简述细胞核吡格列酮对高脂血症大鼠主动脉LOX-1-NF-κB和凋亡蛋白表达影响流程

论文导读：略在牛主动脉内皮细胞上发现和鉴定的一种Ⅱ型单链跨膜蛋白。它主要表达于内皮细胞和血管丰富的器官组织中,相关AS病理因素可刺激LOX-1表达增加,能特异性结合、吞噬和降解ox-LDL,激活细胞核转录因子(nuclearfactor-kappaB,NF-κB)以细胞质进入细胞核,与靶基因的启动子或增强子结合,诱导相关基因的表达,介导内皮细胞活化、损
摘要：背景：动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)是一种慢性炎症性疾病,是众多心脑血管疾病共同的病理基础,以内膜下脂质沉积、平滑肌细胞和胶原纤维增殖、泡沫细胞形成为主要特点的广泛性动脉病变。血管内皮细胞位于血流与血管平滑肌之间,是紧贴血管壁的单层细胞,在血管稳态平衡中有重要作用。AS与内皮细胞之间联系密切,内皮细胞损伤是AS形成的早期始动环节,体内探讨证实推动内皮细胞损伤和AS病变形成的多种传统危险因素可诱导内皮细胞凋亡,内皮细胞凋亡可能是AS病理发生的早期事件,并可推动粥样硬化病变形成、斑块侵蚀和急性冠状动脉综合症进展。内皮细胞作为AS发病机制中重要的细胞之一,深入探讨内皮细胞凋亡与AS病理历程的联系及其具体分子机制,将有助于理解和改善AS病理转变的发病机制,并且将细胞凋亡作为治疗靶点,干预调控凋亡信号途径,可为研发新药物和基因治疗提供论述基础和新的思路。高脂血症是影响AS病理转变发生进展的常见传统危险因素之一,氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density ppoprotein, ox-LDL)是血脂异常的主要致病因子,而凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(lectin-pke oxidized low-density ppoprotein receptor-1, LOX-1)是内皮细胞上ox-LDL的主要受体,是日本学者Swamura等于1997年首先利用分子克隆文库的策略在牛主动脉内皮细胞上发现和鉴定的一种Ⅱ型单链跨膜蛋白。它主要表达于内皮细胞和血管丰富的器官组织中,相关AS病理因素可刺激LOX-1表达增加,能特异性结合、吞噬和降解ox-LDL,激活细胞核转录因子(nuclear factor-kappaB, NF-κB)以细胞质进入细胞核,与靶基因的启动子或增强子结合,诱导相关基因的表达,介导内皮细胞活化、损伤和细胞凋亡,平滑肌细胞和巨噬细胞内脂质聚集,活化血小板推动血栓形成,并增加斑块不稳定性,以而诱发AS的发生进展。探讨显示人类和家兔粥样硬化病变组织中LOX-1表达增加,并且早期病理转变区域表达多于晚期病变。AS早期病变阶段LOX-1主要表达于内皮细胞,尤其是易于发生病变区域的内皮细胞,在AS进展期中LOX-1也有着于巨噬细胞、平滑肌细胞和新生微血管中,过度表达LOX-1诱导粥样硬化病变形成,而减少其表达则可阻碍斑块形成和进展[4]。LOX-1可作为干扰内皮细胞功能障碍和AS的分子靶点,为相关疾病的诊断和治疗提供了新的思路[5]。吡格列酮是人工合成型过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome propferator-activated receptor gamma, PPARγ)的高亲和性配体激活剂,属于噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂,因可以改善代谢和胰岛素抵抗而广泛用于2型糖尿病患者治疗。目前关于吡格列酮抗AS作用的探讨越来越受到国内外学者的重视,它可以改善糖脂代谢、保护血管内皮功能、降低炎性指标、抑制平滑肌细胞增殖、抗血栓形成、稳定斑块等,以而改善AS病理历程[6,7]。但LOX-1-NF-κB信号途径在吡格列酮抗AS病理历程和血管保护作用中尚不清楚。本探讨利用高脂饮食诱导高脂血症AS模型大鼠,以LOX-1为干预靶点,探讨吡格列酮对高脂血症大鼠主动脉LOX-1-NF-κB信号途径的影响,以及对内皮细胞相关凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达的调节,进一步探讨吡格列酮保护血管机制,为其抗AS作用提供论述依据,也为改善AS形成机制和研发新的治疗药物提供论述基础和思路。目的：观察吡格列酮对高脂血症大鼠主动脉LOX-1-NF-κB和凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达的影响,并探讨LOX-1-NF-κB信号途径在其中的潜在作用,为吡格列酮的抗AS和血管保护作用探讨进一步提供论述基础。策略：27只SD雄性大鼠随机分为对照组(n=9)和高脂饮食组(n=18),分别给予普通饲料和高脂饲料喂养,12周后再将高脂饮食组随机分为模型组和吡格列酮组,对照组和模型组予蒸馏水灌胃,吡格列酮组予吡格列酮10mg/(kg·d)连续灌胃,1次/d,均干预4周。喂养16周后,检测各组血脂和血糖水平,主动脉苏木素—伊红(HE)染色进行光学显微镜观察早期AS病理转变,电镜观察主动脉内皮细胞超微结构。免疫组织化学法检测主动脉LOX-

1、论文导读：

NF-κB p65、Bcl-2、Bax蛋白表达水平,末端脱氧核苷酰基转移酶介导性dUTP切口末端标记(terminal deoxynucleotidyl acyltranerase-mediated dUTP nick end labepng, TUNEL)染色观察主动脉内皮细胞凋亡情况,光镜下进行细胞计数,计算细胞凋亡指数(apoptosis index, AI)。统计学浅析：数据采取SPSS13.0统计软件浅析,定量资料以均数·标准差(x±s)表示。两组比较用两独立样本t检验,并检测方差齐性、正态性,若方差齐采取t检验,方差不齐采取Satterthwaite校正t检验,药物干预前后比较采取配对t检验。多组均数间比较采取单因素方差浅析,总的差别有统计学作用时进行多重比较,若方差齐性采取LSD检验,方差不齐时采取Dunnett T3检验,P≤0.05为差别有统计学作用。结果：1.12周后和16周后各组大鼠血脂、血糖水平与对照组相比,12周后高脂饮食组TG、TC、LDL-C显著升高(P0.01)。经4周药物干预,16周后各组大鼠比较TC、TG有显著差别(P0.01)；与对照组相比,模型组TC、TG显著升高(P0.01),吡格列酮组TC、TG转变无显著差别(P0.05)。与模型组相比,吡格列酮组TC、TG显著降低(P0.01),且干预后,吡格列酮组TG、TC、HDL-C和LDL-C较前显著降低(P0.05)。12及16周时各组大鼠间血糖比较无显著差别(P0.05)。2.各组大鼠主动脉组织形态学变化2.1主动脉组织HE染色光镜观察AS病理转变对照组血管壁结构清晰、内膜完整而光滑,内皮细胞完整无脱落,中膜平滑肌细胞走行清晰、无增殖；模型组血管壁增厚,内皮细胞大部分缺失,中膜平滑肌细胞增殖显著、排列紊乱；吡格列酮组血管内膜光滑连续,内皮细胞偶有脱落,中膜平滑肌细胞增殖不显著,厚度均匀,排列规则。2.2电镜观察主动脉内皮细胞超微结构对照组主动脉内皮细胞界限清楚,细胞膜表面结构清晰,胞核结构正常,胞浆内线粒体正常,内弹力膜厚薄均匀、连续。模型组大鼠内皮细胞结构显著异常,细胞膜破裂,胞核染色质疏松、核膜不完整,胞质内细胞器溶解或消失、疏松变性；内皮下胶原纤维增加,纤维母细胞增生；内弹力膜厚薄不均、中断,并有灶性溶解。吡格列酮组主动脉内皮层细胞少量缺损,胞核胞浆正常,偶见线粒体水肿。3.各组大鼠主动脉LOX-1、NF-κB p65蛋白的表达400倍光镜下观察主动脉血管壁,LOX-1主要表达于细胞浆,NF-κB p65主要表达于细胞核,阳性细胞被染成棕或褐色。与对照组相比,模型组大鼠主动脉内皮和新生内膜区域LOX-1、NF-κB p65蛋白阳性细胞显著增加,平均光密度显著升高(P0.01),与模型组相比,吡格列酮组LOX-1、NF-κB p65蛋白阳性细胞较少,其平均光密度值较模型组显著降低(P0.01)。4.各组大鼠主动脉凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达400倍光镜下观察主动脉血管壁,Bax和Bcl-2蛋白主要表达于细胞浆中,阳性细胞被染成棕或褐色。与对照组相比,模型组Bax平均光密度值显著升高(P0.01),Bcl-2平均光密度和Bcl-2/Bax比值均显著降低(P0.01)；与模型组相比,毗格列酮组Bax平均光密度值显著降低(P0.01),且Bcl-2平均光密度值和Bcl-2/Bax比值显著升高(P0.01)。5.各组大鼠主动脉内皮细胞凋亡情况TUNEL细胞凋亡原位检测主动脉,棕色细胞为阳性细胞,与对照组相比,模型组主动脉内膜区域内皮细胞凋亡增加,而吡格列酮组较模型组细胞凋亡减少。光镜下细胞计数,计算细胞凋亡指数,与对照组相比,模型组主动脉内皮AI显著升高(P0.01)；与模型组比较,吡格列酮组主动脉内皮AI显著降低(P0.01)。结论：1.高脂饮食喂养大鼠可成功诱导高脂血症AS动物模型,模型组大鼠主动脉LOX-1、NF-κB p65、Bax蛋白表达增加,而Bcl-2蛋白和Bcl-2/Bax比值降低,主动脉内膜区域内皮细胞凋亡增加,推动其早期AS病理转变；2.吡格列酮可改善高脂饮食诱导的AS模型大鼠血脂水平,减轻其AS病理转变,且该作用独立于降糖效应；3.吡格列酮可降低高脂血症大鼠主动脉LOX-1、NF-κB p56蛋白的表达,减弱LO论文导读：63主要仪器设备63-64综述·LOX-1与动脉粥样硬化联系的探讨进展64-75参考文献71-75附录·英文缩略词表75-76成果·探讨生期间论文发表情况76-77致谢77-78论文统计证明78-79上一页123
X-1-NFκB信号途径诱发的血管病理转变；4.吡格列酮可调节高脂血症大鼠主动脉凋亡蛋白表达,主动脉壁Bax蛋白显著降低,而Bcl-2蛋白及Bcl-2/Bax比值显著升高,减少主动脉内膜区域内皮细胞凋亡,发挥保护血管内皮的作用。关键词：吡格列酮论文高脂血症论文动脉粥样硬化论文细胞凋亡论文凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1论文细胞核因子-κB论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。摘要3-8
ABSTRACT8-17
前言17-21
第一章 高脂饮食诱导高脂血症AS模型大鼠的建立及毗格列酮的调脂作用21-33
1 材料和策略21-25

1.1 实验动物造模及分组21-22

1.2 观察指标和策略22-24

1.3 统计学浅析24-25

2 结果25-29

2.1 12周后各组大鼠血脂、血糖水平25

2.2 16周后各组大鼠血脂、血糖水平25-26

2.3 各组大鼠干预前后血脂水平比较26-27

2.4 各组大鼠主动脉组织形态学观察27-29

3 讨论29-33
第二章 吡格列酮对高脂血症大鼠主动脉LOX-1-NF-κB途径的影响33-44
1 材料和策略33-36

1.1 实验动物造模及分组33-34

1.2 观察指标和策略34-35

1.3 统计学浅析35-36

2 结果36-38

2.1 各组大鼠主动脉LOX-1和NF-κB p65蛋白的表达水平36-38

3 讨论38-44
第三章 吡格列酮对高脂血症大鼠主动脉内皮细胞凋亡的影响44-54
1 材料和策略44-47

1.1 实验动物造模及分组44-45

1.2 观察指标和策略45-47

1.3 统计学浅析47

2 结果47-50
2.1 各组大鼠主动脉凋亡蛋白Bcl-

2、Bax蛋白的表达水平47-49

2.2 各组大鼠主动脉内皮细胞凋亡情况49-50
3 讨论50-54
全文小结54-55
参考文献55-63
主要仪器设备63-64
综述·LOX-1与动脉粥样硬化联系的探讨进展64-75
参考文献71-75
附录·英文缩略词表75-76
成果·探讨生期间论文发表情况76-77
致谢77-78
论文统计证明78-79