探讨多样性中国南海柳珊瑚共附生微生物多样性与抗菌作用

论文导读：
摘要：在众多海洋生态系统中，珊瑚礁生态系统是海洋中物种多样性程度最高的生态类型，在其中几乎生活着所有海洋生物的门类。随着海洋天然产物和海洋药物探讨的不断深入，海洋共附生微生物，特别是热带珊瑚礁无脊椎动物来源的共附生微生物，引起了人们的广泛关注。本探讨对中国南海柳珊瑚共附生微生物多样性、抗菌活性、活性菌株次级代谢产物的抗菌作用及其作用机制进行了初步探讨。1.中国南海柳珊瑚共附生微生物多样性与抗菌活性探讨。以采自中国南海涠洲岛海域的10种柳珊瑚为探讨对象，分离柳珊瑚共附生微生物，获得真菌242株，细菌82株，结合形态学、生理生化特性和分子生物学鉴定策略，确定这些微生物的种属，并建立系统发育树。以分离获得的真菌总数来说，以花柳珊瑚Anthogorgia ocbracea中分离获得真菌最多，有44株，而以灯芯柳珊瑚Junceellajuncea中分离获得的真菌最少，只有12株。以真菌多样性来看，以灯芯柳珊瑚J. juncea中的真菌只属于3科4属，多样性程度最低；而丛柳珊瑚Paraplexaura sp.中分离出的真菌虽然只有17株，但是已经鉴定的13株真菌却分属于6科8属，共附生微生物的种属数最多。以不同种属真菌出现的频率来看，青霉属(Penicilpum)、枝孢属(Cladosporium)和曲霉属(Aspergillus)真菌是出现频率最高的三个属；而短梗霉属(Aureobasidium)、毕赤酵母属(Pichia)和布勒掷孢酵母属(Bullera)的出现频率最低，属于一些柳珊瑚特有的真菌种类。对这些柳珊瑚共附生真菌进行抗菌活性探讨发现，分离获得的绝大多数共附生真菌具有一定的抗菌活性，且对革兰氏阳性菌S．aureus和M．tetragenus的抑制活性要强于对其他微生物。2.柳珊瑚共附生真菌抗菌化合物的追踪分离及其抗菌机制探讨。采取活性追踪分离的策略，运用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析和半制备HPLC等手段，以一株中国南海柳珊瑚Echinogorgia rebekka共附生链格孢霉属真菌Alternaria sp.发酵液的乙酸乙酯相中，分离获得1个对海洋病原菌和污损菌鳗弧菌Vibrio anguillarum具有较强抗菌活性的蒽醌类化合物，运用NMR，MS等波谱技术并结合文献数据鉴定其结构为macrosporin。初步的抗菌作用机制探讨发现，该化合论文导读：
物能破坏鳗弧菌的细胞壁和细胞膜，导致细胞通透性增加，胞内大量内容物外泄，对基因组DNA有一定的裂解作用，最终导致菌体死亡，以而起到抗菌作用。本探讨首次报道了macrosporin对鳗弧菌的抗菌作用及其作用机制。综上所述，本探讨首次对中国南海柳珊瑚共附生微生物的多样性和生物进化联系进行了初步探讨，构建了10种柳珊瑚共附生真菌的系统发育树；对分离自中国南海柳珊瑚E. rebekka共附生链格孢霉属真菌Alternaria sp.的化合物macrosporin，首次以细胞渗透性、超微细胞结构和对细胞DNA的影响等方面，探讨了其对鳗弧菌的抗菌作用机制。本探讨为海洋天然产物和海洋药物的探讨开发提供了微生物资源，并为微生物次级代谢产物抗菌机制探讨奠定了基础。关键词：柳珊瑚论文共附生微生物论文分离鉴定论文多样性论文抗菌论文作用机制论文
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Abstract8-12
第一章 前言12-17

1. 探讨背景与目的作用12-14

2. 探讨思路、策略及技术路线14-16

参考文献16-17
第二章 柳珊瑚共附生微生物多样性与抗菌活性探讨17-180
第一节 刺柳珊瑚Echinogorgia rebekka GX-WZ-19共附生微生物及其抗菌活性18-39
第二节 灯芯柳珊瑚 Junceella juncea GX-WZ-24 共附生微生物及其抗菌活性39-47
第三节 花柳珊瑚 Anthogorgia ocbracea GX-WZ-20 共附生微生物及其抗菌活性47-65
第四节 丛柳珊瑚 Paraplexaura sp. GX-WZ-10 共附生微生物及其抗菌活性65-79
第五节 蕾二歧灯芯柳珊瑚 Dichotella gemmacea GX-WZ-6 共附生微生物及其抗菌活性79-92
第六节 蕾二歧灯芯柳珊瑚 Dichotella sp. GX-WZ-7 共附生微生物及其抗菌活性92-105
第七节 小月柳珊瑚 Menella kouare GX-WZ-18 共附生微生物及其抗菌活性105-119
第八节 小月柳珊瑚Menella kanisa GX-WZ-11共附生微生物及其抗论文导读：5-175小结175-176参考文献176-180第三章柳珊瑚共附生真菌抗菌化合物的追踪分离及其抗菌机制初步探讨180-1981结果与讨论180-1892材料与策略189-195小结195-196参考文献196-198第四章综述：海洋生物共附生微生物及其次级代谢产物探讨198-2181.抗菌类、抗病毒类生物活性物质199-203

2.抗肿瘤活性化合物203-207

3.海洋生物毒

菌活性119-132 第九节 柳珊瑚 GX-WZ-4 共附生微生物及其抗菌活性132-145
第十节 柳珊瑚 GX-WZ-21 共附生微生物及其抗菌活性145-158
第十一节 10种柳珊瑚共附生真菌的比较158-165
第十二节 实验部分165-175
小结175-176
参考文献176-180
第三章 柳珊瑚共附生真菌抗菌化合物的追踪分离及其抗菌机制初步探讨180-198
1 结果与讨论180-189
2 材料与策略189-195
小结195-196
参考文献196-198
第四章 综述：海洋生物共附生微生物及其次级代谢产物探讨198-218

1. 抗菌类、抗病毒类生物活性物质199-203

2. 抗肿瘤活性化合物203-207

3. 海洋生物毒素207-209

4. 酶及酶抑制剂209-210

5. 其他活性化合物210-214

参考文献214-218
结语和革新点218-220
结论218-219
革新点219-220
攻读博士期间发表的论文220-221
致谢221-222
附录222-267