探讨阻滞剂HO-1，P47-PHOX氧化酶在动脉粥样硬化并肾动脉狭窄大鼠肾组织中表达及抗高血压药物干预题目

论文导读：sculardysplasia,FMD）是肾动脉狭窄最常见的理由。动脉粥样硬化性肾动脉狭窄（Atheroscleroticrenalarterystenosis,ARAS）比FMD性肾动脉狭窄更能引起肾脏损伤。ARAS可通过多种途径导致肾功能损伤，其中氧化应激是其主要途径之一。已有探讨提示具有一定的肾脏保护作用的血红素加氧酶-1（Hemeoxygenase-1,HO-1）具有抗氧化应激
摘要：目的：动脉粥样硬化和肌纤维发育不良（Fibromuscular dysplasia, FMD）是肾动脉狭窄最常见的理由。动脉粥样硬化性肾动脉狭窄（Atheroscleroticrenal artery stenosis, ARAS）比FMD性肾动脉狭窄更能引起肾脏损伤。ARAS可通过多种途径导致肾功能损伤，其中氧化应激是其主要途径之一。已有探讨提示具有一定的肾脏保护作用的血红素加氧酶-1（Hemeoxygenase-1, HO-1）具有抗氧化应激的作用，而HO-1在动脉粥样硬化性肾动脉狭窄（ARAS）的肾脏损伤与保护中的作用鲜有报道，值得探讨。抗高血压药物具有降低动脉压，减少靶器官损伤的作用，但其在动脉粥样硬化性肾动脉狭窄中的运用尚有着争议，它是否是通过调节HO-1，P47-phox氧化酶干预肾脏中的氧化应激减轻肾损伤，值得我们进一步探讨。为此，我们采取高脂饮食，两肾一夹策略复制大鼠动脉粥样硬化合并肾动脉狭窄模型,通过测定实验大鼠肾组织中HO-1和P47-phox氧化酶的表达情况来探讨不同降压药（直接肾素抑制剂，钙拮抗剂）对肾脏的保护作用及可能的机制，为临床能更有效的治疗肾动脉狭窄所致的肾损伤提供论述依据和对策。策略：（1）大鼠动脉粥样硬化性肾动脉狭窄的动物模型的建立：将36只雄性的SD大鼠随机分为二肾一夹（Two Kidney One Cpp,2K1C）组和对照组，2K1C组采取平行针灸针缩窄法造成肾动脉狭窄，对照组只暴露肾动脉，不做狭窄。各组大鼠均予以注射VitD_350万IU/kg并高脂饲养十周建立AS合并肾动脉狭窄动物模型。（2）直接肾素抑制剂和钙拮抗剂对肾动脉狭窄性大鼠肾脏的保护作用的探讨：饲养十周后，将对照组和满足实验条件的2K1C组大鼠分别随机分组并给与干预措施：生理盐水组，阿利吉仑组及苯磺酸氨氯地平组,干预四周后处理大鼠，分别进行一下实验：1）心脏采血后全自动生化浅析仪检测血甘油三酯，胆固醇，尿素氮及血肌酐。2）游离并切取SD大鼠主动脉及狭窄侧肾脏，一部分石蜡包埋做PAS、HE染色及免疫组化，一部分-70℃冷冻保存。3）免疫组化法检测HO-1和p47-phox(NADPH氧化酶的一种亚型)的表达：取肾脏石蜡切片，采取SP法分别检测HO-1和p47-phox在肾脏中的表达变化。图像采集后用Image-pro-plus6.0软件浅析。4）RT-PCR法检测HO-1和p47-phox的表达：取冷冻保存的肾脏组织经提取总RNA，逆转录，扩增，电泳后，用Quangtity one软件浅析.结果：(1)采取平行针灸针缩窄法联合高脂饮食并注射VitD_350万IU/kg10周可有效建立动脉粥样硬化并肾动脉狭窄动物模型。（2）生化仪检测血脂及肾功能结果：与造模前相比，术后各组大鼠血胆固醇（TC）水平显著升高（P0.05）;与术后生理盐水组相比较，术后阿利吉仑组血TC升高水平有显著差别（P0.05），而术后氨氯地平组则无显著差别（P0.05）;术后阿利吉仑组与氨氯地平组TC升高水平有显著差别（P0.05）。造模前后血肌酐（Scr）升高水平变化的比较，生理盐水组和氨氯地平组均有统计学作用（P0.05），而阿利吉仑组则差别不显著（P0.05）;与术后生理盐水组比较，术后阿利吉仑组Scr升高水平差别显著（P0.05）；而术后阿利吉仑组与氨氯地平组间无显著差别（P0.05）。(3)实验大鼠肾脏组织中的HO-1，P47-phox的蛋白表达变化:1)肾脏组织中HO-1的表达：正常对照组大鼠肾脏肾小管中只见少量HO-1表达，在2K1C组大鼠肾脏的小管及肾小球内均可见大量HO-1的阳性表达，且阿利吉仑组和氨氯地平组中HO-1的阳性表达较生理盐水组显著，而阿利吉仑组较氨氯地平组更显著，其差别均具有统计学作用，P0.05。2）肾脏中P47-phox的表达：正常对照组大鼠肾脏中未见P47-phox的阳性表达。在2K1C组大鼠肾脏的肾小球，肾小管中均可见P47-phox阳性表达。其表达结果与HO-1相反，P47-phox在生理盐水组中表达最多，而在阿利吉仑组中表达最少。其差别有统计学作用，P0.05。(4)实验大鼠肾脏中HO-1，P47-phox的mRNA的表达变化：在正常对照组中，HO-1，P47-phox均无表达。在2K1C实验大鼠中，与生理盐水组比论文导读：考文献38-42英汉缩略词对照表42-43致谢43-44血红素加氧酶-1与肾功能及血压的调节（综述）44-55参考文献51-55上一页12
较，HO-1在阿利吉仑组与氨氯地平组中的条带亮度更加显著，且阿利吉仑组较氨氯地平组的表达更显著。p47-phox在阿利吉仑组与氨氯地平组中的条带亮度则较生理盐水组减弱，与免疫组化结果一致。结论：（1）采取平行针灸针缩窄法联合高脂饲料并注射VitD_3可有效建立动脉粥样硬化并肾动脉狭窄动物模型。（2）在ARAS肾脏中，HO-1可被诱导表达并通过抑制氧化应激保护ARAS的肾功能。（3）阿利吉仑与氨氯地平可能通过诱导ARAS肾脏中HO-1的表达，抑制p47-phox的表达，以而抑制氧化应激减轻肾脏损伤，且阿利吉仑可能优于氨氯地平。关键词：直接肾素抑制剂论文钙通道阻滞剂论文血红素加氧酶-1论文NADPH氧化酶论文ARAS论文
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Abstract7-12
前言12-15
材料与策略15-24
结果24-31
讨论31-37
结论37-38
参考文献38-42
英汉缩略词对照表42-43
致谢43-44
血红素加氧酶-1与肾功能及血压的调节（综述）44-55
参考文献51-55