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对于尼莫地平头穴丛刺对慢性脑缺血大鼠学习记忆能力和HIF-1α及其靶基因VEGF表达影响题目

最后更新时间:2024-03-31 作者:用户投稿原创标记本站原创 点赞:18292 浏览:67259
论文导读:
摘要:目的:通过观察头穴丛刺法对慢性脑缺血损伤大鼠学习记忆能力及HIF-1α、VEGF表达的影响,探讨头穴丛刺治疗慢性脑缺血致学习记忆障碍的作用机制,为临床运用头穴丛刺治疗该病提供论述依据,以更好的指导临床。策略:利用Morris水迷宫筛选出学习记忆能力正常的Wistar大鼠72只,随机分为空白对照组(A)、假手术组(B)、和手术组。手术组采取改良的双侧颈总动脉结扎法(2VO)制备慢性脑缺血致学习记忆障碍大鼠模型,术后4周,再通过Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,将造模成功的大鼠分为模型组(C)、尼莫地平组(D)和头穴丛刺组(E)。A组、B组和C组不予治疗。D组给予尼莫地平1mg/kg灌胃,每天1次,治疗4周。E组采取头穴丛刺法,取百会和百会左右旁开2mm三个穴位,留针30min,每日1次,治疗4周。术后8周(治疗后4周)再次采取Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力;光镜下观察额叶皮层、海马组织病理学变化;免疫组化检测额叶皮层、海马HIF-1α、VEGF蛋白表达;RT-PCR检测额叶皮层、海马HIF-1α、VEGFmRNA表达。结果:1.Morris水迷宫检测结果:术后8周A组和B组相比无显著性差别(P0.05);C组、D组和E组大鼠学习记忆能力显著下降,与A组相比差别显著(P0.05);D组和E组与C组相比,具有显著性差别(P0.05),大鼠的学习记忆能力有所提升;D组和E组相比无显著性差别(P0.05)。2.HE染色结果:A组和B组未见显著病理学变化,C组可见大量神经元细胞固缩,胞体形态不规则,胞浆浓缩深染,核仁变小或消失,细胞周围可见显著的空壳区;D组和E组神经细胞排列层次及细胞形态较清晰,少见固缩细胞,与C组相比脑组织损害程度显著减轻;而D组与E组相比,固缩细胞数量显著多于E组3.HIF-1α、VEGF免疫组化染色结果:A组和B组神经细胞数量形态分布正常,排列紧密有序,细胞核圆而大,染色浅,核仁清晰,偶见HIF-1α、VEGF阳性细胞表达,两者比较无显著性差别(P0.05);C组、D组和E组均可见HIF-1α、VEGF表达增高,与A组比较差别显著(P0.05);而D组和E组较.C组表达更高,有显著性差别(P0.05);D组与E组相比,后者阳性细胞表达率显著升高,差别有统计学作用(P0.05)。4.HIF-1α、VEGF RT-PCR检测结果:A组和B组HIF-1α、VEGF mRNA表达极弱,两组相比无显著性差别(P0.05)C组、D组和E组均出现HIF-1α、VEGF mRNA扩增条带,表达丰度显著高于A组,差别显著(P0.05);而D组和E组的表达较C组高,差别有统计学作用(P0.05);与D组相比,E组表达量更高,差别显著(P0.05)。结论:1.采取改良的2VO法制作慢性脑缺血致学习记忆障碍大鼠模型,并通过Morris水迷宫以行为学和HE染色以组织学两方面予以评价,模型成功、可靠。2.头穴丛刺可提升慢性脑缺血致学习记忆障碍大鼠的学习记忆成绩,改善额叶皮层、海马组织病理学变化,减少神经元死亡,以而改善大鼠的学习记忆能力3.头穴丛刺可能通过上调HIF-1α和VEGF的表达,推动血管和神经元的再生,以而发挥脑保护功能。4.头穴丛刺可运用于慢性脑缺血致学习记忆障碍的防治,有望成为慢性脑缺血致学习记忆障碍防治新的治疗策略之一。关键词:慢性脑缺血论文学习记忆障碍论文额叶皮层论文海马论文头穴丛刺论文尼莫地平论文HIF-1α论文VEGF论文
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中文摘要5-7
Abstract7-10
引言10-12
文献综述12-27
1 慢性脑缺血致学习记忆障碍的分子机制及治疗12-20

1.1 慢性脑缺血致学习记忆障碍的分子机制12-16

1.2 慢性脑缺血致学习记忆障碍的治疗16-20

1.3 结语20

2 HIF-1及其靶基因VEGF20-27

2.1 HIF-121-22

2.2 靶基因VEGF22-25

2.3 HIF-1对VEGF的影响25-27

材料和策略27-37
1 主要实验仪器及试剂27-29

1.1 实验仪器设备27-28

1.2 药品28

1.3 主要试剂28-29

2 策略29-37

2.1 实验动物分组及模型制备29

2.2 Morris水迷宫试验29-30

2.3 治疗策略30-31

2.4 石蜡切片标本制备31

2.5 苏木精-伊红(HE)染色31-32

2.6 免疫组织化学染色32-33

2.7 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测33-36

2.8 统计学处理36-37

结果37-45
1 实验动物一般论文导读:-55致谢55-56参考文献56-66附图66-78攻读博士学位期间发表的论文78-80个人简历80上一页12
情况37
2 行为学检测结果37-40
3 HE染色结果40
4 免疫组化染色结果40-42
5 RT-PCR检测结果42-45
讨论45-54
1 慢性脑缺血致学习记忆障碍大鼠模型的建立及评价45-48

1.1 慢性脑缺血致学习记忆障碍大鼠模型的建立45-46

1.2 慢性脑缺血致学习记忆障碍大鼠行为学评价46-47

1.3 慢性脑缺血致学习记忆障碍大鼠额叶皮层及海马组织病理学评价47-48

2 慢性脑缺血致学习记忆障碍大鼠HIF-1α及其靶基因VEGF的表达48-49
3 头穴丛刺法的选择依据49-51
4 尼莫地平对照治疗的选择依据51
5 头穴丛刺对慢性脑缺血致学习记忆障碍大鼠的影响51-54

5.1 头穴丛刺对慢性脑缺血致学习记忆障碍大鼠行为学的影响51

5.2 头穴丛刺对慢性脑缺血致学习记忆障碍大鼠组织学的影响51-52

5.3 头穴丛刺对慢性脑缺血致学习记忆障碍大鼠HIF-1α、VEGF表达的影响52-54
结论54-55
致谢55-56
参考文献56-66
附图66-78
攻读博士学位期间发表的论文78-80
个人简历80