分析酪氨酸新型曲酸衍生物合成及其在虾类保鲜中运用

论文导读：,合成了二个系列的曲酸衍生物,即曲酸与醛的缩合产物和曲酸的氨基酸衍生物。评价了它们对酪氨酸酶的抑制意义和抑菌能力,研究了曲酸的氨基酸衍生物对酪氨酸酶的抑制机理及对南美白对虾的保鲜效果。本论文主要探讨结果如下：1.从曲酸为原料,通过一系列的反应,最终得到了二个不同系列的曲酸衍生物,其结构分别用1HNMR,13CNMR,质谱
摘要：虾类是一种低脂肪、低热量、高蛋白的健康食品,其肉质鲜美、风味独特,在膳食结构中不可或缺。但新鲜虾类在贮藏期间易于发生黑变,严重影响了其外观品质和商品价值。引起虾类的黑变主要理由是酪氨酸或其衍生物等水溶性色原物质在虾体内酪氨酸酶的催化下被氧分子氧化形成了黑色素。曲酸具有较强的酪氨酸酶抑制活性,在食品工业中有一定的运用。由此,对曲酸分子进行修饰合成新型的曲酸衍生物是寻找更强的酪氨酸酶抑制剂的有效途径。本论文旨在通过研制一种新型的曲酸衍生物,通过其对酪氨酸酶的抑制活性、体外的抗菌活性试验和对虾保鲜效果的初步探讨,探索其在水产品保鲜中的运用前景。本论文通过从曲酸为原料,合成了二个系列的曲酸衍生物,即曲酸与醛的缩合产物和曲酸的氨基酸衍生物。评价了它们对酪氨酸酶的抑制意义和抑菌能力,研究了曲酸的氨基酸衍生物对酪氨酸酶的抑制机理及对南美白对虾的保鲜效果。本论文主要探讨结果如下：1.从曲酸为原料,通过一系列的反应,最终得到了二个不同系列的曲酸衍生物,其结构分别用1HNMR,13CNMR,质谱进行了确认。2.从L-酪氨酸为底物,分别探讨二个系列曲酸衍生物抑制酪氨酸酶单酚酶的意义,测定了其IC50,结果表明化合物7的活性高于化合物3；其次,依据单酚酶活性抑制探讨结果,选取了较好的两个化合物(7d,7e),探讨它们对二酚酶活性的抑制机制类型,最终使用Lineweer-Burk双倒数作图法,确定其机制类型为可逆混合型抑制。3.从大肠杆菌、金葡萄球菌、沙门氏菌、副溶血性弧菌和枯草芽孢杆菌为供试菌种,采取牛津杯实验办法检测曲酸衍生物的抑菌意义。通过抑菌圈直径大小的对比来评价抑菌活性的强弱。结果显示曲酸衍生物7e和7d的抑菌效果显著强于曲酸；其次,探讨曲酸衍生物与曲酸的最低杀菌浓度,实验结果表明：曲酸对大肠杆菌、金葡萄球菌、沙门氏菌、副溶血性弧菌和枯草芽孢杆菌的最低杀菌浓度(MBC)值分别为0.178、0.355、1.42、1.42、0.355mg/mL;检测样品(7e)对大肠杆菌、金葡萄球菌、沙门氏菌、副溶血性弧菌和枯草芽孢杆菌的最低杀菌浓度(MBC)值分别为0.037、0.0185、0.148、0.037、0.295mg/mL。用MTT分析法对曲酸和化合物7e这两种抗菌剂进行细胞毒实验,发现它们对检测细胞的抑制率都不到5%,说明此抗菌剂在细胞水平上是安全的。4.从南美白对虾为探讨对象,从感官评价、细菌总数、pH值、挥发性盐基氮为鲜度指标；通过曲酸衍生物处理虾体贮藏试验初步探讨了其对南美白对虾保鲜防腐意义。结果显示曲酸衍生物与曲酸相比有较好的保鲜效果。关键词：酪氨酸酶论文曲酸衍生物论文抑制意义论文抑菌论文南美白对虾论文
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ABSTRACT5-12
第1章 引言12-23

1.1 酪氨酸酶概况12-14

1.1 酪氨酸酶的结构和理化性质13-14

1.2 酪氨酸酶与黑色素的生成14

1.2 酪氨酸酶抑制剂探讨概况14-20

1.2.1 酪氨酸酶抑制剂的运用15-16

1.2.2 酪氨酸酶抑制剂的来源16-18

1.2.3 酪氨酸酶抑制剂的分类18-20

1.3 曲酸衍生物的运用前景20-21

1.4 本课题探讨作用及内容21-23

1.4.1 探讨作用21-22

1.4.2 探讨内容22-23

第2章 新型的曲酸衍生物合成23-33

2.1 材料与仪器23-24

2.

1.1 仪器装置23

2.

1.2 主要原料和试剂23-24

2.2 实验办法24-26

2.1 合成路线24-25

2.2 合成办法25-26

2.3 结果与分析26-31

2.3.1 化合物3的合成26-27

2.3.2 化合物3的结构表征27-29

2.3.3 化合物7的合成29

2.3.4 化合物6的结构表征29-31

2.3.5 化合物7的结构表征31

2.4 本章小结31-33

第3章 曲酸衍生物对酪氨酸酶抑制活性的探讨33-44

3.1 材料与仪器33

3.

1.1 仪器装置33

3.

1.2 主要原料和试剂33

3.2 实验办法33-35
3.

2.1 抑制剂对蘑菇酪氨酸酶活性的测定33-34

3.2论文导读：验结果53-544.4本章小结54-55第5章曲酸衍生物在南美白对虾储藏中的运用探讨55-645.1实验材料与设备55-565.1.1实验材料555.1.2实验设备55-565.1.3实验试剂565.2实验办法56-585.2.1试剂配制565.2.2南美白对虾的预处理56-575.2.3鲜度测定办法57-585.3结果与分析58-635.3.1储藏历程中感观分析58-595.3.2储藏历程中
.2 抑制剂对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活性的测定34-35

3.3 结果与分析35-42

3.1 曲酸衍生物对蘑菇酪氨酸酶单酚酶的影响35-37

3.2 化合物7d对酪氨酸酶二酚酶活性的影响37-40

3.3 化合物7e对酪氨酸酶二酚酶活性的影响40-42

3.4 本章小结42-44

第4章 曲酸衍生物的抑菌活性与毒性评价44-55

4.1 材料与仪器44-46

4.

1.1 实验主要仪器44

4.

1.2 实验试剂44-45

4.

1.3 供试菌种45

4.

1.4 培养基45-46

4.2 实验办法46-49
4.

2.1 菌悬液的制备46

4.

2.2 样品溶液的配制46-47

4.

2.3 抑菌测试办法(琼脂扩散管碟法)47

4.

2.4 最低杀菌浓度(MBC)的测定47-48

4.

2.5 细胞毒性试验48-49

4.3 结果与分析49-54
4.

3.1 抑菌圈直径的测定49-50

4.

3.2 抑菌活性的对比50-52

4.

3.3 最低杀菌浓度(MBC)的对比52-53

4.

3.4 Hela细胞、A549细胞、MCF-7细胞毒性试验结果53-54

4.4 本章小结54-55
第5章 曲酸衍生物在南美白对虾储藏中的运用探讨55-64

5.1 实验材料与设备55-56

5.

1.1 实验材料55

5.

1.2 实验设备55-56

5.

1.3 实验试剂56

5.2 实验办法56-58
5.

2.1 试剂配制56

5.

2.2 南美白对虾的预处理56-57

5.

2.3 鲜度测定办法57-58

5.3 结果与分析58-63
5.

3.1 储藏历程中感观分析58-59

5.

3.2 储藏历程中TVB-N的变化59-60

5.

3.3 储藏历程中pH的变化60-61

5.

3.4 储藏历程中细菌总数的变化61-63

5.4 本章小结63-64
第6章 结论与展望64-66

6.1 结论64

6.2 创新点64-65

6.3 展望65-66

参考文献66-72
附录

一、化合物核磁图谱72-78

附录

二、探讨生期间发表的论文78-79

致谢79-80