研究脱羧酶大豆中γ-氨基丁酸富集及提取

论文导读：然后，从GABA得率为指标，研究了GABA的提取条件，对得到的GABA粗提取液使用超滤的办法进行了初步纯化。得到从下结论：（1）从GABA含量为指标，进行单因素试验，确定了大豆发芽富集GABA历程中，浸泡温度、浸泡时间、发芽温度、发芽时间等条件。（2）在单因素试验的基础上，从浸泡温度、浸泡时间、发芽温度、发芽时间为因素，GABA含量为指标
摘要：植物富集是合成γ-氨基丁酸（GABA）最主要的办法之一，也是探讨对比普遍的办法。使用外界环境的刺激或者几点温和的处理办法让植物中的GABA大量积累，这样得到的GABA具有很高的安全性，可从广泛的运用到食品、药品、饲料等各个领域。本探讨从优质大豆为原料，对浸泡、发芽、冷冻等富集GABA的不同办法进行对比，研究最佳工艺条件，并使用响应面法进行优化，找到了一种操作简便、GABA富集量较大的办法。同时，探讨了大豆发芽历程中与富集GABA有关的酶——谷氨酸脱羧酶（GAD）活性的变化状况。然后，从GABA得率为指标，研究了GABA的提取条件，对得到的GABA粗提取液使用超滤的办法进行了初步纯化。得到从下结论：（1）从GABA含量为指标，进行单因素试验，确定了大豆发芽富集GABA历程中，浸泡温度、浸泡时间、发芽温度、发芽时间等条件。（2）在单因素试验的基础上，从浸泡温度、浸泡时间、发芽温度、发芽时间为因素，GABA含量为指标，使用响应面分析法优化大豆发芽的工艺条件。结果表明，最优工艺条件为浸泡温度34.96℃、浸泡时间4.79h、发芽温度27.77℃、发芽时间2.48d。此时，大豆中GABA的含量可达到6.3126mg/g。（3）考察了发芽历程中，不同培养条件下谷氨酸脱羧酶的活性变化状况，结果表明：浸泡温度35℃、浸泡时间4h、发芽温度27℃、发芽时间2.5d时，谷氨酸脱羧酶的活性最强。（4）从GABA含量为指标，进行单因素试验，确定了大豆冷冻富集GABA历程中，冷冻温度、冷冻时间、解冻温度、解冻时间等条件。（5）在单因素试验的基础上，从冷冻温度、冷冻时间、解冻温度、解冻时间为因素，GABA含量为指标，使用响应面分析法优化大豆冷冻的工艺条件。结果表明，最优工艺条件为冷冻温度-33.04℃、冷冻时间19.08h、解冻温度33.02℃、解冻时间19.70h。此时，大豆中GABA的含量可达到11.67mg/g。（6）从GABA提取率为指标，进行单因素试验，在0.01mol/L的柠檬酸盐缓冲液（pH5.0）、0.01mol/L的柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）、蒸馏水、60%乙醇和0.01mol/L的磷酸盐缓冲液（pH7.5）五种溶液为GABA提取液的提取历程中，确定各种提取液的最佳料液比、提取时间、提取温度。最后得到结论：从蒸馏水为提取液，料液比为1:11、提取温度为65℃、提取时间为2h时，GABA提取率最高。（7）从膜通量和GABA质量浓度为指标，用超滤法对得到的GABA粗提取液进行了初步的提纯。结果显示，操作温度为30℃，操作压差为0.20Mpa的条件下，GABA的含量有了进一步的提升。关键词：大豆论文GABA论文富集论文谷氨酸脱羧酶论文提取率论文
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Abstract21-25
1 前言25-52

1.1 γ-氨基丁酸概述25-29

1.1 γ-氨基丁酸的理化性质25

1.2 生物体内γ-氨基丁酸的分布25-26

1.3 GABA 合成的主要办法与原理26-27

1.4 GABA 的生理功能27

1.5 GABA 的提取办法27-28

1.6 GABA 的检测办法28-29

1.2 大豆发芽历程中主要组分的变化29-33

1.2.1 蛋白质29-30

1.2.2 碳水化合物30

1.2.3 脂肪30-31

1.2.4 大豆异黄酮31

1.2.5 植酸31

1.2.6 胰蛋白酶抑制剂31-32

1.2.7 硒32

1.2.8 GABA32-33

1.3 大豆冷冻历程中结构和组分的变化33

1.3.1 大豆结构的变化33

1.3.2 大豆中 GABA 的变化33

1.4 谷氨酸脱羧酶概述33-38

1.4.1 植物谷氨酸脱羧酶34-35

1.4.2 细菌谷氨酸脱羧酶35-37

1.4.3 动物谷氨酸脱羧酶37

1.4.4 昆虫谷氨酸脱羧酶37-38

1.5 GABA 富集办法的探讨近况38-45

1.5.1 国外探讨近况38-42

1.5.2 国内探讨近况42-45

1.6 植物中 GABA 的代谢45-49

1.6.1 GABA 支路45-48

1.6.2 多胺论文导读：发芽富集GABA工艺最优条件的确立693.2.5验证试验69-703.3大豆发芽条件对谷氨酸脱羧酶活性的影响70-723.3.1浸泡时间对谷氨酸脱羧酶活性的影响703.3.2浸泡温度对谷氨酸脱羧酶活性的影响70-713.3.3发芽时间对谷氨酸脱羧酶活性的影响71-723.3.4发芽温度对谷氨酸脱羧酶活性的影响723.4大豆冷冻富集GABA72-753.4.1冷冻
氧化降解途径48

1.6.3 富集 GABA 的原理48-49

1.7 本课题的探讨目的与作用49-50

1.8 试验的主要内容50-52

2 材料与办法52-59

2.1 试验材料及设备52-53

2.

1.1 试验原料52

2.

1.2 试验试剂52

2.

1.3 主要设备52-53

2.2 试验办法53-59

2.1 浸泡条件对 GABA 含量的影响53-54

2.2 发芽条件对 GABA 含量的影响54-55

2.3 冷冻条件对 GABA 含量的影响55-56

2.4 GABA 含量的测定56

2.5 大豆发芽条件对谷氨酸脱羧酶活性的影响56-57

2.6 浸提条件对 GABA 提取率的影响57

2.7 超滤条件对超滤通量及 GABA 质量浓度的影响57-58

2.8 统计分析58-59

3 结果与分析59-85

3.1 大豆发芽富集 GABA59-65

3.

1.1 浸泡条件对吸水率的影响59-60

3.

1.2 发芽条件对发芽率的影响60-61

3.

1.3 溶液浸泡对富集 GABA 含量的影响61-63

3.

1.4 发芽条件对 GABA 含量的影响63-65

3.2 大豆发芽工艺条件的优化65-70
3.

2.1 响应面优化试验65-66

3.

2.2 二次多项式回归模型的建立66-68

3.

2.3 交互意义分析68-69

3.

2.4 大豆发芽富集 GABA 工艺最优条件的确立69

3.

2.5 验证试验69-70

3.3 大豆发芽条件对谷氨酸脱羧酶活性的影响70-72

3.1 浸泡时间对谷氨酸脱羧酶活性的影响70

3.2 浸泡温度对谷氨酸脱羧酶活性的影响70-71

3.3 发芽时间对谷氨酸脱羧酶活性的影响71-72

3.4 发芽温度对谷氨酸脱羧酶活性的影响72

3.4 大豆冷冻富集 GABA72-75

3.4.1 冷冻温度对 GABA 含量的影响72-73

3.4.2 冷冻时间对 GABA 含量的影响73-74

3.4.3 解冻温度对 GABA 含量的影响74

3.4.4 解冻时间对 GABA 含量的影响74-75

3.5 大豆冷冻工艺条件的优化75-80

3.5.1 响应面优化试验75-76

3.5.2 二次多项式回归模型的建立76-77

3.5.3 交互意义分析77-79

3.5.4 大豆冷冻富集 GABA 工艺最优条件的确立79-80

3.5.5 验证试验80

3.6 大豆发芽和冷冻富集 GABA 办法的对比80

3.7 浸提条件对 GABA 提取率的影响80-82

3.7.1 料液比对 GABA 提取率的影响80-81

3.7.2 浸提时间对 GABA 提取率的影响81-82

3.7.3 浸提温度对 GABA 提取率的影响82

3.8 超滤条件对超滤通量及 GABA 质量浓度的影响82-85

3.8.1 操作温度对超滤通量和 GABA 质量浓度的影响82-83

3.8.2 操作压差对超滤通量和 GABA 质量浓度的影响83-85

4 讨论85-89

4.1 大豆中 GABA 富集办法的选择85-87

4.

1.1 大豆发芽工艺条件的选择85-86

4.

1.2 大豆冷冻工艺条件的选择86-87

4.2 发芽条件对谷氨酸脱羧酶活性的影响87-88

4.3 GABA 提取办法的选择88-89

5 结论89-91
致谢91-92
参考文献92-109
攻读学位期间发表的学术论文109