探讨支气管哮喘抗支口服液对哮喘大鼠模型作用机制实验

论文导读：4-19

二、哮喘之辨证施治19-281内治法19-212哮喘12下一页

摘要：目的：从建立支气管哮喘大鼠模型为基础,给予抗支口服液治疗,通过动物实验,以免疫组织化学、病理学和分子生物学等多方面研究中药抗支口服液治疗哮喘大鼠模型意义机制,为临床运用抗支口服液治疗小儿支气管钳哮喘提供实验依据。办法：1、实验动物模型的建立及动物分组将70只wistar未成年大鼠,体重120～150g,适应性饲养3天。参照有关文献,将大鼠于实验第1天和第8天,腹腔内注射卵蛋白0.1mg和氢氧化铝凝胶1mg,以而使实验大鼠致敏。于实验的第15天起用3%卵蛋白对实验大鼠从5ml/分钟的雾化流速进行哮喘雾化激发,6分钟／次,两天一次,持续4周。从大鼠出现躁动、喷嚏、咳嗽、呼吸急促、流泪及站立不稳等体现为激发成功。将造模成功的50只大鼠随机分为模型组、地塞米松组、抗支口服液高、中、低剂量组。另取10只为空白组,空白对照组则用生理盐水代替卵蛋白对其进行腹腔注射及雾化激发。2、实验动物的灌胃给药及取材以第1次哮喘激发开始(于实验第15天)至处死前各治疗组每天于雾化前0.5h灌胃给药,高剂量组20g/kg/d.中剂量组10g/kg/d.低剂量组5g/kg/d,西药(地塞米松)组,给予0.5mg/kg/d地塞米松灌胃,持续给药4周,正常组用生理盐水灌胃。造模之前对实验动物进行体重测量,此后每4天对大鼠进行体重测量,于取材之前对大鼠进行最后一次体重测量。末次给药2小时后,对实验动物进行麻醉后取材。取各组大鼠肺组织、肺泡灌洗液(BALF)极为血清从备用。光镜下观察肺组织炎性病理转变,显微镜下观察肺泡灌洗液涂片细胞数及嗜酸性粒细胞和淋巴细胞含量,从酶联免疫吸附(ELISA)法测定肺组织中的LTB4、LT含量及血清内ECP的含量,从逆转录聚合酶联反应(reverse transcriptase, RT-PCR)测定哮喘大鼠肺组织IL-5mRNA表达,从放射免疫法测定血清中IgE含量。结果：1、肺组织病理学转变。光镜下见模型组大鼠肺组织有大量炎性细胞浸润,气道粘膜水肿伴有脱落的上皮细胞,上皮下纤维化,平滑肌增厚。中药高、中剂量组大鼠肺组织与模型组相比,从上转变显著减轻2、各指标转变实验结果显示抗支口服液能显著降低哮喘大鼠肺组织中炎症的主要调节因子IL-5mRNA的表达,以而减少气道内炎区的EOS的增殖、分化、聚集和活化,以而制约气道炎症；能降低哮喘大鼠血清免疫球蛋白E(IgE)的产生增多,减少肥大细胞的分化,并减慢嗜酸性粒细胞的生长、趋化和激活,以而减轻哮喘气道炎症；能降低哮喘大鼠血清中诱导气道炎症、介导气道上皮细胞损伤脱落的强碱性颗粒蛋白ECP含量；能降低肺组织中炎性介质LTB4、LT含量；降低哮喘大鼠肺泡灌洗液(BALF)涂片细胞数及嗜酸性粒细胞和淋巴细胞含量。结论：1、抗支口服液各剂量组能改进哮喘大鼠一般症状,减少哮喘大鼠肺组织炎性浸润,减少粘膜下水肿及分泌物的产生,以而减轻气道狭窄及气道高反应性,尤其是抗支口服液高、中剂量组。2、抗支口服液高、中剂量组均能降低哮喘大鼠肺组织内嗜酸性粒细胞、淋巴细胞含量,说明抗支口服液可通过降低肺组织内嗜酸性粒细胞、淋巴细胞含量,以而制约气道炎症。3、抗支口服液可显著降低哮喘大鼠肺组织IL-5mRNA的表达,减少炎性细胞浸润,以而减轻气道炎症,缓解哮喘气道痉挛状态。4、抗支口服液高、中剂量组显著降低了哮喘大鼠外周血内ECP含量以而抑制EOS的活化,保护呼吸道上皮,减轻AHR,抑制变态反应,最终达到抗炎的效果。5、抗支口服液可显著降低哮喘大鼠外周血内IgE含量,减轻哮喘的Ⅰ型变态反应的发生,以而达到制约哮喘发作的目的。6、抗支口服液高、中剂量组可显著降低哮喘大鼠肺组织内的LTB4、LT含量,以而减轻气道炎症及减缓支气管平滑肌收缩来缓解哮喘症状。关键词：抗支口服液论文支气管哮喘论文哮喘大鼠论文
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中文摘要6-8
ABSTRACT8-12
引言12-14
文献综述14-37
第一章 祖国医学对哮喘的认识及治疗概况14-28

一、哮喘之认识14-19

二、哮喘之辨证施治19-28

1 内治法19-21
2 哮喘论文导读：-38二、实验办法38-40(一)动物处理38-39(二)肺组织病理学检查39-40三、实验结果及分析40-42(一)抗支口服液对支气管哮喘大鼠一般状态的影响40-41(二)肺组织形态学病理转变41(三)结果分析41-42四、讨论42-46第二章抗支口服液对哮喘大鼠肺泡灌洗液中炎性细胞的影响46-50

一、材料与办法46-47(一)实验材料46-47(二)实验办

缓解期的辨证施治21-22
3 哮喘的其方它治法22-25
4 支气管哮喘常用方剂现代探讨25-28
第二章 现代医学对支气管哮喘的探讨28-37

一、哮喘的流行病学28-29

二、病因学29-31

1 遗传因素29
2 吸入变应原29-30
3 空气污染30
4 病毒感染30
5 食物性变应原30
6 药物因素30-31

三、哮喘的发病机制31-34

(一) 气道炎症学说31-33

(二) 神经-受体失衡学说33-34

(三) 免疫与变态反应学说34

(四) 其它学说34

四、哮喘的防治34-37

1 哮喘的治疗34-36
2 哮喘慢性维持期的治疗36
3 哮喘患者的教育36-37
实验探讨37-65
第一章 抗支口服液对哮喘大鼠一般状态及肺组织病理学变化的影响37-46

一、实验材料37-38

(一) 实验动物37

(二) 药物37

(三) 主要试剂37

(四) 主要仪器37

(五) 主要溶液的配置37-38

二、实验办法38-40

(一) 动物处理38-39

(二) 肺组织病理学检查39-40

三、实验结果及分析40-42

(一) 抗支口服液对支气管哮喘大鼠一般状态的影响40-41

(二) 肺组织形态学病理转变41

(三) 结果分析41-42

四、讨论42-46

第二章 抗支口服液对哮喘大鼠肺泡灌洗液中炎性细胞的影响46-50

一、材料与办法46-47

(一) 实验材料46-47

(二) 实验办法47

二、实验结果47-48

三、讨论48-50

第三章 抗支口服液对哮喘大鼠肺组织内IL-5MRNA表达的影响50-56

一、材料与办法50-53

(一) 材料50-51

(二) 实验办法51-53

二、结果53-54

三、讨论54-56

第四章 抗支口服液对哮喘大鼠血清中ECP、IGE水平的影响56-61

一、材料与办法56-59

(一) 材料56-57

(二) 实验办法57-59

二、实验结果59

三、讨论59-61

第五章 抗支口服液对哮喘大鼠肺组织内LTB_

4、LTC_4的影响61-65

一、材料与办法61-63

(一) 材料61-62

(二) 实验办法62-63

二、实验结果63

三、讨论63-65

结论65-66
致谢66-67
参考文献67-74
附录74-76
附件76-83