简谈微管吴茱萸碱对SPC-A1细胞微管蛋白表达影响及机制

论文导读：
摘要：吴茱萸为芸香科植物吴茱萸的近成熟果实。吴茱萸碱(Evodiamine)是吴茱萸的主要活性成分之一，现代药理探讨证明，吴茱萸碱具有抗肿瘤、护心降压、调节体温、减肥、调节内分泌、调节免疫、抗炎等多种药理学活性。我们已经通过大量的探讨证明，吴茱萸碱不论是在动物体内还是在细胞体外，都具有显著的抗肿瘤意义。它可从启动caspase-3，8依赖的途径诱导人肺腺癌细胞(SPC-A1)凋亡发生而实现抑制肿瘤细胞分裂增殖进而杀死肿瘤细胞的全历程。本实验通过探讨吴茱萸碱对SPC-A1细胞微管蛋白表达的影响来探讨其抗肿瘤意义机制。采取免疫荧光化学染色法，通过激光共聚焦显微镜观察吴茱萸碱意义于SPC-A1细胞后对α-tubupn的影响极为形态学变化。采取MTT法检测吴茱萸碱和MG132分别对细胞增殖的影响，从及二者共同意义对细胞增殖的影响。使用Western blot法检测吴茱萸碱对α-，β-，γ-tubupn表达的变化，从及吴茱萸碱与MG132共同意义后α-，β-，γ-tubupn表达的变化。采取流式细胞术检测吴茱萸碱对SPC-A1细胞周期的影响，及MG132对吴茱萸碱诱导的细胞周期变化的影响。分别将0，0.25，0.5，0.75，1μg/ml的吴茱萸碱意义于SPC-A1细胞4h，0.5μg/ml吴茱萸碱意义于细胞8h后，在激光共聚焦显微镜下可看到α-tubupn结构被破坏，并且随着药物浓度和意义时间的增多，微管结构破坏的严重性也增多，呈现时间和剂量的依赖性。吴茱萸碱能够抑制SPC-A1细胞的增殖，而与MG132共同意义后，其抑制意义显著减弱，对细胞的杀伤意义明显减小。吴茱萸碱能够抑制α-tubupn的表达，呈时间和剂量依赖性，而对β-，γ-tubupn的表达没有影响。与MG132共同意义于细胞，α-tubupn的表达可恢复到正常水平，β-，γ-tubupn的表达仍没有变化。吴茱萸碱能够诱导SPC-A1细胞周期阻滞在G2/M期，有显著的剂量和时间的依赖性。而MG132单独意义，也可引起SPC-A1细胞周期阻滞于G2/M期，二者共同意义后，吴茱萸碱引起的细胞阻滞意义减弱，即MG132能够在一定程度上逆转由吴茱萸碱引起的SPC-A1细胞细胞周期阻滞。吴茱萸碱可通过抑制SPC-A1细胞α-tubupn蛋白表达，破坏微管结构，诱导SPC-A1细胞周期阻滞于G2/M期，抑制细胞有丝分裂，进而论文导读：
抑制细胞增殖。蛋白酶体抑制剂MG132可逆转吴茱萸碱引起的SPC-A1细胞生长抑制，抑制吴茱萸碱引起的α-tubupn蛋白表达下降，并在一定程度上减弱吴茱萸碱引起的G2/M周期阻滞，提示我们吴茱萸碱是通过调控α微管蛋白的表达和微管形成，引起细胞骨架破坏，导致细胞周期阻滞于G2/M期最终抑制细胞增殖。关键词：吴茱萸碱论文细胞周期论文微管蛋白论文肺腺癌论文
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Abstract6-11
引言11-12
第一篇 文献综述12-27
第1章 吴茱萸碱药理学探讨发展12-19

1.1 吴茱萸介绍12-13

1.2 吴茱萸碱药理学探讨发展13-19

第2章 意义于微管的抗肿瘤药物探讨发展19-27

2.1 微管的结构和功能20-22

2.2 意义于微管的药物22-24

2.3 展望24-27

第二篇 探讨内容27-53
第一章 吴茱萸碱对 SPC-A1 细胞周期及微管的影响27-41
1 材料27-29
2 办法29-33
3 结果33-39
4 讨论39
5 小结39-41
第二章 吴茱萸碱影响微管蛋白表达的机制探讨41-53
1 材料41-42
2 办法42-44
3 结果44-50
4 讨论50-52
5 小结52-53
结论53-54
参考文献54-62
导师介绍62-63
作者介绍63-65
致谢65