谈述山茱萸山茱萸总苷制备工艺优化及其耐缺氧作用

论文导读：50℃下酶解4小时后,乙醇提取得到总苷的策略,该策略得到的总苷有效成分含量高于传统醇提法近10%；(4)引入数学统计的归一化概念,结合星点设计——响应面法优化山茱萸总苷乙醇提取工艺,得出乙醇提取的最佳条件为：乙醇浓度(X1)：25%-27%,液料比(X2)：12-16倍,提取时间(X3)：30-40min(5)引入数学统计的归一化概念,结合星点设计——响
摘要：山茱萸(Fructus Corni)是山茱萸科植物(Cornus officinaps Sieb.et Zucc)的干燥成熟果肉,别名枣皮,萸肉等,陕西汉中、河南南阳、浙江杭州是其三大主产区。山茱萸是一种常用的补益中药,具有补益肝肾,涩精固脱的功效。临床用于治疗眩晕耳鸣,腰膝酸痛,遗尿尿频,遗精阳痿,大汗虚脱和内热消渴等症。现代探讨表明,山茱萸总环烯醚萜苷(简称山茱萸总营)为山茱萸的主要活性部位,具有抗炎、保肝、免疫抑制等活性,尤其在保护神经以及治疗糖尿病及其并发症的方面体现出显著的作用。本课题对山茱萸总苷制备工艺进行了优化,制定出了一个山茱萸总苷的制备工艺路线,此策略大大提升了山茱萸总苷有效成分的含量和回收率,为大规模生产山茱萸总苷以及单体化合物提供前提条件,以便于山茱萸药材的质量制约和环烯醚萜苷类成分的活性探讨。同时本课题对山茱萸总苷的生物活性进行了初步的探讨。本课题实验包括两大部分：第一部分包括六个小节：(1)建立山茱萸中主要环烯醚萜苷类成分——莫诺苷、马钱苷和獐牙菜苷的HPLC定量浅析策略。以它们作为山茱萸总苷的指标性化合物,为山茱萸总苷制备工艺的优化提供量化考察策略,同时也为山茱萸的质量评价提供依据；(2)考察不同的前处理工艺并选择最佳案例。确定最佳案例：将山茱萸新鲜果实投入沸水中,烫煮10分钟后捞出,冷却片刻去除果核,40℃烘干为最佳前处理条件；(3)运用生物转化的策略优化山茱萸总苷提取效率。对四种酶进行比较实验,优选出苦杏仁酶在恒温50℃下酶解4小时后,乙醇提取得到总苷的策略,该策略得到的总苷有效成分含量高于传统醇提法近10%；(4)引入数学统计的归一化概念,结合星点设计——响应面法优化山茱萸总苷乙醇提取工艺,得出乙醇提取的最佳条件为：乙醇浓度(X1)：25%-27%,液料比(X2)：12-16倍,提取时间(X3)：30-40min(5)引入数学统计的归一化概念,结合星点设计——响应面法优化山茱萸总苷大孔树脂纯化工艺,得出大孔树脂纯化步骤的最佳条件为：乙醇浓度(X1)：48%-55%,洗脱体积(X2)：8-9BV,上样量(X3)：40-50mg/g。(6)最后考察了山茱萸的贮藏、山茱萸其他部位的药用价值以及伪品的鉴别。第二部分对山茱萸总苷的生物活性做了初步的探讨,进行了山茱萸总苷小鼠常压耐缺氧实验。结果表明,山茱萸总苷小、中、大剂量组与水对照组比论文导读：28-292.4结果与讨论29-313.山茱萸总苷酶解法提取优化31-343.1引言313.2实验材料与仪器313.3酶解策略考察31-323.4结果与讨论32-344.星点设计——响应面法优化山茱萸总苷提取工艺34-394.1引言344.2实验材料与仪器344.3星点实验设计34-364.4响应面法数据处理36-384.5验证与放大实验38-394.6讨论39

5.星点设计——

较,均可显著延长常压缺氧小鼠的存活时间,且有非常显著的差别(P0.01)。山茱萸总苷中、大剂量与阳性药组相比,也有非常显著的差别(P0.01)。山茱萸总苷各个剂量组对常压耐缺氧小鼠存活时间的延长有一定的剂量依赖联系。关键词：山茱萸论文环烯醚萜苷论文归一化论文星点设计——响应面法论文工艺路线论文耐缺氧作用论文
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Abstract5-10
第一章 文献回顾10-20

1. 山茱萸概述10-11

2. 山茱萸总苷概述11-19

2.1 山茱萸总苷的化学成分11-12

2.2 山茱萸总苷的药理作用12-15

2.3 山茱萸总苷的制备15-18

2.4 山茱萸环烯醚萜苷类成分的含量测定策略18

2.5 山茱萸伪品及鉴定策略18-19

2.6 山茱萸药用部位探讨19

3. 课题目的19-20

第二章 山茱萸总苷的制备工艺探讨20-50

1. 山茱萸提取物中莫诺苷、马钱苷和獐牙菜苷的定量浅析20-28

1.1 实验材料与仪器20-22

1.2 山茱萸供试品溶液的制备22

1.3 对照品溶液的制备22

1.4 色谱条件22-23

1.5 线性考察23

1.6 定量限(LOQ)和检测限(LOD)23-24

1.7 精密度试验24

1.8 重复性试验24

1.9 稳定性试验24

1.10 加样回收率试验24-27

1.11 讨论27-28

2. 山茱萸药材前处理策略优化28-31

2.1 引言28

2.2 实验材料与仪器28

2.3 山茱萸药材的不同前处理策略考察28-29

2.4 结果与讨论29-31

3. 山茱萸总苷酶解法提取优化31-34

3.1 引言31

3.2 实验材料与仪器31

3.3 酶解策略考察31-32

3.4 结果与讨论32-34

4. 星点设计——响应面法优化山茱萸总苷提取工艺34-39

4.1 引言34

4.2 实验材料与仪器34

4.3 星点实验设计34-36

4.4 响应面法数据处理36-38

4.5 验证与放大实验38-39

4.6 讨论39

5. 星点设计——响应面法优化大孔树脂纯化工艺39-44

5.1 引言39-40

5.2 实验材料与仪器40

5.3 星点实验设计40-41

5.4 响应面法数据处理41-43论文导读：动物50-513.实验策略513.1分组及给药513.2小白鼠常压缺氧实验514.结果与讨论51-544.1实验结果51-524.2小结52-54参考文献54-62攻读硕士学位期间取得的科研成果62-63致谢63上一页123

5.5 验证与放大实验43-44

5.6 讨论44

6. 其他方面考察44-47

6.1 贮藏44-45

6.2 其他部位考察45

6.3 伪品的色谱鉴别45-46

6.4 结果与讨论46-47

7. 结果与讨论47-50

7.1 结果47-49

7.2 讨论49-50

第三章 山茱萸总苷的对小鼠耐缺氧作用的探讨50-54

1. 前言50

2. 材料和策略50-51

2.1 实验药物50

2.2 实验材料50

2.3 实验动物50-51

3. 实验策略51

3.1 分组及给药51

3.2 小白鼠常压缺氧实验51

4. 结果与讨论51-54

4.1 实验结果51-52

4.2 小结52-54

参考文献54-62
攻读硕士学位期间取得的科研成果62-63
致谢63