探究牛源ETEC基因组差异基因筛选与

论文导读：
牛源ETEC基因组差异基因的筛选与论文相关文献崔德凤,张永红;肠毒素型大肠杆菌菌毛的研究进展[J];北京农学院学报;、李有业;新生犊牛腹泻防治措施的进展[J];当代畜牧;、杜向党,阎若潜,沈建忠;氯霉素类药物耐药机制的研究进展[J];动物医学进展;、袁万哲,何孔旺,陆承平,郝勤宗,裘孝良,左玉柱;产肠毒素性大肠杆菌主要毒力因子的研究进展[J];动物医学进展;、王德毅;郭学文;温国富;周玉龙-产肠毒素大肠埃希菌主要黏附素的研究进展[J];动物医学进展;、毛旭虎,邹全明,许霖水;大肠杆菌不耐热肠毒素的分子生物学特性[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;、李玉红,邹全明;氨基糖苷类钝化酶耐药机制的研究进展[J];国外医学.药学分册;、谢志恒;赛金;张开宇;张卉;王士长-猪产肠毒素大肠杆菌_(987)P菌毛卵黄抗体的研究[J];南方农业学报;、胡昌勤-链霉素的免疫学[J];国外医药(抗生素分册);1989年01期、沈依群,赵敏;氨基糖苷类抗生素的耐药机制及制约耐药性的策略[J];国外医药(抗生素分册);【共引文献】 中国期刊全文数据库李永富;钟为章;马金生;蒋立凤-复合酶对沙门氏菌杀灭作用的研究[J];安徽农业科学;、王自良;张海棠;王艳荣;张改平-氯霉工免疫原的合成与鉴定[J];安徽农业科学;、孙辉;曾永三-差减cDNA文库技术在植物抗性研究中的应用[J];安徽农业科学;、谢永平;彭昊;陈泽祥;杨威-广西地区仔猪致病性大肠杆菌的菌毛基因多重PCR检测及质粒DNA指纹图谱分析[J];现代农业科技;、张永红,崔德凤,阮文科,李焕荣,马允英,路苹,于同泉;大肠杆菌热敏感肠毒素的检测与制备[J];北京农学院学报;、姚倩;赵钢;邹亮;胡一冰;苟小军-抗菌药物的研究目前状况及临床应用[J];成都大学学报(自然科学版);、肖仲久;李小霞;张素勤;蒋选利-抑制性消减杂交技术(SSH)在辣椒抗病基因研究中的应用[J];长江蔬菜;、邱素君;吕春华;杨冬梅-产肠毒素性大肠杆菌的研究进展[J];草食家畜;、颜学军;李万峰;梁文静;王湘冀;吴海军-纸片扩散法药敏检测结果的计算机处理[J];长沙医学院学报;、陈兆羽;徐安英;李木旺;赵云坡;周博;孙平江;钱荷英;张月华;李刚;郭锡杰-家蚕黄血近等基因系SSH文库的构建及部分EST的序列分析[J];蚕业科学; 方洁;何乐;何娟;倪语星;杨婉花-大肠埃希菌耐药性与抗菌药物使用情况的相关性分析[A];油桃花芽碳水化合物变化规律及相关基因的表达分析[D];山东农业大学;形成相关WRKY基因的分离与分析[D];中国农业科学院;刊全文数据库宋正新-仔猪腹泻的防治策略[J];安徽农学通报;、王红琳;熊忠良;段正赢;徐涤平;杨峻;艾地云;罗玲;罗青平;张蓉蓉-规模化猪场大肠杆菌多价灭活苗的免疫试验[J];安徽农业科学;、崔德凤,张永红;肠毒素型大肠杆菌菌毛的研究进展[J];北京农学院学报;、邱素君;吕春华;杨冬梅-产肠毒素性大肠杆菌的研究进展[J];草食家畜;、吴敏,陈清,王雅贤;p53蛋白的原核表达及其鸡卵黄抗体的制备[J];第一军医大学学报;、林先耀;杜先智-革兰阳性菌与载体技术研究进展[J];国际检验医学杂志;、赵玉龙;吾莫尔;薄新文;李岩;钟发刚;李娜;库朝锋-抗CP型、NCP型牛病毒性腹泻病毒高免卵黄抗体的制备[J];中国畜牧兽医;、王劼-产肠毒素大肠杆菌菌毛的DNA疫苗研究进展[J];中国畜牧兽医;、黎铭;谢达祥;李咏梅;赵永贞;曾地刚;彭金霞;杨彦豪;韦嫔媛;陈晓汉-VP28蛋白鸡源抗WSSV卵黄抗体的制备及性能分析[J];广西农业科学;、谢志恒;赛金;张开宇;张卉;王士长-猪产肠毒素大肠杆菌_(987)P菌毛卵黄抗体的研究[J];南方农业学报; 中国硕士学位论文全文数据库前1条 程学慧;预防仔猪腹泻外源抗体—卵黄抗体研究[D];华中农业大学;刊全文数据库于泉;新腹泻原性大肠杆菌的致病机理[J];微生物学免疫学进展;1988年02期、李淑琴,张兆山,陈添弥,黄翠芬;肠毒素大肠杆菌定居因子抗原Ⅰ的酶联免疫吸附试验检测法[J];解放军医学杂志;1988年04期、魏燕玲,张意仲,黄上媛,徐国洲,王红旗,刘建刚;单克隆抗体ELISA检测产毒大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)的应用研究[J];中国共患病杂志;1988年05期、成大荣,徐建生,吕玲,曹军,唐波,孙怀昌;F18ac菌毛A亚单位基因的克隆与序列分析[J];中国预防兽医学报;、黄培堂,李丰生,王叙甫,钟声,徐秀英,张群伟,王焕金,陈明,黄翠芬;表达K_(99)和F_(41)双价保护性抗原工程菌株的构建及免疫效果研究[J];中国科学B辑;1993年09期、Tatsuo Yamamoto,袁佩娜;大肠杆菌和霍乱弧菌肠毒素的进化起源[J];微生物学免疫学进展;1988年02期、柳燕;志贺菌减毒疫苗株表达的4型产肠毒素性大肠杆菌菌毛和不耐热肠毒素突变体诱导的免疫应答[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;、;问与答[J];大自然探索;、Kaper J B,陈锦荣;产肠毒素原性E.coli菌苗的研究进展[J];微生物学免疫学进展;1988年04期、李国军;侯喜林-大肠杆菌k_(88)ac菌毛蛋白亚基因的克隆、表达及亲和层析纯化[J];黑龙江八一农垦大学学报; 李丽云;东贤-貉产肠毒素型大肠杆菌的分离鉴定[A];“科技进步推进畜牧业现代化”科技论文集[C];、蒋隽;柳小春;何俊;黄生强;马海明-猪ETEC F4受体微卫星标记筛选[A];第十二次全国畜禽遗传标记研讨会论文集[C];、闻晓波;崔玉东;朴范泽-ETEC致病因子F_(41)、K_(99)菌毛的检测及分析[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立庆典暨第十次学术研讨会论文集（下）[C];、张雪寒;何孔旺;张书霞论文导读：
-ETEC肠毒素基因多重PCR检测策略的建立[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分第12次暨中国动物病理生理学专业委员会第11次学术讨论会论文集[C];、欧阳萍;雷连成;吕爽;韩文瑜-人溶菌酶基因在大肠杆菌中的融合表达及其生物学活性的研究[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集（、王鹏雁;陈创夫;张再超;毛志福;任艳-表达大肠杆菌K88ac-STⅡ的口服沙门氏菌活苗的动物免疫试验[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集[C];、杨海华-肉鸡支原体与大肠杆菌混合感染病例的综合诊治[A];“科技进步推进畜牧业现代化”科技论文集[C];、杨玲丽;陈杖榴-相同耐药谱大肠杆菌的脉冲场电泳分型研究[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];、覃宗华;谢明权;蔡建平;艾哈迈德;彭新宇;魏文康;吴惠贤-毒害艾美耳球虫广东株微线蛋白-2基因在大肠杆菌的表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];、孙伟;潘石;李银丽;宋林峰;张毅;吴世法-大肠杆菌与副流感病毒样品的原子力显微镜成像研究[A];大珩先生九十华诞文集暨中国光学学会学术大会论文集[C];
论文目录
摘要4-6
Abstract6-13
第一章文章综述13-27

1.1前言13

1.2牛大肠杆菌致病性13-18

1.2.1黏附素14-17

1.2.2肠毒素17-18

1.3大肠杆菌对各种抗生素耐药性的研究进展18-23

1.3.1磺胺类19-20

1.3.2氨基糖苷类20-21

1.3.3氯霉素类21-23

1.4抑制性消减杂交（SUPPRESSIONSUBTRACTIVEHYBRIDIZATION，SSH）23-25

1.4.1SSH技术形成的历史背景23

1.4.2SSH的技术原理23-24

1.4.3SSH的优缺点24

1.4.4SSH的应用24-25

1.5本实验的目的、作用25-27

第二章牛源大肠杆菌耐药基因的检测27-39

2.1材料27-28

2.

1.1菌株27

2.

1.2酶和试剂27

2.

1.3仪器设备27-28

2.2大肠杆菌的分离与鉴定28-29

2.1病料的采集28

2.2细菌分离培养28

2.3大肠杆菌的提纯及纯培养28

2.4革兰氏染色镜检28-29

2.3大肠杆菌耐药基因的检测29-32

2.3.1磺胺类耐药基因的检测29-30

2.3.2氨基糖苷类耐药基因的检测30-31

2.3.3氯霉素类耐药基因的检测31-32

2.4结果32-36

2.4.1大肠杆菌的分离及鉴定结果32-33

2.4.2大肠杆菌磺胺类耐药情况检测结果33-34

2.4.3大肠杆菌氨基糖苷类耐药情况检测结果34-35

2.4.4大肠杆菌氯霉素类耐药情况的检测结果35-36

2.5讨论36-39

第三章牛源ETEC强毒株基因组差异基因文库的构建39-55

3.1材料39-41

3.

1.1实验菌株39

3.

1.2实验动物39

3.

1.3实验试剂39

3.

1.4主要仪器设备39-40

3.

1.5引物40-41

3.2策略41-48
3.

2.1SSH实验菌株的选取41

3.

2.2实验菌株基因组的提取41-42

3.

2.3基因组的酶切42-43

3.

2.4Adapter连接43

3.

2.5连接效率检测43-44

3.

2.6第一次杂交44-45

3.

2.7第二次杂交45-46

3.

2.8PCR扩增46-47

3.

2.9消减效率的PCR分析47

3.

2.10连接载体47-48

3.

2.11转化48

3.3结果48-52

3.1致病力实验结果48-49

3.2Tester和Driver组大肠杆菌毒力基因检测结果49

3.3基因组DNA提取和酶切结果49-50

3.4接头连接结果50

3.5第二次PCR结果50-51

3.6消减效率PCR分析结果51

3.7消减基因文库的构建与克隆鉴定结果51-52

3.4讨论52-55

第四章牛源ETEC基因组差异基因分析55-67

4.1材料55-56

4.

1.1菌株55

4.

1.2主要试剂55

4.

1.3主要仪器55

4.

1.4差异基因引物55-56

4.2策略56-59
4.

2.1差异基因的测序56

4.

2.2Southern杂交56-58

4.

2.3差异基因的分析58

4.

2.4差异基因的分布58-59

4.3结果59-64
4.

3.1测序结果59

4.

3.2Southern杂交结果59-60

4.

3.3差异基因同源序列检索结果60-63

4.

3.4差异基因分布检测结果63-64

4.4讨论64-67

4.1关于测序和southern实验64-65

4.2关于序列同源性检索65

4.3关于差异序列分布研究65-67

第五章结论67-68
参考文献68-73
致谢73-74
附录74-81
个人简历81
大肠杆菌耐药基因抑制性消减杂交基因文库
参考文献
程青芳;水相中的Knoevenagel缩合和无溶剂下的Biginelli缩合反应研究[D];南京理工大学;油桃花芽碳水化合物变化规律及相关基因的表达分析[D];山东农业大学;形成相关WRKY基因的分离与分析[D];中国农业科学院;刊全文数据库宋正新-仔猪腹泻的防治策略[J];安徽农学通报;、王红琳;熊忠良;段正赢;徐涤平;杨峻;艾地云;罗玲;罗青平;张蓉蓉-规模化猪场大肠杆菌多价灭活苗的免疫试验[J];安徽农业科学;、崔德凤,张永红;肠毒素型大肠杆菌菌毛的研究进展[J];北京农学院学报;、邱素君;吕春华;杨冬梅-产肠毒素性大肠杆菌的研究进展[J];草食家畜;、吴敏,陈清,王雅贤;p53蛋白的原核表达及其鸡卵黄抗体的制备[J];第一军医大学学报;、林先耀;杜先智-革兰阳性菌与载体技术研究进展[J];国际检验医学杂志;、赵玉龙;吾莫尔;薄新文;李岩;钟发刚;李娜;库朝锋-抗CP型、NCP型牛病毒性腹泻病毒高免卵黄抗体的制备[J];中国畜牧兽医;、王劼-产肠毒素大肠杆菌菌毛的DNA疫苗研究进展[J];论文导读：
中国畜牧兽医;、黎铭;谢达祥;李咏梅;赵永贞;曾地刚;彭金霞;杨彦豪;韦嫔媛;陈晓汉-VP28蛋白鸡源抗WSSV卵黄抗体的制备及性能分析[J];广西农业科学;、谢志恒;赛金;张开宇;张卉;王士长-猪产肠毒素大肠杆菌_(987)P菌毛卵黄抗体的研究[J];南方农业学报; 中国硕士学位论文全文数据库前1条 程学慧;预防仔猪腹泻外源抗体—卵黄抗体研究[D];华中农业大学;刊全文数据库于泉;新腹泻原性大肠杆菌的致病机理[J];微生物学免疫学进展;1988年02期、李淑琴,张兆山,陈添弥,黄翠芬;肠毒素大肠杆菌定居因子抗原Ⅰ的酶联免疫吸附试验检测法[J];解放军医学杂志;1988年04期、魏燕玲,张意仲,黄上媛,徐国洲,王红旗,刘建刚;单克隆抗体ELISA检测产毒大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)的应用研究[J];中国共患病杂志;1988年05期、成大荣,徐建生,吕玲,曹军,唐波,孙怀昌;F18ac菌毛A亚单位基因的克隆与序列分析[J];中国预防兽医学报;、黄培堂,李丰生,王叙甫,钟声,徐秀英,张群伟,王焕金,陈明,黄翠芬;表达K_(99)和F_(41)双价保护性抗原工程菌株的构建及免疫效果研究[J];中国科学B辑;1993年09期、Tatsuo Yamamoto,袁佩娜;大肠杆菌和霍乱弧菌肠毒素的进化起源[J];微生物学免疫学进展;1988年02期、柳燕;志贺菌减毒疫苗株表达的4型产肠毒素性大肠杆菌菌毛和不耐热肠毒素突变体诱导的免疫应答[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;、;问与答[J];大自然探索;、Kaper J B,陈锦荣;产肠毒素原性E.coli菌苗的研究进展[J];微生物学免疫学进展;1988年04期、李国军;侯喜林-大肠杆菌k_(88)ac菌毛蛋白亚基因的克隆、表达及亲和层析纯化[J];黑龙江八一农垦大学学报; 李丽云;东贤-貉产肠毒素型大肠杆菌的分离鉴定[A];“科技进步推进畜牧业现代化”科技论文集[C];、蒋隽;柳小春;何俊;黄生强;马海明-猪ETEC F4受体微卫星标记筛选[A];第十二次全国畜禽遗传标记研讨会论文集[C];、闻晓波;崔玉东;朴范泽-ETEC致病因子F_(41)、K_(99)菌毛的检测及分析[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立庆典暨第十次学术研讨会论文集（下）[C];、张雪寒;何孔旺;张书霞-ETEC肠毒素基因多重PCR检测策略的建立[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分第12次暨中国动物病理生理学专业委员会第11次学术讨论会论文集[C];、欧阳萍;雷连成;吕爽;韩文瑜-人溶菌酶基因在大肠杆菌中的融合表达及其生物学活性的研究[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集（、王鹏雁;陈创夫;张再超;毛志福;任艳-表达大肠杆菌K88ac-STⅡ的口服沙门氏菌活苗的动物免疫试验[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集[C];、杨海华-肉鸡支原体与大肠杆菌混合感染病例的综合诊治[A];“科技进步推进畜牧业现代化”科技论文集[C];、杨玲丽;陈杖榴-相同耐药谱大肠杆菌的脉冲场电泳分型研究[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];、覃宗华;谢明权;蔡建平;艾哈迈德;彭新宇;魏文康;吴惠贤-毒害艾美耳球虫广东株微线蛋白-2基因在大肠杆菌的表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];、孙伟;潘石;李银丽;宋林峰;张毅;吴世法-大肠杆菌与副流感病毒样品的原子力显微镜成像研究[A];大珩先生九十华诞文集暨中国光学学会学术大会论文集[C]; 中国重要报纸全文数据库记者　陈超;大肠杆菌有望制成生物微型马达[N];科技日报;、裴那;Oxoid公司推出快速确认食品中大肠杆菌的策略[N];中国医药报;、;杆菌速灭[N];中国畜牧水产报;、沧州河间市畜牧水产局 程红利;一例肉鸡类巴氏杆菌和大肠杆菌混感的诊治[N];河北农民报;、陈勇;菠菜生菜相继被“毒”,灌溉水是“凶嫌”[N];新华每日电讯;、编译王金元;新型相机用大肠杆菌做底片[N];北京科技报;、记者冯卫东;除菌香皂其实并不除菌[N];科技日报;、继;ProdiGene开始ETEC疫苗的临床试验[N];医药经济报;、陈勇 曲俊雅;美科学家初步绘制出人类基因组差异图[N];中国高新技术产业导报;、冯立中;致泻大肠杆菌是腹泻病祸首[N];健康报; 中国博士学位论文全文数据库姜中其;仔猪断奶腹泻性大肠杆菌的多重耐药性、毒力因子分布及特异性蛋黄抗体药效的研究[D];浙江大学;、王倩;聚羟基脂肪酸酯在大肠杆菌中的合成、降解以及分子改造[D];山东大学;、郑宗宝;一体化生物加工过程进行大肠杆菌的半纤维素琥珀酸生产[D];天津大学;、康振;大肠杆菌系统改造及琥珀酸和5-氨基乙酰丙酸合成途径的构建[D];山东大学;、宋智青;离子束和高压电场诱变大肠杆菌K12的实验研究[D];内蒙古大学;、孙凤军;大肠杆菌生物膜的形成及其耐药质粒传递和调控的研究[D];第三军医大学;、李晓敏;大肠杆菌氧胁迫适应性蛋白质组学、O-抗原研究和嗜热菌NG80-2醛脱氢酶分子生物学研究[D];南开大学;、李丹;尿道致病性大肠杆菌进化机制的研究及检测策略的确立[D];南开大学;、彭亮;聚磷酸盐激酶1在脑膜炎大肠杆菌K1株致病中的相关功能研究[D];南方医科大学;、马毅;多个药物靶标蛋白在大肠杆菌无细胞系统高效表达及功能表征[D];华南理工大学; 中国硕士学位论文全文数据库张洋龙;牛源ETEC基因组差异基因的筛选与分析[D];黑龙江八一农垦大学;、黄黎娟;猪ITGB5基因cDNA克隆及其SNPs与ETEC F4ac黏附表型关联性分析[D];江西农业大学论文导读：pin在大肠杆菌中的克隆与融合表达;西北农林科技大学;、王晓强;血小板反应素1活性cDN段的克隆与表达;四川大学;上一页1234
;、贾宇静;广州市某医院腹泻病人香港海鸥型菌和ETEC的检测及耐药性分析[D];南方医科大学;、张建军;大肠杆菌F18菌毛操纵子fed基因的克隆、表达及其生物活性的初步研究[D];扬州大学;、涂健;抗生素和内毒素诱发鸡肠源性大肠杆菌易位的实验研究[D];安徽农业大学;、王雷;致断奶仔猪腹泻、水肿病大肠杆菌F18菌毛a、b、c因子单克隆抗体的研制及初步应用[D];扬州大学;、许攀峰;头孢他啶对家兔产CTX-M-14型ESBLs细菌性腹膜炎的治疗作用[D];浙江大学;、汪洋;携带IBV基因重组质粒的大肠杆菌发酵及提取工艺研究[D];四川农业大学;、刘变芳;果蝇抗菌肽基因Andropin在大肠杆菌中的克隆与融合表达[D];西北农林科技大学;、王晓强;血小板反应素1活性cDN段的克隆与表达[D];四川大学;