试述帕金森病虾青素通过HO-1/NOX2途径抑制MPP~+诱导PC12细胞氧化损伤

论文导读：同浓度MPP~+、ATX、Hemin、SnPPIX、DPI培养PC12细胞24h后的细胞活力变化。2、流式细胞仪分析技术检测PC12细胞胞内ROS水平。3、免疫印迹法和Real-timeRCR分别半定量PC12细胞内NOX2、Nrf2、HO-1蛋白从及NOX2、HO-1mRNA的表达。4、细胞免疫荧光技术检测NOX2、HO-1蛋白在PC12细胞内的亚细胞定位和表达状况。【结果】

1、MTT法测

摘要：【背景】帕金森病是一种中老年人常见的神经退行性疾病，而氧化应激在PD发病历程中发挥着至关重要意义。近年来发现虾青素是一种类胡萝卜素，可通过血脑屏障，具有很强的清除自由基、抗氧化损伤、抗凋亡等生物学意义。HO-1/NOX2细胞信号途径在MPP~+诱导的PC12细胞氧化应激损伤中意义机制未见报道，虾青素是否通过HO-1/NOX2途径拮抗MPP~+诱导的PC12细胞氧化应激损伤也未见报道。【目的】1、研究氯化血红素对MPP~+诱导的PC12细胞模型的保护机制极为与HO-1/NOX2途径之间的联系。2、研究虾青素对MPP~+诱导的PC12细胞模型的保护意义极为分子机制。【办法】1、MTT法检测细胞活力，观察不同浓度MPP~+、ATX、Hemin、SnPPIX、DPI培养PC12细胞24h后的细胞活力变化。2、流式细胞仪分析技术检测PC12细胞胞内ROS水平。3、免疫印迹法和Real-time RCR分别半定量PC12细胞内NOX2、Nrf2、HO-1蛋白从及NOX2、HO-1mRNA的表达。4、细胞免疫荧光技术检测NOX2、HO-1蛋白在PC12细胞内的亚细胞定位和表达状况。【结果】1、MTT法测定发现MPP~+处理细胞生存率显著下降，ATX、SnPPIX、Hemin处理后细胞生存率与空白对照组对比无显著变化。2、ROS检测显示虾青素能抑制MPP~+诱导PC12细胞ROS的产生，且呈浓度依赖性。3、免疫印迹法结果显示，MPP~+处理细胞后NOX2、HO-1、Nrf2升高(P＜0.05)；经氯化血红素和虾青素预处理后，细胞内NOX2蛋白表达水平下降，而Nrf2和HO-1蛋白水平升高。4、Real-time RCR结果显示，MPP~+处理细胞后NOX2、HO-1mRNA升高(P＜0.05)；经氯化血红素和虾青素预处理后，细胞内NOX2mRNA表达水平下降，而HO-1mRNA水平升高。5、共聚焦显微镜观察结果显示，MPP~+显著增多NOX2和HO-1表达，其荧光范围伸长扩大，而该结果被DPI抑制。经氯化血红素和虾青素预处理后，细胞内NOX2蛋白荧光强度减弱，而HO-1蛋白荧光强度增强。【结论】1、氯化血红素诱导HO-1表达水平上调和抑制NOX2表达，即HO-1过表达可抑制NOX2依赖的ROS产生，从减少MPP~+诱导的氧化应激损伤。2、虾青素可通过活化HO-1/NOX2途径，抑制ROS产生，而使PC12细胞免受MPP~+介导的氧化损伤。关键词：MPP~+论文NOX2论文HO-1论文帕金森病论文虾青素论文
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中文摘要5-7
英文摘要7-9
引言9-12
材料与办法12-26
结果26-36
讨论36-39
结论39-40
参考文献40-43
致谢43-44
综述44-53
参考文献51-53