研究细胞成骨细胞G1期调节蛋白与膝骨关节炎软骨下骨重塑联系及中药干预作用

论文导读：2只)。模型组、实验组行常规术前准备,根据改良Hulth法造模；假手术组行膝部切口,但不造模。术后1周开始每天驱赶所有动物2次,每次30分钟；并同时开始分组灌胃治疗,假手术组和模型组均给予生理盐水10ml/d灌胃,实验组给予透骨消痛颗粒水溶液1Oml/d(含透骨消痛颗粒1.12g)灌胃。三组均在术后

3、6、9、12周时间点,分批处死动物取材,

摘要：1目的揭示软骨下骨成骨细胞G1期调节蛋白Cycpn D1、CDK6、p21与膝骨关节炎的联系,并在细胞分子水平探讨透骨消痛颗粒对软骨下骨成骨细胞G1期调控的影响,进一步探讨透骨消痛颗粒有效防治膝骨关节炎的机制。2策略2.1动物实验探讨2.1.1动物分组与药物干预：抽签法随机分为3组,即：假手术组(32只)、模型组(32只)、实验组(32只)。模型组、实验组行常规术前准备,根据改良Hulth法造模；假手术组行膝部切口,但不造模。术后1周开始每天驱赶所有动物2次,每次30分钟；并同时开始分组灌胃治疗,假手术组和模型组均给予生理盐水10ml/d灌胃,实验组给予透骨消痛颗粒水溶液1Oml/d(含透骨消痛颗粒1.12g)灌胃。三组均在术后3、6、9、12周时间点,分批处死动物取材,各组每批各处死8只。2.1.2检测指标：X线摄片观察兔膝关节宏观结构的变化；光镜观察软骨下骨骨小梁微观组织形态结构的变化；运用双能x线骨密度仪检测软骨下骨密度的变化；运用RT-PCR法检测软骨下骨成骨细胞CycpnD1、CDK6和p21mRNA表达。2.2临床探讨按纳入与排除标准,选择漳州市中医院骨伤科2010年10月～2011年7月门诊就诊患者60例,用随机数字表法将其分为两组,治疗组(A组)与对照组(B组),分别采取透骨消痛颗粒和氨基葡萄糖胶囊治疗；A组：口服透骨消痛颗粒,每日2次,一次6克,连服6周。B组：口服氨基葡萄糖胶囊,每天二次,每次1粒(750mg),连服6周。治疗后分别于0、4、8周根据WOMAC指数对两组进行功能评分,观察两组患者膝关节疼痛、晨僵、日常活动度和X线变化情况。3结果3.1动物探讨结果3.1.1X线体现：术后3周,三组X线比较未见显著差别；假手术组自身术后3、6、9、12周膝关节X线比较未见显著差别；模型组和实验组自身术后3、6、9、12周膝关节X线比较,可见随时间推移,膝关节间隙狭窄和骨赘形成逐渐加重,术后6周后各组与假手术组比较,均具有显著性差别(P0.05),但实验组程度较模型组轻；且二者之间也具有显著性差别(P0.05)。3.1.2光镜观察：三组术后各时间点自身比较,假手术组未见差别；模型组可见随时间增加,膝关节软骨破坏、软骨下骨硬化逐渐加重,与假手术组比较时具有显著差别性(P0.05)；实验组介于二者之间；其中术后3周比较时,假手术组、实验组未见显著差别,模型组较二组稍差,但未见显著差别性。3.1.3骨密度仪检测：三组术后3、6、9、12周自身软骨下骨骨密度比较,假手术组未见显著变化,模型组软骨下骨骨密度逐渐增加；实验组软骨下骨骨密度也逐渐增增加,但增加程度比模型组轻；术后6周后三组分别比较,均有差别。3.1.4RT-PCR检测：软骨下骨各时间点的CycpnD1、CDK6、p21mRNA表达,假手术组未见差别；模型组CycpnD1、CDK6mRNA表达逐渐增强,p21mRNA表达逐渐减弱；实验组表达介于在二者之间。3.2临床探讨结果3.2.1WOMAC评分结果：治疗组和对照组的WOMAC总评分随时间增加,均显著逐渐减低,组内之间比较具有差别性,但两者之间未见显著差别性。3.2.2膝关节X线分型结果：治疗组和对照组各时间点X线组内和组间比较均未见显著差别性。4结论4.1在兔模型膝骨性关节炎发病历程中,软骨下骨成骨细胞的CycpnD1、CDK6mRNA表达逐渐增强,同时p21mRNA表达逐渐减弱,促使软骨下骨成骨细胞快速生长,使骨形成大于骨吸收,引起软骨下骨硬化,导致膝骨性关节炎的发生。4.2透骨消痛颗粒能提升兔膝骨性关节炎软骨下骨成骨细胞G1期调节蛋白负性调节因子p21的表达,抑制成骨细胞增殖,这可能是透骨消痛颗粒治疗膝骨性关节炎的机制之一。4.3透骨消痛颗粒可以有效改善膝骨性关节炎临床症状。关键词：骨关节炎论文膝/软骨下骨论文成骨细胞/浅析论文细胞周期蛋白/药物作用论文@透骨消痛颗粒论文兔论文
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Abstract8-11
前言11-14
第一部分 实验动物探讨14-33
1 实验材料14-15

1.1 实验药物14

1.2 实验动物14

1.3 主要试剂14

1.4 主要仪器14-15

2 实验策略15-18

2.1 实验动物前处理15

2.2 检测指标及策略15-18

3 统计学处理18-19
结果19-26
1 膝关节胫骨软骨下骨骨密度变化19
2 X线片观察结果19-21
3 软骨及软骨下骨光镜观察结果21-23
4 软骨下骨Cycpn D_

1、CDK6、p21 mRNA的RT-PCR检测结果23-26

讨论26-论文导读：准33-343、探讨对象344、症状体征评分34-35结果35-36讨论36-38结论38-39参考文献39-42附录42-44致谢44-45文献综述45-49参考文献47-49作者简历49上一页12
33
1 软骨下骨成骨细胞G_1 期调节蛋白在膝骨性关节炎发病历程的作用26-29

1.1 软骨下骨在膝骨关节炎发病历程中的作用26

1.2 软骨下骨成骨细胞与细胞周期蛋白的调控26-29

2 透骨消痛颗粒对软骨下骨成骨细胞G_1期调节蛋白的影响29-33

2.1 透骨消痛颗粒治疗骨性关节炎的中医基础论述29-30

2.2 透骨消痛颗粒对软骨下骨成骨细胞G_1期调节蛋白的作用30-33

第二部分 临床探讨33-38

1.病例来源33

2.病例选择标准33-34

3、探讨对象34

4、症状体征评分34-35

结果35-36
讨论36-38
结论38-39
参考文献39-42
附录42-44
致谢44-45
文献综述45-49
参考文献47-49
作者简历49