简谈5-脂氧酶对鱼藤酮诱导PC12细胞损伤和BV2细胞激活调节作用-

论文导读：
摘要：帕金森病(PD)是危害中老年人健康的重要中枢神经系统退行性疾病,以中脑黑质致密部多巴胺(DA)神经元进行性退变为主要病理特点。小胶质细胞激活诱导的脑内炎症是PD的一种主要病理变化,5-脂氧酶(5-LOX)是催化花生四烯酸生成炎症介质半胱氨酰白三烯(CysLTs;包括LT,LTD4,LTE4)的关键酶,CysLTs通过激动CysLT受体参与多种脑内炎症病变,但是5-LOX与PD的联系尚未阐明,作为PD治疗靶点尚待探讨。本探讨目标：①在神经元样PC12细胞,以PD诱导因子鱼藤酮诱导PC12细胞损伤,观察5-LOX是否参与鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤。②在小鼠小胶质细胞株BV2细胞,探讨鱼藤酮刺激下BV2细胞5-LOX/CysLT1受体表达和/或活性变化,这种变化与BV2细胞激活和炎症因子合成释放的联系,观察5-LOx/CysLT1受体是否参与PD小胶质细胞激活。③评价5-LOX抑制剂CysLT1受体拮抗剂对PD神经元损伤和小胶质细胞炎症的作用。第一部分5-脂氧酶参与鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤目的：以鱼藤酮诱导PC12细胞损伤建立PD细胞模型,观察5-LOX是否参与鱼藤酮诱导PC12细胞损伤。策略：在鱼藤酮处理后不同时间,以MTT策略检测PC12细胞活性变化,以免疫细胞化学策略检测5-LOX核膜移位情况；并观察5-LOX抑制剂zileuton的作用。结果：鱼藤酮(0.3-30μmol/L)诱导PC12细胞损伤；Zileuton (3-100μmol/L)减轻鱼藤酮诱导的细胞损伤；鱼藤酮还时间和浓度依赖性引起5-LOX核膜移位,Zileuton (1-30μmo/L)能抑制5-LOX核膜移位。结论：5-LOX参与鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤,5-LOX抑制剂zileuton可抑制5-LOX激活,减轻细胞损伤。第二部分5-LOX/CysLT1受体在鱼藤酮诱导的BV2细胞激活中的作用目的：以鱼藤酮诱导BV2细胞激活建立PD细胞模型,观察5-LOX/CysLT1受体在鱼藤酮诱导的BV2细胞激活中的作用。策略：在小鼠小胶质细胞株BV2细胞,不同浓度鱼藤酮处理24h,观察BV2细胞形态和数量变化；以免疫荧光技术和流式细胞仪策略检测细胞吞噬功能转变；以Western blotting和免疫细胞化学策略检测5-LOX/CysLT1受体表达和分布情况；以ELISA策略测定5-LOX产物CysLTs和细胞因子IL-1β、TNF-α水平；并观察5-LOX选择性抑制剂zileuton和CysLT1受体拮抗剂montelukast的作用。结果：①鱼藤酮(0.001-0.03μmol/L)诱导BV2细胞增殖和吞噬功能增强,细胞因子IL-1β、TNF-α释放增加；Zileuton (0.01-1μmol/L)有效抑制鱼藤酮诱导的BV2细胞增殖和吞噬,减少IL-1β、TNF-α释放。②鱼藤酮浓度依赖性引起BV2细胞5-LOX表达增加,5-LOX发生核膜／胞浆移位,5-LOX产物CysLTs水平增加；Zileuton (0.001-1μmol/L)抑制鱼藤酮诱导的BV2细胞5-LOX表达和活性增加。③CysLT1受体拮抗剂montelukast (0.001-1μmol/L)可显著抑制鱼藤酮诱导的BV2细胞吞噬,并降低细胞因子IL-1p水平。鱼藤酮(0.001和0.003μmol/L)诱导CysLT,受体表达增加；鱼藤酮(0.003μmol/L)还时间依赖性引起CysLT,受体以细胞浆移位到细胞核。结论：5-LOX/CysLT1受体参与鱼藤酮诱导的BV2细胞激活,5-LOX/CysLT1受体信号通路可能是调节小胶质细胞介导PD炎症的治疗靶点。关键词：5-脂氧酶论文半胱氨酰白三烯论文受体论文帕金森病论文鱼藤酮论文PC12细胞论文BV2细胞论文zileuton论文montelukast论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。致谢4-5
摘要5-7
ABSTRACT7-10
缩略词表10-12
引言12-14
第一部分：5-脂氧酶参与鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤14-30
引言14-15
实验材料15-16
实验策略16-18
结果18-24
讨论24-26
小结26-27
参考文献27-30
第二部分：5-LOX/CysLT_1受体在鱼藤酮诱导的BV2细胞激活中的作用30-66
引言30-32
实验材料32-36
实验策略36-44
结果44-61
讨论61-63
小结63-64
参考文献64-66
总结66-67
综述：5-脂氧酶与脑缺血和帕金森病炎症67-74
参考文献71-74
作者简历及在学期间所取得的科研成果74