环孢素A诱导牙龈增生,菌斑,基质金属蛋白酶-2,CD147,亲环素A,

论文导读：摘要6-8Abstract8-10英文缩写表10-11前言11-13第一部分环孢素A诱导牙龈增生动物模型的构建13-17实验材料13-14实验动物13无菌消毒器械13实验试剂13主要试验器械13-14实验策略14药物配制14给药策略及活体牙龈形态观察14实验结果14-17肉眼观察结果14-16组织形态学结果16-17第二部分CsA作用下牙龈组织MMP-2、
摘要：背景环孢素A（Cyclosporine A，CsA）是一种疏水性的含11个氨基酸的环多肽，特异性抑制由T细胞介导的免疫反应。作为一种强效的免疫抑制剂，已在全球范围内广泛运用于器官移植后的抗排斥反应和一些自身免疫性疾病的治疗。然而，与其相关的副作用也逐步显现，主要的系统性副作用包括有肾毒性、高胆固醇血症、多毛症、高血压等，CsA诱导的牙龈肥大（CsAInduced Gingival Overgrowth，CIGO）则是其在口腔内的一个严重的临床不足，严重影响到了病人的存活质量。由此，探究CIGO的发病机制具有十分重要的临床作用。探讨目的本探讨在构建大鼠CIGO病理模型的基础上，通过对大鼠牙龈增生情况的组织学和形态学评价，探讨菌斑有着与否对CIGO的产生有无影响；运用免疫组化和RT-PCR的策略观察比较CIGO与正常牙龈内CD147、MMP-2、CyPA的表达的差别。以胶原纤维降解失衡的角度，初步探讨CIGO的发病机制。探讨策略1.40只SD雄性大鼠，全麻下拔除大鼠左侧上颌磨牙，在同一SD大鼠口内建立有/无菌斑条件下的CIGO模型。经过2周的伤口愈合期后，将大鼠随机分为CsA组和对照组，分别给予CsA橄榄油溶液和纯橄榄油胃饲。给药4周后，定期观察大鼠牙龈增生情况。2.4周后，处死动物，运用形态学和组织学策略评估上颌双侧牙龈增生程度；浅析和比较MMP-2、CD147、CyPA蛋白在牙龈组织中的表达。3.分别取实验动物上颌双侧牙龈组织，抽提总RNA，逆转录合成cDNA行RT-PCR检测，以mRNA水平检测和比较MMP-2、CD147、CyPA在上颌两侧牙龈组织中表达水平的差别。结果1.造模后第2周起，部分CsA组大鼠下前牙唇侧牙龈黏膜深红，部分牙龈增厚呈隆起状，甚至牙龈出血；至第4周，可见CsA组大鼠下前牙唇侧牙龈黏膜紫红，牙龈增厚呈球形肿大；逐渐出现少食、消瘦、行动迟缓等症状；大鼠上颌双侧牙龈增生程度均较严重。光镜下可见，牙龈上皮过度角化，棘层显著增生，钉突伸长达结缔组织深层。对照组大鼠牙龈在观察期内无显著变化。上面陈述的结果表明，CIGO模型构建成功。2.双侧上颌CIGO牙龈组织中MMP-2、CD147、CyPA蛋白表达情况：有牙侧和无牙侧比较，差别无统计学作用（P0.05）；CsA组MMP-2表达显著低于对照组，差别有统计学作用（P0.01）；两组动物牙龈组织的CD147和CyPA蛋白表达未见显著差别（P0.05）。3. CsA对牙龈组织中MMP-2、CD147、CyPAmRNA表达的影响：与正常对照组相比，CsA组MMP-2、CD147和CyPA的mRNA表达水平均显著降低（P0.05）。结论我们认为，菌斑可能是CIGO的相关因子，但并非始动因子。CsA诱导牙龈增生的可能作用机制是，CsA与CyPA形成CsA-CyPA复合物，竞争性抑制CyPA作为CD147伴侣蛋白和运输蛋白的作用，阻断CD147对MMPs的上调作用，导致胶原降解失衡，胶原纤维在牙龈组织中过度沉积，体现为牙龈组织增生。关键词：环孢素A诱导的牙龈增生论文菌斑论文基质金属蛋白酶-2论文CD147论文亲环素A论文
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Abstract8-10
英文缩写表10-11
前言11-13
第一部分 环孢素 A 诱导牙龈增生动物模型的构建13-17
实验材料13-14
实验动物13
无菌消毒器械13
实验试剂13
主要试验器械13-14
实验策略14
药物配制14
给药策略及活体牙龈形态观察14
实验结果14-17
肉眼观察结果14-16
组织形态学结果16-17
第二部分 CsA 作用下牙龈组织 MMP-

2、CD147、CyPA 的表达17-35

(一)免疫组化17-27

组织取材17
试剂和设备17-18
免疫组织化学检测18-19
免疫组化结果判定策略和标准19
免疫组化统计策略19
结果19-27

(二)RT-PCR27-35

组织取材27
试剂和设备27-29
实验策略29-31
数据浅析31-32
实验结果32-35
讨论35-37
全文小结37-38
参考文献38-42
综述42-49
参考文献46-49
在读期间发表论文和参加科研工作情况49-50
致谢50-51