试析脑苷脂海参和海星脑苷脂抗肿瘤及改善癌症恶病质作用

论文导读：平。故本实验以海参纲的海地瓜和海星纲的多棘海盘车中分别提取脑苷脂，在体外和体内水平系统探讨了海参和海星脑苷脂抗肿瘤活性和改善癌症恶病质作用及其作用机制，并对其构效联系进行了初步探讨。主要探讨结果如下：本论文首先采取MTT法对海参脑苷脂及其长链碱的体外抗肿瘤活性进行了筛选。实验结果显示，海参脑苷脂及其长链碱可
摘要：脑苷脂属于鞘脂类，是生物细胞膜中广泛有着的一类重要的活性脂质，具有抗肿瘤、抗病毒、抗真菌、抗炎、免疫调节等多种活性功能。脑苷脂是有着于海参和海星体壁中的主要活性成分。目前关于海参和海星脑苷脂抗肿瘤活性的报道很少且只停留在体外实验水平。故本实验以海参纲的海地瓜和海星纲的多棘海盘车中分别提取脑苷脂，在体外和体内水平系统探讨了海参和海星脑苷脂抗肿瘤活性和改善癌症恶病质作用及其作用机制，并对其构效联系进行了初步探讨。主要探讨结果如下：本论文首先采取MTT法对海参脑苷脂及其长链碱的体外抗肿瘤活性进行了筛选。实验结果显示，海参脑苷脂及其长链碱可抑制HepG2、S180、95D、Caco-2和HGC-27等多种肿瘤细胞的增殖活性，且有显著的时间和剂量效应联系，体现出广泛的抗肿瘤活性，其中长链碱的体外抗肿瘤活性显著优于海参脑苷脂。随后，建立S180腹水瘤小鼠模型，并通过灌胃和腹腔注射两种给药方式在体内水平验证海参脑苷脂及其长链碱的抗肿瘤作用。结果发现，灌胃或腹腔注射长链碱均可显著延长S180腹水瘤小鼠的存活时间，体现出良好的体内抗肿瘤作用。但海参脑苷脂只有通过灌胃方式才可体现出显著的抗肿瘤活性，且抗肿瘤效果与长链碱相当，推测该活性与脑苷脂在肠道中经消化吸收后被分解为长链碱相关。该探讨结果提示海参脑苷脂抗肿瘤作用的主要活性单元是其长链碱。为了进一步探究脑苷脂抗肿瘤活性的构效联系及其作用机制，本论文又通过体外抗肿瘤实验以及体内建立S180肉瘤小鼠和腹水瘤小鼠两个动物模型，观察并比较了海参和海星脑苷脂抗肿瘤作用效果并探究其作用机制。实验结果发现，海参脑苷脂的体外抗肿瘤活性不如海星脑苷脂，但体内抗肿瘤活性却优于海星脑苷脂，可能与两种脑苷脂的脂肪酸和长链碱组成迥异以及经体内代谢后产物的活性差别相关。机制探讨结果表明，海参和海星脑苷脂可通过诱导肿瘤细胞凋亡抑制肿瘤细胞的增殖活性，并能通过提升机体的免疫功能和抗氧化能力以及通过线粒体信号通路启动肿瘤细胞凋亡等途径抑制肉瘤的生长、腹水量及腹水瘤细胞的存活并延长腹水小鼠存活时间。癌症恶病质是恶性肿瘤病患中常见的多因素导致的浪费型代谢综合症，主要体现为极度消瘦，体内脂肪和肌肉组织大量分解，是导致癌症病患生活质量严重降低和高死亡率的主要理由之一。故本论文利用S180腹水瘤小鼠模拟癌症恶病质模型，比较探讨了海参和海星脑苷脂改善癌症恶病质作用，并在细胞论文导读：
因子和分子水平上阐明其作用机制。实验结果发现，海参和海星脑苷脂均体现出良好的改善癌症恶病质功效，均可显著延缓癌症恶病质小鼠体重下降，抑制脂肪和肌肉组织分解。对其机制探讨表明，海参和海星脑苷脂可通过以下几条途径改善癌症恶病质：可以抑制促恶病质细胞因子TNF-α、IL-1和IL-6的分泌；可以抑制脂肪组织脂肪分解酶ATGL和HSL及脂肪动员因子ZAG的表达，抑制脂解；可以推动脂肪细胞分化、葡萄糖和脂肪酸转运及摄取，上调脂肪组织中SREBP-1c调控的脂肪合成基因的表达，推动脂肪合成；还可以抑制脂肪利用相关基因UCP2和PGC-1α的mRNA表达。有探讨报道，海星磷脂富含EPA和DHA等多不饱和脂肪酸，且体现出良好的抗肿瘤活性。最后，本论文以多棘海盘车中提取磷脂并与海星脑苷脂复配，比较探讨了海星脑苷脂及其磷脂复配后与脑苷脂、磷脂单独利用时体外和体内抗肿瘤活性的差别。实验结果表明，海星脑苷脂及其磷脂复配后抗肿瘤活性要显著优于海星脑苷脂、磷脂单独利用。本论文首次系统探讨了海参和海星脑苷脂抗肿瘤和改善癌症恶病质的活性，并对其结构和活性差别进行了比较，初步阐明了其作用机制。同时首次发现海星脑苷脂及其磷脂复配利用时体现出更好的抗肿瘤效果。本论文的探讨结果为海参的深度开发和海星的废物利用提供了论述基础和科学依据。关键词：海参论文海星论文脑苷脂论文抗肿瘤论文凋亡论文癌症恶病质论文细胞因子论文脂质代谢论文
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Abstract7-18
前言18-33
1 海参、海星脑苷脂探讨近况18-20

1.1 脑苷脂的来源及结构组成19

1.2 脑苷脂生物活性探讨19

1.3 海洋生物来源脑苷脂的结构和活性19-20

2 肿瘤的发生与探讨进展20-23

2.1 肿瘤发生理由20

2.2 肿瘤与细胞凋亡20-22

2.1 细胞凋亡20-21

2.2 肿瘤与细胞凋亡的联系21-22

2.3 肿瘤与免疫22-23

2.4 肿瘤与自由基23

3 癌症恶病质23-26

3.1 癌症恶病质概述23-25

3.

1.1 营养摄入不足23-24

3.

1.2 代谢异常24

3.

1.3 细胞因子的作用24-25

3.2论文导读：
癌症恶病质与脂质代谢25-26
3.

2.1 脂肪组织分解增加25-26

3.

2.2 脂肪组织合成减少26

3.

2.3 脂肪组织利用增加26

4 立题依据及探讨作用26-28
参考文献28-33
第一章 海参脑苷脂的抗肿瘤作用33-47
第一节 海参脑苷脂及其长链碱的体外抗肿瘤活性34-39
1 材料和策略34-37

1.1 材料和仪器34-35

1.1 实验材料34

1.2 细胞株34-35

1.3 实验试剂35

1.4 实验仪器35

1.2 策略35-36

1.2.1 海参脑苷脂及其长链碱制备策略35-36

1.2.2 海参脑苷脂脂质体及其长链碱溶液的制备36

1.2.3 海参脑苷脂及其长链碱对不同肿瘤细胞增殖的抑制作用36

1.3 数据统计处理36-37

2 结果37-38
3 讨论38-39
第二节 海参脑苷脂及其长链碱体内抗肿瘤活性39-44
1 材料和策略39-40

1.1 材料和仪器39-40

1.1 实验材料39

1.2 实验动物39

1.3 细胞株39

1.4 实验试剂39

1.5 实验仪器39-40

1.2 策略40

1.2.1 海参脑苷脂脂质体及其长链碱溶液的制备40

1.2.2 腹水瘤型小鼠模型的建立40

1.3 数据统计处理40

2 结果40-43

2.1 腹水瘤小鼠的一般情况40-41

2.2 对腹水瘤小鼠腹围和体重的变化的影响41-42

2.3 对腹水瘤小鼠存活时间的影响42-43

3 讨论43-44
本章小结44-45
参考文献45-47
第二章 海参和海星脑苷脂抗肿瘤作用的比较探讨47-70
第一节 海参和海星脑苷脂体外抗肿瘤作用的比较48-52
1 材料和策略48-50

1.1 材料和仪器48

1.1 实验材料48

1.2 细胞株48

1.3 实验试剂48

1.4 实验仪器48

1.2 策略48-50

1.2.1 海参和海星脑苷脂的制备策略48-49

1.2.2 海参和海星脑苷脂脂质体的制备策略49

1.2.3 海参和海星脑苷脂体外抗肿瘤活性作用49-50

1.2.4 细胞凋亡的形态学观察（AO/EB 染色法）50

1.3 数据统计处理50

2 结果50-52

2.1 对 S180 细胞增殖的影响50-51

2.2 对 S180 细胞凋亡形态学的影响51-52

3 讨论52
第二节 海参和海星脑苷脂对小鼠 S180 肉瘤抑制作用的比较52-58
1 材料与策略53-55
1.1 实验材料与仪器53论文导读：41.2.4肝脏中GSH含量和GSH-Px、GST活力的测定541.3数据统计处理54-552结果55-572.1对S180肉瘤小鼠肿瘤生长和体重的影响552.2对S180肉瘤小鼠免疫器官的影响55-562.3对S180肉瘤小鼠肝脏GSH含量、GSH-Px酶和GST酶活力的影响..56-573讨论57-58第三节海参和海星脑苷脂对小鼠腹水瘤抑制作用的比较58-651材
-54

1.1 实验材料53

1.2 实验动物53

1.3 细胞株53

1.4 实验试剂53

1.5 实验仪器53-54

1.2 实验策略54

1.2.1 海参和海星脑苷脂脂质体的制备策略54

1.2.2 S180 肉瘤小鼠模型的建立54

1.2.3 肝脏匀浆的制备54

1.2.4 肝脏中 GSH 含量和 GSH-Px、GST 活力的测定54

1.3 数据统计处理54-55

2 结果55-57

2.1 对 S180 肉瘤小鼠肿瘤生长和体重的影响55

2.2 对 S180 肉瘤小鼠免疫器官的影响55-56

2.3 对 S180 肉瘤小鼠肝脏 GSH 含量、GSH-Px 酶和 GST 酶活力的影响..56-57
3 讨论57-58
第三节 海参和海星脑苷脂对小鼠腹水瘤抑制作用的比较58-65
1 材料与策略59-61

1.1 实验材料与仪器59

1.1 实验材料59

1.2 实验动物59

1.3 细胞株59

1.4 实验试剂59

1.5 实验仪器59

1.2 实验策略59-61

1.2.1 海参和海星脑苷脂脂质体的制备策略59

1.2.2 腹水瘤型小鼠模型的建立59-60

1.2.3 腹水量和腹水癌细胞存活率的比较60

1.2.4 生命延长率的测定60

1.2.5 Real-Time PCR 法测定腹水瘤细胞凋亡相关基因的表达60-61

1.3 数据统计处理61

2 结果61-64

2.1 对腹水小鼠腹水量和腹水瘤细胞抑制的作用61-62

2.2 对腹水小鼠存活时间和生命延长率的影响62-63

2.3 对腹水小鼠腹水瘤细胞凋亡相关基因 mRNA 表达量的影响63-64

3 讨论64-65
本章小结65-67
参考文献67-70
第三章 海参和海星脑苷脂改善癌症恶病质作用的探讨70-88
1 材料与策略70-73

1.1 实验材料与仪器70-71

1.1 实验材料70-71

1.2 实验动物71

1.3 细胞株71

1.4 实验试剂71

1.5 实验仪器71

1.2 实验策略71-73

1.2.1 海参和海星脑苷脂脂质体的制备策略71

1.2.2 癌症恶病质小鼠模型的建立71

1.2.3 血清指标的测定71

1.2.4 血清中细胞因子的测定71-72

1.2.5 Real-time PCR 法测定癌症恶病质小鼠白色脂肪组织相关基因的表达5572-73

1.3 数据统计处理73

2 结果73-80
2.1 对癌症恶病质小鼠论文导读：2个人简历102-103硕士在读期间发表的学术论文和探讨成果103上一页12345
体重和摄食量的影响73-74

2.2 对癌症恶病质小鼠白色脂肪组织和肌肉质量的影响74

2.3 对癌症恶病质小鼠血清基本生化指标的影响74-75

2.4 对癌症恶病质小鼠血清中细胞因子含量的影响75-76

2.5 对癌症恶病质小鼠脂肪动员相关基因 mRNA 表达量的影响76-77

2.6 对癌症恶病质小鼠脂肪组织合成相关基因 mRNA 表达量的影响77-78

2.7 对癌症恶病质小鼠脂肪组织 SREBP-1c 及其靶基因 mRNA 表达量的影响78-79

2.8 对癌症恶病质小鼠推动脂肪利用相关基因 mRNA 表达量的影响79-80

3 讨论80-84
本章小结84-85
参考文献85-88
第四章 海星脑苷脂、磷脂复配脂质体抗肿瘤作用的探讨88-99
1 材料和策略89-91

1.1 材料和仪器89

1.1 实验材料89

1.2 细胞株89

1.3 实验动物89

1.4 实验试剂89

1.5 实验仪器89

1.2 策略89-90

1.2.1 海星脑苷脂、磷脂的制备策略89-90

1.2.2 海星脑苷脂、磷脂复配脂质体的制备策略90

1.2.3 海星脑苷脂、磷脂复配脂质体体外抗肿瘤活性作用90

1.2.4 细胞凋亡的形态学观察（AO/EB 染色法）90

1.2.5 S180 肉瘤小鼠模型的建立90

1.2.6 S180 腹水瘤型小鼠模型的建立90

1.3 数据统计处理90-91

2 结果91-94

2.1 对 S180 细胞增殖的影响91

2.2 对 S180 细胞凋亡形态学的影响91-92

2.3 对 S180 肉瘤小鼠肿瘤生长和体重的影响92-93

2.4 对 S180 肉瘤小鼠免疫器官的影响93-94

2.5 对腹水瘤小鼠存活时间的影响94

3 讨论94-95
本章小结95-97
参考文献97-99
结论99-100
本论文的特点及革新之处100-101
致谢101-102
个人简历102-103
硕士在读期间发表的学术论文和探讨成果103