浅论果蝇光照条件变化对果蝇睡眠—觉醒节律影响及刺五加干预学报

论文导读：眠—觉醒节律的影响。策略：1、光照条件变化对2-7日龄野生型CS品系黑腹果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律的影响：选择2日龄、3日龄、4日龄、5日龄、6日龄、7日龄果蝇作为观察对象,雌雄分组,每组32只。以果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律为考察指标,利用果蝇活动监测系统(DAMS)进行连续7天24h监测,分别考察不同日龄果蝇在相同光照强度
摘要：目的：以果蝇为方式生物,探讨光照条件变化和刺五加干预对果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律的影响。策略：1、光照条件变化对2-7日龄野生型CS品系黑腹果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律的影响：选择2日龄、3日龄、4日龄、5日龄、6日龄、7日龄果蝇作为观察对象,雌雄分组,每组32只。以果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律为考察指标,利用果蝇活动监测系统(DAMS)进行连续7天24h监测,分别考察不同日龄果蝇在相同光照强度下不同光照环境(12/12h明暗交替环境、24h持续光照环境、24h持续黑暗环境和12/12h明暗颠倒环境)里的睡眠时间和睡眠—觉醒节律的变化；2、刺五加对光照条件变化所致7日龄野生型CS品系黑腹果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律的干预作用探讨：选择7日龄果蝇作为观察对象,分为空白组、模型组、模型给药组,模型给药组分别给予浓度为0.25%、1%、4%的刺五加,连续给药4天,以果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律为考察指标,利用果蝇活动监测系统(DAMS)对7日龄果蝇进行24h连续监测,分别考察不同光照环境下(12/12h明暗交替环境、24h持续光照环境、24h持续黑暗环境和12/12h明暗颠倒环境)刺五加对果蝇睡眠时间影响的量效联系以及对果蝇睡眠—觉醒节律的影响；3、24h持续黑暗环境对7日龄野生型CS品系黑腹雌果蝇不同时间点的脑部5-HT和DA变化的影响：选择7日龄雌果蝇作为观察对象,以5-HT和DA为考察指标,考察12/12h明暗交替和24h持续黑暗环境下,7日龄雌果蝇在不同时间点(16：00、19：00、22：00、1：00、4：00和7：00)脑部5-HT和DA的含量变化；4、刺五加对24h持续黑暗环境下7日龄野生型CS品系黑腹雌果蝇19：00脑部5-HT和DA含量的影响：选择7日龄雌果蝇作为观察对象,以5-HT和DA为考察指标,考察给予刺五加后7日龄雌果蝇19：00脑部5-HT和DA的含量变化；5、刺五加干预对24h持续黑暗环境下7日龄野生型CS品系黑腹雌果蝇脑部睡眠相关基因表达的影响：选择7日龄雌果蝇作为观察对象,运用RT-PCR技术,以果蝇脑部per、tim、Obp99a、Sug、Hsc70-3基因为考察指标,考察给予刺五加前后24h持续黑暗环境下7日龄雌果蝇19：00脑部睡眠相关基因相对表达量的变化。6、刺五加对12/12h明暗交替环境下7日龄FBst0025859论文导读：动监测系统(DAMS),考察cry基因敲除型雌果蝇在12/12h明暗交替环境和给予刺五加后其睡眠时间和睡眠—觉醒节律的变化。结果：1、光照条件变化对2-7日龄果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律的影响：1.1与处于12/12h明暗交替环境下同日龄同性别果蝇比较：①处于12/12h明暗颠倒环境的雌雄果蝇,2-7日龄白天睡眠时间均延长、有极显著性差别(*
品系cry基因敲除型雌果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律的影响：选择7日龄cry基因敲除型雌果蝇和7日龄野生型Canton S品系黑腹雌果蝇作为观察对象,利用果蝇活动监测系统(DAMS),考察cry基因敲除型雌果蝇在12/12h明暗交替环境和给予刺五加后其睡眠时间和睡眠—觉醒节律的变化。结果：1、光照条件变化对2-7日龄果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律的影响：1.1与处于12/12h明暗交替环境下同日龄同性别果蝇比较：①处于12/12h明暗颠倒环境的雌雄果蝇,2-7日龄白天睡眠时间均延长、有极显著性差别(**p0.01),夜晚睡眠时间均缩短、有极显著性差别(**p0.01),24h总睡眠时间均无显著差别(p0.05)。②处于24h持续光照环境下,雌果蝇2-7日龄白天睡眠时间均延长、有极显著性差别(**p0.01),夜晚睡眠时间均缩短、有极显著性差别(**p0.01),2日龄24h总睡眠时间延长、有显著性差别(*p0.05),4-6日龄24h总睡眠时间均缩短、有极显著性差别(**P0.01)；雄果蝇2-7日龄白天睡眠时间均无显著差别(p0.05),夜晚睡眠时间均缩短、有极显著性差别(**p0.01),2、3日龄24h总睡眠时间均缩短、有显著性差别(*p0.05),5-7日龄24h总睡眠时间均缩短、有极显著性差别(**p0.01)。③处于24h持续黑暗环境下,雌果蝇2-5日龄白天睡眠时间均延长、有极显著性差别(**p0.01),夜晚睡眠时间均缩短、有显著性差别(*p0.05),2、3日龄24h总睡眠时间均延长、有显著性差别(*p0.05),4日龄24h总睡眠时间延长、有极显著性差别(**p0.01),5-7日龄24h总睡眠时间均无著性差别(p0.05)；雄果蝇2、3日龄体现为白天睡眠时间延长,具有极显著差别(*p0.05,**p0.01),夜晚睡眠时间缩短,具有极显著差别(**p0.01),4-7日龄白天睡眠时间缩短具有极显著差别(*p0.05,**p0.01),夜晚睡眠时间无显著性差别(p0.05),6、7日龄24h总睡眠时间缩短,具有显著性差别(*p0.05,**p0.01)。1.2与处于相同光照环境下同性别果蝇的前一日龄组比较：①处于12/12h明暗交替环境下,雌果蝇2-7日龄24h总睡眠时间均无显著性差别(p0.05)；雄果蝇3、4日龄24h总睡眠时间均缩短、有显著性差别论文导读：觉醒节律的干预作用探讨：2.1与同一光照环境下7日龄同性别果蝇比较：①0.25%、1%、4%的刺五加给药4天后,处于12/12h明暗上一页1234567下一页
((?)p0.05),6日龄24h总睡眠时间延长有显著性差别((?)p0.05)。②处于12/12h明暗颠倒环境下,雌果蝇2-7日龄24h总睡眠时间均无显著性差别(p0.05)；雄果蝇3日龄24h总睡眠时间缩短、有极显著性差别(##p0.01),其余日龄24h总睡眠时间均无显著性差别(p0.05)。③处于24h持续光照环境下,雌果蝇3、4日龄24h总睡眠时间均缩短,有显著性差别(#p0.05,##p0.01),7日龄24h总睡眠时间延长,有极显著性差别(##p0.01)；雄果蝇3日龄24h总睡眠时间缩短,有显著性差别(#p0.05),7日龄24h总睡眠时间延长,有显著性差别(#p0.05)。④处于24h持续黑暗环境下的雌雄果蝇3、4日龄24h总睡眠时间均缩短,有显著性差别(#p0.05,##p0.01),5-7日龄24h总睡眠时间无著性差别(p0.05)。1.3处于12/12h明暗交替环境下雌雄果蝇的睡眠—觉醒节律均呈周期性变化,即6：00—14：00和17：00—20：00活动显著增加,14：00—17：00和20：00—次日6：00睡眠显著增加,在7：00和19：00前后均出现活动高峰。与处于12/12h明暗交替环境下的果蝇比较：①处于12/12h明暗颠倒环境下雌雄果蝇的睡眠—觉醒节律均呈现与比较组相反的周期性变化,即8：00—19：00和21：00—24：00睡眠显著增加,19：00—21：00和24：00—次日8：00活动显著增加,但在7：00和19：00前后同样出现活动高峰；②处于24h持续光照环境下雌雄果蝇的睡眠—觉醒节律周期性基本消失,即7：00—次日7：00睡眠和活动交替且杂乱分布,随日龄的增加活动次数逐渐增加,同时7：00和19：00前后的活动高峰消失；③处于24h持续黑暗环境下雌雄果蝇的睡眠—觉醒节律呈周期性变化,其变化与比较组的周期变化类似,在4：00—18：00活动显著增加,18：00—次日4：00睡眠显著增加,同样在7：00前后出现活动高峰,但19：00前后的活动高峰消失。同时,处于以上三种光照环境下的果蝇的睡眠—觉醒节律均以4日龄开始显现,7日龄趋于稳定。2、刺五加对光照条件变化所致7日龄果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律的干预作用探讨：2.1与同一光照环境下7日龄同性别果蝇比较：①0.25%、1%、4%的刺五加给药4天后,处于12/12h明暗论文导读：睡眠时间,浓度为4%的刺五加时作用显著,但此浓度药对果蝇的睡眠-觉醒节律影响不显著。对于处于24h持续黑暗环境下的果蝇,刺五加通过增加雌果蝇白天活动次数和连续活动时间,减少其白天片段化睡眠,影响其睡眠-觉醒节律,其中0.25%的刺五加对此作用显著；刺五加通过增加雄果蝇24h活动次数和连续活动时间,减少其片段化睡眠,影响果蝇
颠倒环境的雌雄果蝇睡眠时间均无显著性差别(p0.05)。②给予24h持续光照环境下果蝇不同浓度刺五加后,1%、4%的刺五加均能缩短雌果蝇24h总睡眠时间、有显著性差别(*p0.05),1%的刺五加能缩短夜晚雌果蝇睡眠时间、有显著性差别(*p0.05),4%的刺五加均能缩短雌果蝇白天和夜晚睡眠时间、有显著性差别(*p0.05)；4%的刺五加能缩短雄果蝇24h总睡眠时间、有显著性差别(*p0.05)；③给予24h持续黑暗环境下果蝇不同浓度刺五加后,0.25%、1%、4%的刺五加均能减少雌果蝇24h总睡眠时间、白天睡眠时间和夜晚睡眠时间、均有极显著性差别(**p0.01),1%的刺五加均可缩短雄果蝇24h总睡眠时间和夜晚睡眠时间、有显著性差别(*p0.05),4%的刺五加均可缩短雄果蝇24h总睡眠时间和夜晚睡眠时间、有极显著性差别(**p0.01)。2.2经浅析果蝇昼夜活动节律图与睡眠-觉醒图知,刺五加能部分增加12/12h明暗颠倒环境下雌雄果蝇的24h活动次数,但对活动节律和睡眠-觉醒节律影响不显著。刺五加能增加24h持续光照环境下雌雄果蝇24h活动次数和连续活动时间,减少果蝇片段化睡眠,影响睡眠时间,浓度为4%的刺五加时作用显著,但此浓度药对果蝇的睡眠-觉醒节律影响不显著。对于处于24h持续黑暗环境下的果蝇,刺五加通过增加雌果蝇白天活动次数和连续活动时间,减少其白天片段化睡眠,影响其睡眠-觉醒节律,其中0.25%的刺五加对此作用显著；刺五加通过增加雄果蝇24h活动次数和连续活动时间,减少其片段化睡眠,影响果蝇的睡眠-觉醒节律,1%的刺五加对此作用显著。3、24h持续黑暗环境对不同时间点的7日龄雌果蝇脑部5-HT和DA变化的影响：随着睡眠的深入,处于12/12h明暗交替环境下雌果蝇脑部5-HT和DA含量均呈现先降低、后升高、再降低的走势；处于24h持续黑暗环境下的雌果蝇脑部5-HT含量呈现先升高,后降低的走势,且在16：005-HT含量较处于同时间点12/12h明暗交替环境下的雌果蝇脑部5-HT含量降低,有显著性差别(*P0.05)；DA含量呈现逐渐升高的走势,16：00、19：00、22：00的雌果蝇脑部DA含量比同时间点的处于12/12h明暗交替环境下的雌果蝇脑部DA含量降低,有显著性差别(*p0.05),但二者间的含量差距随时间变化逐渐降低,1：00时二者含量相比论文导读：日龄CS雌果蝇比较,白天睡眠时间延长,有显著性差别(**p0.01)；与处于12/12h明暗交替环境下7日龄CS雌果蝇相比较,白天睡眠时间延长,有显著性差别((?)p0.01)；0.25%刺五加给药4天后,7日龄cry基因敲除型雌果蝇白天睡眠时间减少,有显著性差别(**p0.01)。②处于12/12h明暗交替环境下的7日龄cry基因敲除型雌果蝇的睡眠—觉醒节律呈周期
较,无显著性差别(p0.05),4：00、7：00时处于24h持续黑暗环境下雌果蝇脑部DA含量逐渐比处于12/12h明暗交替环境下雌果蝇脑部DA含量增高,有显著性差别(*p0.05)。4、刺五加对24h持续黑暗环境下7日龄雌果蝇19：00脑部5-HT和DA含量的影响：0.25%的刺五加给药4天对处于24h持续黑暗环境下7日龄雌果蝇19：00脑部5-HT含量的增加无显著性影响(p0.05),但能显著增加DA的含量(*P0.05)。5、刺五加干预对24h持续黑暗环境下7日龄雌果蝇脑部睡眠相关基因表达的影响：与处于12/12h明暗交替环境下7日龄雌果蝇19：00脑部各基因的表达量比较,处于24h持续黑暗环境7日龄雌果蝇19：00脑部基因per是其7.32倍,tim是其3.99倍,Hsc70-3是其4倍,Obp99a是其3.81倍,Sug是其16倍。给予0.25%的刺五加4天后,24h持续黑暗环境下7日龄雌果蝇在19：00脑部各基因相对表达量较处于12/12h明暗交替环境7日龄雌果蝇19：00脑部各基因相对表达量均出现不同程度的降低,per降至2.2倍,tim降至0.29倍,Hsc70-3降至0.35倍,Obp99a降至0.96倍,Sug降至0.54倍。6、刺五加对12/12h明暗交替环境下7日龄FBst0025859品系cry基因敲除型雌果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律的影响：①处于12/12h明暗交替环境下7日龄cry雌果蝇,与处于24h持续黑暗环境下7日龄CS雌果蝇比较,白天睡眠时间延长,有显著性差别(**p0.01)；与处于12/12h明暗交替环境下7日龄CS雌果蝇相比较,白天睡眠时间延长,有显著性差别((?)p0.01)；0.25%刺五加给药4天后,7日龄cry基因敲除型雌果蝇白天睡眠时间减少,有显著性差别(**p0.01)。②处于12/12h明暗交替环境下的7日龄cry基因敲除型雌果蝇的睡眠—觉醒节律呈周期性变化,其变化情况在处于12/12h明暗交替环境和处于24h持续黑暗环境下的7日龄CS雌果蝇的睡眠—觉醒节律之间,体现为4：00—19：00活动与睡眠交替进行,19：00—次日4：00睡眠显著增加,且7：00和19：00前后均出现活动高峰。③给予0.25%刺五加4天后,处于12/12h明暗交替环境下7日龄cry基因敲除型雌果蝇的白天活动次数和连续活动时间增加,片段论文导读：
化睡眠减少,睡眠—觉醒节律部分恢复到12/12h明暗交替环境下7日龄cs雌果蝇的睡眠—觉醒节律。结论：1、同等光照强度下不同光照环境对果蝇的睡眠时间和睡眠—觉醒节律影响不同。2、刺五加改善24h持续黑暗环境下7日龄CS雌雄果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律的最佳给药剂量分别为0.25%刺五加给药4天和1%刺五加给药4天。但对12/12h明暗颠倒环境和24h持续光照环境下7日龄果蝇,刺五加改善其睡眠时间和睡眠—觉醒节律作用不显著。3、处于12/12h明暗交替环境和24h持续黑暗环境下7日龄CS品系雌果蝇脑部5-HT和DA含量随时间的变化而变化。4、刺五加改善果蝇睡眠—觉醒节律的机制可能与果蝇脑部神经递质5-HT和DA以及per、tim、Obp99a等基因变化有关。5、刺五加能部分恢复12/12h明暗交替环境下7日龄FBst0025859品系cry基因敲除雌果蝇的睡眠—觉醒节律。关键词：果蝇论文睡眠论文刺五加论文基因论文
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中文摘要5-11
ABSTRACT11-19
前言19-20
文献综述20-35
1 睡眠—觉醒节律探讨近况20-27

1.1 昼夜节律的概念及机制探讨20

1.2 昼夜节律的特性及启动开关20

1.3 昼夜节律的结构和功能20-23

1.4 昼夜节律的负反馈方式23

1.5 昼夜节律对CCGs的调控23

1.6 睡眠—觉醒节律的调节机制探讨23-27

2 果蝇在昼夜节律探讨中的运用27-32

2.1 方式生物的概念27-28

2.2 果蝇作为方式生物的优势28-29

2.3 果蝇的昼夜节律系统组成29

2.4 果蝇分子生物钟的反馈环路29

2.5 影响果蝇昼夜节律的因素29-31

2.6 基因敲除型果蝇探讨进展31-32

3 刺五加的药理作用探讨进展32-33

3.1 对中枢神经系统的作用32

3.2 抗氧化作用32-33

3.3 抗衰老作用33

3.4 抗肿瘤作用33

3.5 对心血管系统的作用33

4 本课题探讨思路33-35
实验部分35-109
第一部分 光照条件变化对野生型Canton S品系黑腹果蝇睡眠时间和睡眠-觉醒节律的影响35-67
1 实验材料35
2 实验环境35
3论文导读：料102-1032实验环境1033实验策略103-1054实验结果105-109讨论109-113结论113-114参考文献114-122致谢122-124攻读博士学位期间发表的论文124-125个人简历125上一页1234567
实验策略35-38
4 实验结果38-67
第二部分 刺五加对光照条件变化所致7日龄野生型Canton S品系黑腹果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律转变的干预作用探讨67-86
1 实验材料67-68
2 实验环境68
3 实验策略68-70
4 实验结果70-86
第三部分 刺五加对光照条件变化所致7日龄野生型Canton S品系黑腹果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律转变干预作用的机制探讨86-102
1 实验材料86-87
2 实验环境87
3 实验策略87-93
4 实验结果93-102
第四部分 刺五加对光照条件变化所致7日龄FBs t0025859品系cry基因敲除型雌果蝇睡眠时间和睡眠—觉醒节律转变干预作用的机制探讨102-109
1 实验材料102-103
2 实验环境103
3 实验策略103-105
4 实验结果105-109
讨论109-113
结论113-114
参考文献114-122
致谢122-124
攻读博士学位期间发表的论文124-125
个人简历125