浅谈蛋白酶鲜鹿茸酶降解过程

论文导读：
摘要：鹿茸是一种名贵的中药材,是指鹿密生茸毛尚未骨化的幼角。鹿茸是一个富有多种天然活性因子的细胞因子库,其中含有多种生物活性成分,具有益精血、强筋骨、壮肾阳等特殊药效,能够增强机体免疫能力、推动机体的新陈代谢和生长发育。由此探讨鹿茸素的提取新工艺具有重要的论述作用和实际运用价值。本论文分别利用Alcalase碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶降解鲜鹿茸提取其有效成分,并通过测定各种酶的酶活、鲜鹿茸降解率、降解液中游离氨基氮及多肽含量等指标确定鲜鹿茸降解的最适蛋白酶。结果表明：Alcalase碱性蛋白酶的酶活力较高,为2×105U/g；降解率最高为92.79%；产生的游离氨基酸态氮的含量相对最高,为0.89mg/mL,多肽含量较高,为53.8%；同时降解液还比较澄清,颜色和流动性都比较好。综合考虑,Alcalase碱性蛋白酶为降解鲜鹿茸的最适蛋白酶。采取Alcalase碱性蛋白酶对鲜鹿茸进行降解,利用单因素实验考察了底物浓度、酶用量、pH值、酶解温度及时间对降解率的影响,筛选出主要因素并利用正交实验确定了Alcalase碱性蛋白酶降解鲜鹿茸的优化工艺条件：酶解时间为6.0h、底物浓度为0.08g/mL、反应温度为65℃、溶液pH为9.0。然后本论文首次探讨了超声波辅助下的鲜鹿茸酶降解工艺历程,考察了液固比、酶用量、超声功率、超声温度以及超声时间对降解率的影响,确定了超声辅助下蛋白酶降解鲜鹿茸的最佳工艺条件：液固比20mL/g,酶用量为1.5%,超声功率150W,超声温度45℃,超声时间为40min,在此条件下鲜鹿茸降解率达89.24%,该策略具有时间短,酶用量少,提取率高等优点。降解产物利用石油醚溶解萃取法得到脂类物质,经GC-MS浅析,鲜鹿茸降解液中含有亚油酸,亚麻酸,硬脂酸等10种脂肪酸,其中亚麻酸含量最高,为41.232%。萃取后的水层物质用超滤法测得多肽分子量主要集中在10000以内,当降解率为90%时,M1000的小分子多肽含量高达49.6%；水溶性物质经732强酸性阳离子交换树脂分离纯化,并对其分离条件进行了探讨,在最优条件下,分离产物经高效液相色谱对氨基酸组成进行了浅析：降解液中含有精氨酸、赖氨酸、亮氨酸等15种氨基酸,其中精氨酸、赖氨酸含量最高,分别为138.20mg/100g、42.45mg/100g。可研制成营养价值较高的营养液,为保健食品增加了花色论文导读：摘要2-3Abstract3-7第一章综述7-191.1本课题的来源及探讨作用7-81.1.1本课题的来源71.1.2课题的探讨作用及探讨内容7-81.2鹿茸概述81.3鹿茸的有效成分8-121.3.1无机盐81.3.2脂质类物质8-91.3.3糖类物质91.3.4蛋白质、氨基酸和多肽类物质9-111.3.5多胺类化合物和核酸、碱基成分111.3.6神经节苷脂11-121.3.7
品种,也为人们身体健康的保障做出巨大贡献。关键词：鲜鹿茸论文Alcalase碱性蛋白酶论文降解率论文工艺条件论文
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Abstract3-7
第一章 综述7-19

1.1 本课题的来源及探讨作用7-8

1.1 本课题的来源7

1.2 课题的探讨作用及探讨内容7-8

1.2 鹿茸概述8

1.3 鹿茸的有效成分8-12

1.3.1 无机盐8

1.3.2 脂质类物质8-9

1.3.3 糖类物质9

1.3.4 蛋白质、氨基酸和多肽类物质9-11

1.3.5 多胺类化合物和核酸、碱基成分11

1.3.6 神经节苷脂11-12

1.3.7 甾体化合物12

1.3.8 维生素和鹿茸中的其他成分12

1.4 鹿茸的功效12-16

1.4.1 鹿茸的药理功效12-15

1.4.2 鹿茸的保健作用15

1.4.3 鹿茸的毒副作用15-16

1.5 鹿茸素提取的探讨近况16

1.6 ALCALASE碱性蛋白酶的性质16-17

1.7 酶降解蛋白质的探讨进展17

1.8 超声波提取的探讨17-18

1.8.1 超声波及超声波提取装置17-18

1.8.2 超声提取法的基本原理18

展望18-19
第二章 实验部分19-29

2.1 实验仪器及药品19-20

2.

1.1 实验仪器19

2.

1.2 实验原料及药品19-20

2.2 实验历程20-26

2.1 酶活力的测定20-21

2.2 鲜鹿茸酶解工艺参数的确定21-23

2.3 超声辅助下鲜鹿茸酶降解23-25

2.4 酶解液理化性质的浅析25

2.5 降解液的后处理工艺25-26

2.3 计算策略与浅析检测26-29

2.3.1 浅析策略26-28

2.3.2 计算策略28-29

第三章 结果与讨论29-44

3.1 蛋白酶活力的测定29-30

3.

1.1 标准曲线的绘制29

3.

1.2 蛋白酶酶活力的测定结果29-30

3.2 鲜鹿茸酶降解工艺参数的确定30-35
3.

2.1 最适蛋白酶种类的确定30-32

3.

2.2 Alcalase碱性蛋白酶降解鲜鹿茸的单因素实验32-34

3.

2.3 Alcalase碱性蛋白酶最佳降解工艺参数的确定34-35

3.3 超声辅助下鲜鹿茸酶降解工艺参论文导读：工艺的比较383.4降解液理化性质的确定38-403.4.1粘度浅析38-393.4.2降解液中分子质量分布的探讨39-403.5降解液的后处理工艺403.5.1上柱条件对氨基酸交换吸附的影响403.5.2洗脱条件对洗脱效果的影响403.6降解产物浅析40-443.6.1降解液中脂肪酸测定40-423.6.2氨基酸红外光谱图423.6.3氨基酸种类和含量的测定结果42-
数的确定35-38

3.1 超声辅助下鲜鹿茸酶降解的单因素试验35-38

3.2 超声辅助下鲜鹿茸酶降解工艺38

3.3 鲜鹿茸酶降解工艺的比较38

3.4 降解液理化性质的确定38-40

3.4.1 粘度浅析38-39

3.4.2 降解液中分子质量分布的探讨39-40

3.5 降解液的后处理工艺40

3.5.1 上柱条件对氨基酸交换吸附的影响40

3.5.2 洗脱条件对洗脱效果的影响40

3.6 降解产物浅析40-44

3.6.1 降解液中脂肪酸测定40-42

3.6.2 氨基酸红外光谱图42

3.6.3 氨基酸种类和含量的测定结果42-44

第四章 结论44-45
致谢45-46
参考文献46-49
作者介绍49
攻读硕士学位期间探讨成果49-50