试议免疫调节蛇莓体外抗菌及体内调节免疫作用

论文导读：
摘要：蛇莓Duchesnea India (Andr.) Focke系蔷薇科蛇莓属多年生草本植物,在全国各地均有分布。具有抗肿瘤、抑菌、抗病毒、免疫调节、中枢系统抑制等药理作用。近年来,国内外对蛇莓的探讨主要集中在抗肿瘤这一领域,对蛇莓抑菌作用、抑菌活性成分及其抑菌机理的探讨较少,且缺乏探讨深度和系统性。为了开发新型中药抑菌剂和充分利用蛇莓资源,本探讨筛选其最优提取工艺,进行了蛇莓水提物体外抗菌及体内调节免疫作用的探讨。主要探讨结果如下：1.蛇莓体外抗菌活性的探讨：选择水和乙醇为提取溶剂,比较水提法、回流法、索氏提取法、超声法的提取效果,再进行水提工艺条件的优化。采取抑菌效应法,综合评分比较浅析蛇莓各提取物的抑菌活性和得率,筛选最优提取工艺,进行蛇莓体外抑菌试验。结果表明：综合评分,水提法索氏提取法回流法超声法。蛇莓水提法最优提取工艺为：提取时间58min,提取次数3,料液比1：36。钢管法检测结果显示,蛇莓水提物对金葡萄球菌ATCC25923等5种标准菌株具有中度至高度的体外抗菌活性。二倍稀释法测定蛇莓水提物的MIC及MBC：对金葡萄球菌ATCC25923、大肠杆菌ATCC25922、沙门氏菌C79-13、藤黄微球菌CMCC28001、铜绿假单胞菌ATCC9027的MIC和MBC值分别为1.56、25、6.25、3.13、25mg/mL和3.13、50、12.5、6.25、50mg/mL。抑菌曲线表明：当蛇莓浓度达到MIC和2MIC时,对金葡萄球菌、沙门氏菌和铜绿假单胞菌的生长体现为杀菌活性；在2MIC的浓度下,大肠杆菌4h内被完全杀灭,对藤黄微球菌只有抑菌作用而没有杀菌效果。2.蛇莓对细菌生物膜的影响：运用刚果红平板法筛选生物膜形成阳性菌株。采取96孔板法造膜,根据菌膜形成能力划分标准筛选出中等或强生物膜形成能力的菌株,检测蛇莓水提物对细菌生物膜形成的影响。结果表明：蛇莓水提物3.13mg/mL对标准金葡萄球菌生物膜形成的抑制与红霉素8μg/mL一致(P0.05)；蛇莓水提物1.56mg/mL对10株金葡萄球菌临床菌株生物膜形成的抑制与红霉素8μg/mL一致(P0.05)；蛇莓水提物50mg/mL对8株大肠杆菌临床菌株生物膜形成的抑制能力与环丙沙星2μg/mL一致(P0.05)。蛇莓对细菌生物膜形成的抑制效果呈浓度依赖性。3.蛇莓对细菌显微结论文导读：。结果表明,蛇莓能较显著地提升正常小鼠的脾脏指数、血清中IgG的含量,增强其巨噬细胞的功能；蛇莓能较显著地提升免疫力低下小鼠外周血中T淋巴细胞的数量,升高其血清中IgM的含量。以上说明,蛇莓水提物在试验的剂量下,对正常小鼠和免疫力低下小鼠的部分免疫功能有影响。关键词：蛇莓论文抗菌活性论文生物
构及超微结构的影响：以金葡萄球菌和大肠杆菌为指示菌,探讨了蛇莓体外抑菌作用的机制。结果表明,蛇莓使金葡萄球菌质壁严重分离；细胞质不均匀,菌体出现空泡；有些细胞质溶解甚至出现大面积空腔；使大肠杆菌细胞壁呈皱褶状,出现显著的质壁分离,细胞质稀薄甚至解体,形成小空泡,严重者形成大面积空腔。由此推断,蛇莓对金葡萄球菌的抑制机理符合膜打孔假说,对大肠杆菌的抑制机理主要是破坏细胞壁和细胞质。4.蛇莓对小鼠部分免疫功能的作用：通过环磷酰胺造模,探讨蛇莓水提物对正常小鼠和免疫力低下小鼠机体的免疫调节作用。结果表明,蛇莓能较显著地提升正常小鼠的脾脏指数、血清中IgG的含量,增强其巨噬细胞的功能；蛇莓能较显著地提升免疫力低下小鼠外周血中T淋巴细胞的数量,升高其血清中IgM的含量。以上说明,蛇莓水提物在试验的剂量下,对正常小鼠和免疫力低下小鼠的部分免疫功能有影响。关键词：蛇莓论文抗菌活性论文生物膜论文超微结构论文免疫调节论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。摘要4-6
ABSTRACT6-13
第一部分 文献综述及选题背景13-25
1 蛇莓的探讨进展13-18

1.1 蛇莓的概况13-14

1.2 蛇莓的临床运用14-16

1.2.1 癌症14

1.2.2 带状疱疹14-15

1.2.3 腹泻、痢疾、白喉15

1.2.4 各类炎症15-16

1.2.5 其他16

1.3 蛇莓的药理探讨16-18

1.3.1 抗肿瘤作用16-17

1.3.2 抗菌作用17

1.3.3 免疫调节作用17

1.3.4 其他作用17-18

1.4 蛇莓的化学成分探讨18

2 中药的抗菌作用探讨进展18-21

2.1 中药对细菌的抑制作用18-19

2.2 中药对细菌生物膜的作用19-20

2.3 中药对细菌的抑菌作用机制20-21

3 抗菌中药调节机体免疫功能的探讨进展21-24

3.1 抗菌中药对免疫器官的作用22

3.2 抗菌中药对免疫细胞的作用22-23

3.3 抗菌中药对免疫活性介质的作用23-24

4 立题依据和作用24-25
第二部分 试验探讨25-69
第一章 蛇莓粗提物体外抗菌活性的探讨25-42
1 材料25-26

1.1 药材25

1.2 培养基及试剂25论文导读：

1.3 主要试验仪器25-26

1.4 供试菌株26

2 策略26-30

2.1 菌悬液的制备26

2.2 蛇莓抗菌活性成分的提取及检测26-27

2.1 蛇莓粗提取物的制备26-27

2.2 考察指标27

2.3 水提法的工艺条件优化27-28

2.4 蛇莓水提物对5种标准菌体外抑菌活性测定28-29

2.4.1 供试药液的制备28-29

2.4.2 钢管扩散法测定蛇莓水提物对5种标准菌的体外抑菌活性29

2.4.3 二倍稀释法测定蛇莓水提物对5种标准菌的最低抑菌浓度(MIC值)和最低杀菌浓度(MBC值)29

2.4.4 蛇莓水提物对5种标准菌株的抑菌曲线29

2.5 钢管扩散法测定蛇莓水提物对3种临床分离菌的体外抑菌活性29-30

3 结果30-38

3.1 不同提取策略的比较30

3.2 水提法的工艺条件优化结果30-31

3.

2.1 水提法均匀设计试验及综合评分结果30-31

3.

2.2 最优工艺的验证31

3.3 蛇莓水提物对5种标准菌株的体外抑菌作用31-36

3.1 钢管法测定结果31-32

3.2 蛇莓水提物对5种标准菌株的MIC值和MBC值32-33

3.3 蛇莓水提物对5种标准菌株的抑菌曲线33-36

3.4 蛇莓水提物对3种临床分离菌体外抑菌活性36-38

3.4.1 蛇莓水提物对金葡萄球菌临床菌株的抑菌活性36-37

3.4.2 蛇莓水提物对大肠杆菌临床菌株的抑菌活性37

3.4.3 蛇莓水提物对沙门氏菌临床菌株的抑菌活性37-38

4 讨论38-42

4.1 蛇莓体外抗菌活性成分提取策略38-39

4.2 水提法的工艺条件优化39

4.3 蛇莓水提物的抑菌效果39

4.4 蛇莓水提物的MIC值和MBC值39-40

4.5 蛇莓水提物对5种标准菌株生长曲线的影响40-41

4.6 蛇莓抑菌试验策略的选择41-42

第二章 蛇莓水提物对细菌生物膜的影响42-49
1 材料42

1.1 药材42

1.2 培养基及试剂42

1.3 主要试验仪器42

1.4 供试菌株42

2 策略42-44

2.1 供试药液的制备42-43

2.2 刚果红平板法筛选试验菌株43

2.1 刚果红平板的制备43

2.2 刚果红平板法定性生物膜形成菌株43

2.3 细菌生物膜形成量测定策略43

2.4 蛇莓水提物对细菌生物膜的影响43-44

3 结果44-47

3.1 刚果红平板法筛选结果44-45

3.2 细菌生物膜形成能力的筛选结果论文导读：鸡红细胞试验602.9数据处理60-613结果61-663.1不同剂量环磷酰胺诱发小鼠免疫力低下的结果613.2蛇莓水提物对正常小鼠部分免疫功能的影响结果61-643.2.1蛇莓水提物对正常小鼠免疫器官重量的影响61-622.2.2蛇莓水提物对正常小鼠外周血T淋巴细胞阳性率上一页12345下一页
45-46

3.3 蛇莓水提物对细菌生物膜形成的影响46-47

3.1 蛇莓水提物对金葡萄球菌BF形成的影响46

3.2 蛇莓水提物对大肠杆菌BF形成的影响46-47

4 讨论47-49

4.1 蛇莓对细菌生物膜形成的影响47-49

第三章 蛇莓水提物对细菌显微结构及超微结构的影响49-58
1 材料49-50

1.1 药材49

1.2 培养基及试剂49

1.3 主要试验仪器49

1.4 供试菌株49-50

2 策略50

2.1 供试药液的制备50

2.2 菌悬液的制备50

2.3 蛇莓在亚抑菌浓度下对金葡萄球菌和大肠杆菌显微结构的影响50

2.4 蛇莓在亚抑菌浓度下对金葡萄球菌和大肠杆菌超微结构的影响50

3 结果50-56

3.1 蛇莓水提物在亚抑菌浓度下对金葡萄球菌和大肠杆菌显微结构的影响50-53

3.

1.1 蛇莓水提物在亚抑菌浓度下对金葡萄球菌显微结构的影响51-52

3.

1.2 蛇莓水提物在在亚抑菌浓度下浓度下对大肠杆菌显微结构的影响52-53

3.2 蛇莓水提物在亚抑菌浓度下浓度下对金葡萄球菌和大肠杆菌超微结构的影响53-56
3.

2.1 蛇莓水提物在亚抑菌浓度下浓度下对金葡萄球菌超微结构的影响53-54

3.

2.2 蛇莓水提物在亚抑菌浓度下浓度下对大肠杆菌超微结构的影响54-56

4 讨论56-58

4.1 蛇莓的体外抑菌机制56-58

第四章 蛇莓水提物对小鼠部分免疫功能的调节作用58-69
1 材料58-59

1.1 药材58

1.2 主要试剂及药品58

1.3 主要试验仪器58

1.4 供试动物58-59

2 策略59-61

2.1 供试药物的制备59

2.2 不同剂量的环磷酰胺建立小鼠免疫力低下模型59

2.3 蛇莓水提物对正常小鼠和免疫力低下小鼠部分免疫功能的影响59

2.5 小鼠免疫器官重量的测定59

2.6 α-醋酸萘酯染色法测定外周血T淋巴细胞59-60

2.7 血清抗体IgG、IgM及IgA含量测定60

2.8 小鼠巨噬细胞功能的测定60

2.8.1 鸡红细胞悬液制备60

2.8.2 巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验60

2.9 数据处理60-61

3 结果61-66

3.1 不同剂量环磷酰胺诱发小鼠免疫力低下的结果61

3.2 蛇莓水提物对正常小鼠部分免疫功能的影响结果61-64

3.

2.1 蛇莓水提物对正常小鼠免疫器官重量的影响61-62

2.2.2 蛇莓水提物对正常小鼠外周血T淋巴细胞阳性率论文导读：的影响结果64-663.3.1蛇莓水提物对免疫力低下小鼠免疫器官重量的影响643.3.2蛇莓水提物对免疫力低下小鼠外周血T淋巴细胞阳性率的影响64-653.3.3蛇莓水提物对免疫力低下血清抗体IgG、IgM及IgA的影响65-663.3.4蛇莓水提物对免疫力低下小鼠巨噬细胞吞噬功能的的影响664讨论66-69

4.1不同剂量环磷酰胺对小鼠免疫功能的影响

的影响62-63
3.

2.3 蛇莓水提物对正常小鼠血清抗体IgG、IgM及IgA含量测定结果63

3.

2.4 蛇莓水提物对正常小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响63-64

3.3 蛇莓水提物对免疫力低下小鼠部分免疫功能的影响结果64-66

3.1 蛇莓水提物对免疫力低下小鼠免疫器官重量的影响64

3.2 蛇莓水提物对免疫力低下小鼠外周血T淋巴细胞阳性率的影响64-65

3.3 蛇莓水提物对免疫力低下血清抗体IgG、IgM及IgA的影响65-66

3.4 蛇莓水提物对免疫力低下小鼠巨噬细胞吞噬功能的的影响66

4 讨论66-69

4.1 不同剂量环磷酰胺对小鼠免疫功能的影响66-67

4.2 左旋咪唑对小鼠免疫功能的影响67

4.3 蛇莓对正常小鼠部分免疫功能的影响67-68

4.4 蛇莓对免疫力低下小鼠部分免疫功能的影响68-69

第三部分 结论与革新69-70
1 结论69
2 革新69-70
参考文献70-75
致谢75