浅论MDCK川丁特罗体外吸收转运

最后更新时间：2024-02-24 作者：用户投稿原创标记

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论文导读：antinterol），是沈阳药科大学程卯生教授在马布特罗的结构基础上，通过结构修饰，自主研制的治疗哮喘疾病的新型β2受体激动剂。一、利用Caco-2细胞模型对川丁特罗的转运性质进行探讨建立Caco-2单层细胞模型，并通过生长曲线、跨膜电阻值（TEER）以及荧光黄的透过率的测定证明，本实验室所建立的Caco-2细胞模型可运用于药物转运的探讨
摘要：本实验建立了Caco-2以及MDCK-MDR1和MDCK等细胞模型，并用跨膜电阻值、荧光黄透过量等评价了模型，证明模型得到的数值是真实可用的。而后利用这3种模型探讨了川丁特罗的转运以及吸收上的一些性质。川丁特罗（2-(4-氨基-3-氯-5-三氟)-2-叔丁氨基乙醇，trantinterol），是沈阳药科大学程卯生教授在马布特罗的结构基础上，通过结构修饰，自主研制的治疗哮喘疾病的新型β2受体激动剂。一、利用Caco-2细胞模型对川丁特罗的转运性质进行探讨建立Caco-2单层细胞模型，并通过生长曲线、跨膜电阻值（TEER）以及荧光黄的透过率的测定证明，本实验室所建立的Caco-2细胞模型可运用于药物转运的探讨。利用成功建立的Caco-2细胞模型探讨川丁特罗转运性质，将维拉帕米抑制组作为阴性对照组。结果表明，川丁特罗在Caco-2细胞模型上的外排率为1.08；用维拉帕米抑制P-gp后，川丁特罗外排率为1.11。两者无显著性差别（P＞0.05），可见川丁特罗不是P-gp的底物，抑制P-gp后，不能显著转变川丁特罗的外排率。二、利用MDCK和MDCK－MDR1细胞模型对川丁特罗的转运性质进行探讨建立MDCK和MDCK-MDR1体外药物转运细胞模型，通过跨膜电阻值（TEER）、荧光黄的表观渗透率（Papp）以及罗丹明123（Rho123）在细胞上的转运对模型进行评价。MDCK和MDCK-MDR1细胞的跨膜电阻均达到标准，荧光黄的表观渗透率均小于5%。用Rho123进行转运试验验证P-gp的表达量，MDCK-MDR1的外排率为5.16，说明P-gp的表达量很高。结果表明，MDCK和MDCK-MDR1细胞连接紧密，并且P-gp表达量较高，由此MDCK和MDCK-MDR1细胞模型成功建立了，各项指标符合规定，可以用于药物与P-gp相互作用的探讨。用MDCK和MDCK-MDR1细胞模型探讨川丁特罗的双向转运。结果显示：川丁特罗在MDCK-MDR1和MDCK细胞上外排率及其相似，没有显著性差别，分别为1.2和1.05，说明川丁特罗不是P-gp的底物。川丁特罗对Rho123在MDCK-MDR1细胞模型中转运的影响实验中，川丁特罗显著降低了Rho123的外排比率（P＜0.05）。这表明川丁特罗抑制了P-gp介导的Rho123外排，可能为P-gp的抑制剂。在川丁特罗与P糖蛋白（P-gp）的ATP酶（ATPase）相互作用的探讨中发现，川丁特罗对P-gp的抑制作用是通过抑制P-gp的ATPase活性实现的。关键词：川丁特罗论文MDCK-MDR1论文Caco-2论文P-gp论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。序4-5
中文摘要5-7
Abstract7-12
缩略语说明12-14
第1章前言14-20

1.1 探讨药物口服吸收的三种方式[1,2]14-19

1.1 体内法14

1.2 在体法[4]14-15

1.3 体外细胞模型法15-19

1.2 探讨内容19-20

第2章利用 Caco-2 细胞模型探讨川丁特罗的转运20-41

2.1 Caco-2 细胞模型的建立20

2.2 材料与仪器20-21

2.1 药品与试剂20-21

2.2 仪器与设备21

2.3 溶液的配制21-23

2.3.1 细胞培养液及缓冲液的配制21-22

2.3.2 转运药物溶液的配制22-23

2.4 Caco-2 细胞单层模型的建立和验证23

2.4.1 Caco-2 细胞生长走势的测定23

2.4.2 Caco-2 细胞 TEER 值的测定23

2.4.3 Caco-2 细胞荧光黄透过率的测定23

2.5 细胞毒性实验23

2.6 利用 Caco-2 细胞探讨川丁特罗的转运实验23-24

2.7 川丁特罗在 Caco-2 细胞上的吸收方式实验24

2.8 LC/MS/MS 法测定样品24-26

2.8.1 溶液的配制24-25

2.8.2 LC/MS/MS 条件25

2.8.3 样品的预处理25

2.8.4 川丁特罗在 HBSS 中测定策略的确证25-26

2.9 结果26-39

2.9.1 Caco-2 细胞模型的验证26-27

2.9.2 不同浓度川丁特罗对 Caco-2 细胞的影响27-28

2.9.3 利用 Caco-2 细胞对川丁特罗的转运进行探讨28-33

2.9.4 川丁特罗在 Caco-2 细胞上的吸收方式实验33

2.9.5 川丁特罗在 HBSS 中测定策略的确证33-39

2.10 讨论39-40

2.10.1 Caco-2 细胞模型39

2.10.12 川丁特罗在 Caco-2 模型上的转运39-40

2.11 本章小结40-41

第3章川丁特罗在 MDCK-MDR1 细胞模型中的转运探讨41-61

3.1 MDCK 和 MDCK-MDR1 细胞41-42

3.2 材料与仪器42-43

2.1 药品与试剂42-43

2.2 仪器与设备43

3.3 溶液的配制43-45

3.1 细胞培养相关溶液的配制43-44

3.2 转运试验相关溶液的配制44-45

3.4 MDCK-MDR1 细胞模型的建立及评价45-46

3.4.1 MDCK 和 MDCK-MDR1 细胞生长曲线的测定45

3.4.2 MDCK 和 MDCK-MDR1 细胞 TEER 值的测定45

3.4.3 MDCK 和 MDCK-MDR1 细胞荧光黄透过率的测定45

3.4.4 Rho123 在 MDCK-MDR1 细胞中的转运探讨45-46

3.5 细胞毒性实验46

3.6 川丁特罗在 MDCK-MDR1 细胞上的双向转运实验46

3.7 川丁特罗对 P-gp 介导 Rho123 转运的影响46-47

3.8 川丁特罗对 P-gp 的 ATP 酶活性的影响47

3.9 结果47-58

3.9.1 MDCK-MDR1 细胞模型的评价47-50

3.9.2 不论文导读：51-553.9.4川丁特罗对P-gp介导Rho123转运的影响55-563.9.5川丁特罗对P-gpATP活性的影响56-583.10讨论58-593.10.1MDCK和MDCK-MDR1细胞模型的建立583.10.2川丁特罗的双向转运探讨58-593.10.3川丁特罗对P-gpATP酶活性的影响593.11本章小结59-61参考文献61-65个人介绍65-66致谢66上一页12
同浓度川丁特罗对 MDCK 和 MDCK-MDR1 细胞的影响50-51