简析产氨基葡萄糖工程菌构建与发酵条件优化

论文导读：丁质酶海洋细菌的筛选及发酵条件的优化;中国新药杂志;【共引文献】中国期刊全文数据库韩丛琴;王兴华-不同微量元素对出芽短梗霉发酵的影响;山东农业科学;、孙玉军,陈彦,王洵,李燕斐;蜜环菌胞外多糖的分离纯化及其性质研究;安徽大学学报(自然科学版);、高贵珍;刘小阳-荧光光谱法研究茜素红S与壳聚糖的结合反应;安徽大学
产氨基葡萄糖工程菌的构建与发酵条件优化论文相关文献前3条陈忻;氨基葡萄糖盐酸盐的防腐抗菌作用研究[J];精细化工;、王中山;向泉桔;王海燕;张义正-大肠杆菌细胞周质底物结合蛋白gsiB基因的克隆及其表达条件的优化[J];遗传;、苏广宇;李从发;高阳;刘四新-产几丁质酶海洋细菌的筛选及发酵条件的优化[J];中国新药杂志;【共引文献】 中国期刊全文数据库韩丛琴;王兴华-不同微量元素对出芽短梗霉发酵的影响[J];山东农业科学;、孙玉军,陈彦,王洵,李燕斐;蜜环菌胞外多糖的分离纯化及其性质研究[J];安徽大学学报(自然科学版);、高贵珍;刘小阳-荧光光谱法研究茜素红S与壳聚糖的结合反应[J];安徽大学学报(自然科学版);、张部昌,赵帜平,袁华玲,陈祖智,毕建军;天门冬糖蛋白的分离纯化及其糖肽键的研究[J];安徽大学学报(自然科学版);1996年04期、张部昌,赵帜平;天门冬糖蛋白AG-b的研究[J];安徽大学学报(自然科学版);1998年02期、鲍明升,魏光;壳聚糖水解策略的研究[J];安徽化工;、柯毅;张涛;邹晶;熊佳;陈珊珊-平菇高产纤维素酶抗降解物阻遏突变株的选育[J];安徽农学通报(上半月刊);、檀华龙;袁明维;伊兴领;王岩岩;马松-高产纤维素酶木霉菌株的筛选[J];安徽农学通报(上半月刊);、陈彦,谢继锋,金先菊,路国伟;海藻多糖的分离纯化和组成分析[J];安徽农业科学;、吴笳笛,阚国仕,陈红漫,李贺民;双酶水解法提取水溶性苦瓜多糖的研究[J];安徽农业科学; 中国博士学位论文全文数据库李蓉;一种新型虫草生物学及其活性物质的研究[D];中国海洋大学;刊全文数据库前7条李艾华,杜予民,李瑾,蔡俊,陈平;聚合度3～6甲壳寡糖的制备与TOF-MS分析[J];分析科学学报;、冯振宁,钟振声,王文铂;用离子色谱法提纯低聚糖的研究[J];广东化工;、王小红,马建标,何炳林;甲壳素、壳聚糖及其衍生物的应用[J];功能高分子学报;1999年02期、杜予民;甲壳素化学与应用的新进展[J];武汉大学学报(自然科学版);、夏文水,刘夏忠,张帆;氨基葡萄糖盐酸盐稳定性及其制备的研究[J];无锡轻工大学学报;1997年04期、夏文水,张帆,何新益;甲壳低聚糖抗菌作用及其在食品保藏中的应用[J];无锡轻工大学学报;1998年04期、曾莹;天然防腐剂的筛选及其抗菌性研究[J];中国调味品;1992年09期【相似文献】 中国期刊全文数据库刘晓,石瑛,白雪芳,杜昱光;甲壳低聚糖的酸水解[J];中国水产科学;、郭振楚,韩亮,胡博,熊兴泉;保护的氨基葡萄糖苷结构测定中的核磁共振光谱研究[J];光谱学与光谱分析;、沈昊宇，乐芝凤，祝心德，张香才，冯长建;D—氨基葡萄糖β—萘酚醛席夫碱及其Cu（Ⅱ）、Zn（Ⅱ）配合物的研究[J];华中师范大学学报(自然科学版);1995年04期、郭振楚,韩亮,胡博,李双牛;氨基葡萄糖及羧氨基葡萄糖与铁(Ⅱ)、锌(Ⅱ)、钴(Ⅱ)、铜(Ⅱ)配合物的光谱特征[J];光谱学与光谱分析;、李溪冰，邵东敏，顾建新;鸭肝N－乙酰氨基葡萄糖结合蛋白的分离纯化[J];生物化学与生物物理学报;1994年06期、张永安,张英锋,赵慧春;稀土-氨基葡萄糖咖啡酸配合物的合成与表征[J];北京师范大学学报(自然科学版);、秦致辉,蔡孟深,李中军;四氯邻苯二甲酰基保护的氨基葡萄基化行为的初步研究[J];厦门大学学报(自然科学版);1999年S1期、陈继涛;刘国柱;陈波-柱前衍生高效液相色谱-质谱法测定血浆中的氨基葡萄糖浓度[J];湖南师范大学自然科学学报;、韩宝芹,刘万顺,崔丽华,贺君,孙明昆;羧壳聚糖中氨基葡萄糖含量测定策略的研究[J];中国海洋大学学报(自然科学版);、于鸿雁,张学习;几丁聚糖衍生物防治骨性关节病概况[J];蛇志; 杜予民-氨基葡萄糖的功能及研究进展[A];《植物化学物及膳食补充剂的研究进展》专家高层论坛会议资料[C];、杨艳;刘万顺;韩宝芹;刘宁-氨基葡萄糖抗炎功能的研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会学术交流会论文摘要汇编[C];、付辰炜;刘万顺;韩宝芹;杨艳;刘冰-氨基葡萄糖对小鼠免疫功能的影响[A];中国老年学学会老年学学术高峰论坛论文集[C];、冷艳霞;孙璐;孙毓庆-LC／MS／MS法测定人血浆中氨基葡萄糖的浓度[A];第十五次全国色谱学术报告会文集（下册）[C];、孟笑;袁静;何冰芳-高产氨基葡萄糖酸菌株的筛选及培养基优化[A];第三届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集（上）[C];、王秀香-氨基葡萄糖治疗骨关节病的疗效观察[A];中华医学会第八次全国老年医学学术会议论文汇编[C];、李明润;高向耘;李明;关俊玲;王英;单淇;廖楠-低分子肝素钙总糖、葡萄糖醇酸、氨基葡萄糖和硫酸根含量分析[A];第八届全国复合糖生物化学与分子生物学学术会议论文摘要论文集[C];、魏长征;韩宝芹;刘万顺;段以祥-D-氨基葡萄糖、壳寡糖及其衍生物对成骨细胞增殖作用的实验研究[A];中国老年学学会老年学学术高峰论坛论文集[C];、方欢;陈舌;徐莺莺;吴超群;申宗候-N乙酰氨基葡萄糖转移酶V表达受阻引起ER stress的机制研究[A];第八届全国复合糖生物化学与分子生物学学术会议论文摘要论文集[C];、刘波;倪金凤;申玉龙-超嗜热古菌Pyrococcus horikoshii B-D外切氨基葡萄糖甘酶的克隆表达与性质研究[A];中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集[C];
论文目录
摘要8-9
ABSTRACT9-10
第1章绪论10-17

1.1氨基葡萄糖的介绍10-12

1.1氨基葡萄糖的性质10

1.2氨基葡萄糖的应用10-11

1.3氨基葡萄糖的生产策略11-12

1.4氨基葡萄糖的检测策略12

1.2产氨基葡萄糖代谢途径的介绍12-13

1.3大肠杆菌表论文导读：

达系统的优势13-15

1.3.1大肠杆菌表达系统的组成13

1.3.2大肠杆菌系统中表达的影响因素13-15

1.4论文选题题的背景及思路15-17

1.4.1论文选题的背景15

1.4.2论文的研究思路15-17

第2章氨基葡萄糖乙酰化酶基因的克隆17-35

2.1引言17

2.2实验材料17-20

2.1实验菌株与质粒17-18

2.2主要仪器18

2.3分子生物学试剂18-19

2.4主要生化试剂19

2.5培养基配制19

2.6主要试剂的配制19-20

2.3实验策略20-27

2.3.1酿酒酵母DNA提取及琼脂糖凝胶电泳检测20-21

2.3.2大肠杆菌质粒DNA提取21-22

2.3.3引物的设计22

2.3.4大肠杆菌感受态细胞的制备22-23

2.3.5氨基葡萄糖乙酰化酶基因的PCR扩增与产物的纯化23-24

2.3.6双酶切质粒与目的基因24-25

2.3.7载体与目的基因的连接25

2.3.8转化25

2.3.9转化子的筛选和鉴定25-26

2.3.10重组质粒双酶切鉴定26

2.3.11重组质粒的序列分析26

2.3.12重组质粒外源蛋白表达分析26-27

2.4结果与讨论27-34

2.4.1酿酒酵母DNA提取和pET24a质粒提取27-28

2.4.2PCR克隆gnaI基因片段28-29

2.4.CR产物纯化29

2.4.4双酶切判断连接比例29-30

2.4.5转化30-31

2.4.6重组质粒的提取和双酶切31

2.4.7重组质粒的序列分析31-34

2.4.8重组质粒表达外源蛋白分析34

2.5本章小结34-35

第3章氨基葡萄糖合酶基因的克隆35-51

3.1引言35

3.2实验材料35-37

3.

2.1实验菌株与质粒35-36

3.

2.2主要实验仪器36

3.

2.3分子生物学试剂36

3.

2.4主要生化试剂36-37

3.

2.5培养基配制37

3.

2.6主要试剂的配制37

3.3实验策略37-41

3.1枯草芽孢杆菌DNA提取及琼脂糖凝胶检测37-38

3.2大肠杆菌pET24a-gnaI质粒DNA提取38

3.3引物设计38

3.4感受态细胞的制备38

3.5氨基葡萄糖合酶基因PCR产物扩增与纯化38-39

3.6双酶切质粒与目的基因39-40

3.7载体与目的基因的连接40

3.8转化40

3.9转化子的筛选和鉴定40-41

3.10重组质粒提取与双酶切鉴定41

3.11重组质粒的序列分析41

3.12重组质粒外源蛋白表达分析41

3.4重组质粒pET24a—gnaI‐GlmS的构建结果检测41-50

3.4.1枯草芽孢杆菌DNA提取和pET24a-gnaI质粒提取41-42

3.4.2PCR克隆Glms基因片段42

3.4.CR产物纯化42-43

3.4.4双酶切回收PCR产物和质粒43-44

3.4.5重组质粒转化44-45

3.4.6重组质粒提取和双酶切45

3.4.7重组质粒的序列分析45-49

3.4.8重组质粒表达外源蛋白分析49-50

3.5本章小结50-51

第4章产氨基葡萄糖基因工程菌发酵条件的研究51-65

4.1引言51

4.2实验材料51-54

4.

2.1主要试剂51

4.

2.2主要仪器51-52

4.

2.3培养基的确定52

4.

2.4试剂配制策略52

4.

2.5氨基葡萄糖和乙酰氨基葡萄糖检测策略52-54

4.3重组菌的发酵54-63
4.

3.1重组菌的培养方式54-55

4.

3.2培养基单因素优化实验55-60

4.

3.3最优条件发酵实验60-61

4.

3.4发酵罐优化发酵培养61-63

4.4本章小结63-65
第5章结论和展望65-66

5.1结论65

5.2展望65-66

参考文献66-71
致谢71-72
在学期间主要科研成果72
氨基葡萄糖氨基葡萄糖合酶氨基葡萄糖乙酰化酶微生物发酵
参考文献
李蓉;一种新型虫草生物学及其活性物质的研究[D];中国海洋大学;刊全文数据库前7条李艾华,杜予民,李瑾,蔡俊,陈平;聚合度3～6甲壳寡糖的制备与TOF-MS分析[J];分析科学学报;、冯振宁,钟振声,王文铂;用离子色谱法提纯低聚糖的研究[J];广东化工;、王小红,马建标,何炳林;甲壳素、壳聚糖及其衍生物的应用[J];功能高分子学报;1999年02期、杜予民;甲壳素化学与应用的新进展[J];武汉大学学报(自然科学版);、夏文水,刘夏忠,张帆;氨基葡萄糖盐酸盐稳定性及其制备的研究[J];无锡轻工大学学报;1997年04期、夏文水,张帆,何新益;甲壳低聚糖抗菌作用及其在食品保藏中的应用[J];无锡轻工大学学报;1998年04期、曾莹;天然防腐剂的筛选及其抗菌性研究[J];中国调味品;1992年09期【相似文献】 中国期刊全文数据库刘晓,石瑛,白雪芳,杜昱光;甲壳低聚糖的酸水解[J];中国水产科学;、郭振楚,韩亮,胡博,熊兴泉;保护的氨基葡萄糖苷结构测定中的核磁共振光谱研究[J];光谱学与光谱分析;、沈昊宇，乐芝凤，祝心德，张香才，冯长建;D—氨基葡萄糖β—萘酚醛席夫碱及其Cu（Ⅱ）、Zn（Ⅱ）配合物的研究[J];华中师范大学学报(自然科学版);1995年04期、郭振楚,韩亮,胡博,李双牛;氨基葡萄糖及羧氨基葡萄糖与铁(Ⅱ)、锌(Ⅱ)、钴(Ⅱ)、铜(Ⅱ)配合物的光谱特征[J];光谱学与光谱分析;、李溪冰，邵东敏，顾建新;鸭肝N－乙酰氨基葡萄糖结合蛋白的分离纯化[J];生物化学与生物物理学报;1994年06期、张永安,张英锋,赵慧春;稀土-氨基葡萄糖咖啡酸配合物的合成与表征[J];北京师范大学学报(自然科学版);、秦致辉,蔡孟深,李中军;四氯邻苯二甲酰基保护的氨基葡萄基化行为的初步研究[J];厦门大学学报(自然科学版);1999年S1期、陈继涛;刘国柱;陈波-柱前衍生高效液相色谱-质谱法测定血浆中的氨基葡萄糖浓度[J];湖南师范大学自然科学学报;、韩宝芹,刘万顺,崔丽华,贺君,孙明昆;羧壳聚糖中氨基葡萄糖含量测定策略的研究[J];中国海洋大学学报(自然科学版);论文导读：（大连化学物理研究所）;、刘振东;眼镜蛇毒因子寡糖片段及其类似物的合成研究;北京医科大学;1999年、于长江;磁纳米粒的表面改性及其生物医学应用研究;中国协和医科大学;中国硕士学位论文全文数据库梁芳;氨基葡萄糖的发酵中试放大和提取工艺研究;江南大学;、但晓梦;氨基葡萄糖类药物质量制约的研究;华中科技大学;、刘
、于鸿雁,张学习;几丁聚糖衍生物防治骨性关节病概况[J];蛇志; 杜予民-氨基葡萄糖的功能及研究进展[A];《植物化学物及膳食补充剂的研究进展》专家高层论坛会议资料[C];膝骨性关节炎的临床研究[D];广州中医药大学;、王昕;非甾体抗炎药联合氨基葡萄糖及关节镜手术治疗膝骨性关节炎的临床研究[D];兰州大学;、张莉;壳寡糖、氨基葡萄糖及其衍生物的制备和抗肿瘤活性研究[D];中国海洋大学;、滕大勇;氨基糖类衍生物智能水凝胶作为药物载体的研究[D];南开大学;、杨艳;壳寡糖，氨基葡萄糖及其衍生物的抗氧化功能研究[D];中国海洋大学;、江倩;新型两亲性甾族衍生物的合成及其自组装行为的研究[D];中国协和医科大学;、孙建松;几种具有生物活性糖缀合物的全合成[D];中国科学院研究生院（大连化学物理研究所）;、刘振东;眼镜蛇毒因子寡糖片段及其类似物的合成研究[D];北京医科大学;1999年、于长江;磁纳米粒的表面改性及其生物医学应用研究[D];中国协和医科大学; 中国硕士学位论文全文数据库梁芳;氨基葡萄糖的发酵中试放大和提取工艺研究[D];江南大学;、但晓梦;氨基葡萄糖类药物质量制约的研究[D];华中科技大学;、刘佃磊;产氨基葡萄糖工程菌的构建与发酵条件优化[D];齐鲁工业大学;、郭静;N-（O，O-二烷基磷酰基）-D-氨基葡萄糖的合成、表征以及相关量化研究[D];郑州大学;、肖静静;氨基葡萄糖的氧化研究[D];江南大学;、黄紫洋;甲壳素及其衍生物的制备与性质的研究[D];福建师范大学;、刘俊朋;氨基葡萄糖拟肽类衍生物的合成[D];国家海洋局第三海洋研究所;、黄颂燕;玻璃酸钠与氨基葡萄糖联合应用治疗膝关节骨性关节炎比较研究[D];吉林大学;、邵华;血浆中氨基葡萄糖、氯苯那敏和咖啡因的LC-MS/MS分析策略研究及应用[D];沈阳药科大学;、付辰炜;氨基葡萄糖及壳寡糖对小鼠免疫功能的影响[D];中国海洋大学;