对于激酶益气养阴活血方治疗糖尿病肾病实验及远期疗效观察,

论文导读：
摘要：[探讨背景]糖尿病肾病(DN)是糖尿病最常见和主要的慢性微血管并发症,早期体现为尿中微量蛋白,继而出现持续蛋白尿、水肿、高血压、肾功能不建全,最终进展至终末期肾病(ESRD)。DN时,肾小球系膜细胞是主要的受累细胞,高血糖作为糖尿病最基本的生化特点,可激活胞外信号调节激酶(ERK)通路并增加其下游产物前列腺素E2(PGE2)、转化生长因子(TGF-β1)及纤维连接蛋白(FN)的表达,引起早期肾小球高滤过、细胞外基质(ECM)合成增加,导致DN的发生、进展。目前关于中药复方对DN时ERK通路的影响多数是动物体内试验,体外实验报道较少,且多数侧重在其非血流动力学效应。中医药在防治DN方面有较大优势,国内关于中医药治疗DN的临床探讨一般疗程较短,随访超过2年的报道较少,多数采取随机对照试验,用药及治疗案例单一,临床推广性低,且评价指标侧重在实验室指标及临床症状,缺少对终点事件的评价。本课题乃中国中医科学院优势病种的后续探讨,益气养阴活血方是导师治疗DN的经验方,短期疗效观察可以降低DN患者尿蛋白排泄率,改善存活质量,但其作用机制之前并未做相关实验探讨,且缺乏远期疗效观察。[探讨目的]1、实验探讨：探讨益气养阴活血方通过抑制肾小球系膜细胞的增殖、ERK通路的活化及其下游产物的表达而治疗糖尿病肾病的作用机制。2、临床探讨：整体评价以益气养阴活血方为主的中医辨证治疗糖尿病肾病的远期疗效,发掘中医治疗本病的特点与优势,为改善中医规范化治疗案例和整体疗效评价系统提供参考。[探讨策略]1、实验探讨1.1探讨对象：大鼠肾小球系膜细胞。1.2干预措施：以高糖作为刺激因素诱导系膜细胞增殖及ERK通路活化,予益气养阴活血方和福辛普利含药血清加以干预,根据培养条件不同,将系膜细胞分为6组：正常血糖组、高糖组、高糖+福辛普利组和高糖+高、中、低浓度中药组。1.3观察指标：培养6h、12h、24h、48h、72h后,用Western-blot法检测系膜细胞磷酸化ERK1/2(pERK1/2)蛋白的表达,Real time-PCR法检测系膜细胞TGF-β1基因的表达,ELISA法检测细胞上清液中PGE2和FN的含量。在培养24h、48h、72h时,用4-甲偶氮唑蓝(MTT)法检测系膜细胞的增殖。2、临床探讨2.1探讨对象：2006年12月～2009年12月间在望京医院住院或者门诊治疗的糖尿病肾病患者。2.2干预措施：以益气养阴活血方为主的中医辨证治疗作为暴露因素,将既往病例划分为两个队列：(1)中西医结合队列(治疗组),接受以益气养阴活血方为主的中医辨证治疗+西医基础治疗；(2)西医队列(对照组),接受单纯西医基础治。对两组病例进行回顾性观察。2.3观察指标：蛋白尿、肾功能进展,终末期肾病(ESRD)和死亡各类终点事件；实验室指标疗效、临床症状疗效和疾病综合疗效；存活质量及营养状态评估。[探讨结果]1、实验探讨1.1高糖刺激24h、48h后能显著推动系膜细胞增殖,但至72h,高糖促细胞增殖走势下降,与正常组相比无显著差别。福辛普利和高浓度中药含药血清组均可显著抑制高糖引起的系膜细胞增殖,两组间未见显著差别。中浓度中药组仅在24h体现出显著的抑制作用,低浓度中药组均未见抑制作用。1.2高糖刺激6h后系膜细胞中pERK1/2蛋白的表达即显著升高,随时问延长表达逐渐增高,24h达到高峰,后逐渐减弱,至72h恢复至与正常组同等表达水平。福辛普利和高浓度中药组在6h-48h均显著抑制ERK的活化,两组在各时间点均无显著差别。中浓度中药组在6h-24h亦体现出显著的抑制作用。而低浓度中药组仅在12h可见显著的抑制作用。1.3与正常组相比较,高糖组TGF-β1mRNA的表达以12h开始显著升高,EN的表达则以24h开始显著升高,随着时间延长,至72h升高走势更为显著。高浓度中药组在各时间点均可显著的抑制TGF-β1mRNA、FN表达的升高。福辛普利组在早期有显著抑制作用,中浓度中药组在后期有显著抑制作用。低浓度中药组均未见抑制作用。1.4随着ERK通路的激活,高糖组PGE：的表达在6h即显著升高,48h表达量达到峰值,至72h PGE2的表达较正常组仍有显著升高,但表达量较48h有所降低。高浓度中药组在12-48h可显著抑制PGE2的升高,中浓度中药组在24h、48h亦可显著抑制PGE2的升高。福辛普利组和低浓度中药组均未见抑制作用。2、临床探讨本探讨共纳入病例105例,其中治疗组67例,对照组38例,随访时间(以首次纳入观察到末次随访)为2-5年,治疗组中位随访时间为3.6年,对照组中位随访时间为3.8年。两组基线资料经比较具有可比性。2.1治疗组蛋白尿疗效总有效率52.9%,对照组总有效率28.6%,两组比较差别有统计学作用。治疗组蛋白尿终点事件的总发生率为14.论文导读：讨19-49材料与策略19-30结果30-40讨论40-47参考文献47-49第二部分益气养阴活血方治疗糖尿病肾病的远期疗效观察49-73对象与策略49-54结果54-63讨论63-71参考文献71-73文献综述73-91综述一MAPK信号通路在糖尿病肾病中的作用73-81参考文献78-81综述二中医药治疗糖尿病肾病探讨进展81-91参考文献88-91致谢91-93个人简历93-95
9%,对照组总发生率为34.2%,两组比较差别有统计学作用。其中治疗组早期DN进入临床期DN的发生率为16.1%,对照组发生率为47.4%,两组比较差别有统计学作用。治疗组尿蛋白程度进展的发生率为13.9%,对照组发生率为21.1%,两组比较无统计学差别。2.2治疗组肾功能疗效总有效率62.5%,对照组总有效率20%,两组比较差别有统计学作用。治疗组CKD进展的发生率为14.9%,对照组发生率为34.2%,两组比较差别有统计学作用。治疗组Scr由正常进展至异常的发生率为3.9%,对照组发生率为17.9%,两组比较差别有统计学作用。治疗组Scr异常者数值翻倍或升高≥50%的发生率为12.5%,对照组发生率为50%,两组比较差别有统计学作用。2.3治疗组临床症状疗效总有效率58.2%,对照组总有效率31.6%,两组比较差别有显著统计学作用。2.4治疗组综合疗效总有效率40.3%,对照组总有效率21.1%,两组比较差别有统计学作用。2.5治疗组ESRD发生率为3%,对照组发生率为13.2%：两组比较差别有统计学作用。2.6治疗组死亡率为7.5%,对照组死亡率为10.5%；两组比较无统计学差别。2.7治疗组和对照组普适性存活质量及糖尿病特异性存活质量积分比较,差别有显著统计学作用。2.8治疗组营养不良风险的发生率为14.9%,对照组发生率为31.6%,两组比较差别有统计学作用。[结论]1、实验探讨：益气养阴活血方可抑制早期系膜细胞的增殖、ERK通路的活化及其下游产物PGE2、TGF-β1和FN的表达升高,对ERK通路所引起的血流动力学效应和非血流动力学效应均有干预作用,这可能是其临床作用机制所在。2、临床探讨：以益气养阴活血方为主的中医辨证治疗能较好地改善临床症状；延缓早期蛋白尿的进展；保护肾脏、延缓肾功能的进展及ESRD的进程,改善DN的肾脏预后；提升存活质量、改善营养情况。[革新性]1、实验探讨1.1益气养阴活血方为导师临床经验用方,首次对其作用机制做相关实验探讨。1.2以ERK通路血流动力学和非血流动力学两方面效应探讨药物的作用机制。2、临床探讨2.1观察中医药治疗DN的远期疗效(≥2年)。2.2以多方面观察指标更全面地反映整体综合疗效。2.3设定了不同的蛋白尿和肾功能终点事件作为次要结局指标,更早期反映疗效差别。关键词：糖尿病肾病论文益气养阴活血论文肾小球系膜细胞论文胞外信号调节激酶论文队列探讨论文终点事件论文远期疗效论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。中文摘要5-9
Abstract9-14
英文缩略语14-15
引言15-19
参考文献17-19
第一部分 益气养阴活血方治疗糖尿病肾病的实验机理探讨19-49
材料与策略19-30
结果30-40
讨论40-47
参考文献47-49
第二部分 益气养阴活血方治疗糖尿病肾病的远期疗效观察49-73
对象与策略49-54
结果54-63
讨论63-71
参考文献71-73
文献综述73-91
综述

一、MAPK信号通路在糖尿病肾病中的作用73-81

参考文献78-81
综述

二、中医药治疗糖尿病肾病探讨进展81-91

参考文献88-91
致谢91-93
个人简历93-95
附表95-112
附表1 中医证候调查表95-98
附表2 -36存活质量量表98-102
附表3 糖尿病患者存活质量特异性量表(DSQL)102-104
附表4 营养风险筛查NRS-2002评估表104-112