kasumi-1R细胞mRNA表达谱差别,筛选耐药相关基因。策略：用Affymetrix Human Genome U13lus2.0Array分别做Kasumi-1细胞(3个生物学重复)和Kasumi-1R细胞(3个生物学重复)的mRNA表达谱浅析,找出表达差别基因。用GO功能注释浅析、Pathway富集度浅析等数据处理找寻与TRAIL耐药可能相关的基因。结果：与Kasumi-1细胞相比,Kasumi-1R细胞表达上调大于2倍的基因有1537个,表达下调大于2倍的基因有487个。其中BCL-2家族的抑凋亡基因BCL2上调3.153倍,BCL2A1上调18.23倍,参与J/STAT通路的IFNAR1上调12.841倍,TRAIL勺死亡受体TNFR10A表达下调3.256倍。结论：Kasum-1R TRAIL耐药可能与BCL2、 BCL2A1和IFNAR1的表达上调、DR4表达下调有关。关键词：Kasumi-1细胞论文TRAIL论文耐药论文DR4论文IFNAR论文BCL2论文BCL2A1论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文导读：AIL耐药探讨进展40-48参考文献46-48致谢48-49上一页12
论文可以联系人员哦。摘要4-6
ABSTRACT6-8
前言8-9
第一部分 TRAIL耐药的Kasumi-1细胞株的建立9-25
综述 白血病与TRAIL耐药探讨进展40-48
参考文献46-48
致谢48-49
摘要：探讨背景：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor related apoptosis inducing pgand, TRAIL)对人类白血病细胞有杀伤作用,而不损伤正常细胞,但其普遍耐药也限制了它的运用。体外对重组可溶性TRAIL(recombinant soluble TRAIL, rsTRAIL)诱导急性髓系白血病伴t(8；21)细胞株Kasumi-1凋亡的探讨发现,rsTRAIL到达一定浓度后,(?)Kasumi-1细胞株的存活率不再有显著下降,提示Kasumi-1细胞株对TRAIL有着一定的耐药性。第一部分TRAIL耐药的Kasumi-1细胞株的建立目的：建立TRAIL耐药的Kasumi-1细胞株,测定计算耐药相关指标。比较亲本株和耐药株的形态、分子生物学及TRAIL和受体的表达。策略：1)逐步递增培养液中rsTRAIL的浓度,使其间歇作用于Kasumi-1细胞,通过体外诱导筛选得到耐药株Kasumi-1R(Kasumi-1resistant cell pne,Kasumi-1R);2)采取CCK-8比色法,分别测定Kasumi-1和Kasumi-1R的生长曲线,以及加入不同浓度的rsTRAIL后24h、48h的生长曲线,计算两种细胞的IC50、耐药指数(Resistance Index, RI);3)瑞氏染色显微镜下观察两种细胞及用药后的形态；4) Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡；5)RT-PCR检测细胞AML1-ETO融合基因、ETO外显子9a、TRAIL的三个异构体及TRAIL受体1-4的mRNA表达；6)流式细胞术检测细胞表面TRAIL和TRAIL受体1-4的表达。结果：1)Kasumi-1R细胞增殖较Kasumi-1细胞快；2)Kasumi-1细胞24小时IC50为756.833ng/ml(logIC50为2.879±0.148),Kasumi-1R细胞24小时IC50为1634646.005ng/ml(logIC50为6.213±0.637), Kasumi-1R细胞24小时耐药系数RI为2159；(?)Kasumi-1细胞48小时IC50为345.390ng/ml(logIC50为2.538±0.153),Kasumi-1R细胞48小时IC50为33642.641ng/ml(logIC50为4.257±0.317),Kasumi-1R细胞48小时耐药系数RI为97；3)相同浓度rsTRAIL作用两株细胞后,Kasumi-1R细胞凋亡率低于Kasumi-1细胞；4) Kasumi-1细胞和Kasumi-1R细胞(?)AML1-ETO融合基因、ETO外显子9a和TRAIL的三个异构体及其受体1-4mRNA均有表达；5)Kasumi-1细胞和Kasumi-1R细胞表面TRAIL和TRAIL受体1-4的表达没有差别。结论：Kasumi-1R对rsTRAIL高度耐药。第二部分基因芯片检测细胞mRNA表达谱差别目的：比较Kasumi-1细胞和Kasumi-1R细胞mRNA表达谱差别,筛选耐药相关基因。策略：用Affymetrix Human Genome U13lus2.0Array分别做Kasumi-1细胞(3个生物学重复)和Kasumi-1R细胞(3个生物学重复)的mRNA表达谱浅析,找出表达差别基因。用GO功能注释浅析、Pathway富集度浅析等数据处理找寻与TRAIL耐药可能相关的基因。结果：与Kasumi-1细胞相比,Kasumi-1R细胞表达上调大于2倍的基因有1537个,表达下调大于2倍的基因有487个。其中BCL-2家族的抑凋亡基因BCL2上调3.153倍,BCL2A1上调18.23倍,参与J/STAT通路的IFNAR1上调12.841倍,TRAIL勺死亡受体TNFR10A表达下调3.256倍。结论：Kasum-1R TRAIL耐药可能与BCL2、 BCL2A1和IFNAR1的表达上调、DR4表达下调有关。关键词：Kasumi-1细胞论文TRAIL论文耐药论文DR4论文IFNAR论文BCL2论文BCL2A1论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文导读：AIL耐药探讨进展40-48参考文献46-48致谢48-49上一页12
论文可以联系人员哦。摘要4-6
ABSTRACT6-8
前言8-9
第一部分 TRAIL耐药的Kasumi-1细胞株的建立9-25
1、材料和策略9-15
2、实验结果15-24
3、结论24
4、讨论24-25
第二部分 基因芯片检测细胞mRNA表达谱差别25-371、材料和策略25-31
2、实验结果31-35
3、结论35
4、讨论35-37
参考文献37-40综述 白血病与TRAIL耐药探讨进展40-48
参考文献46-48
致谢48-49