分析多肽挤压玉米蛋酶法生物活性肽制备及特性

论文导读：
摘要：试验从玉米蛋为原料，采取挤压膨化手段进行处理，从2709碱性蛋白酶解后肽得率为指标，探讨了挤压机机筒温度、螺杆转速、模具型号、物料水分含量对挤压效果的影响，采取响应面试验优化确定玉米蛋的最佳挤压工艺：机筒温度为82℃，螺杆转速为176r/min，模孔孔径为8mm，物料水分为25.4%。此条件下，玉米肽得率为79.48%。通过扫描电镜观察，玉米蛋白原料微观结构的大小及形状无规则性，表面凹凸不平，呈非常紧密的状态；挤压后的玉米蛋白紧密的结构被打开，表面凹凸加剧，比表面积增多，并可从观察到孔洞结构，利于酶解。通过SDS-PAGE电泳，发现挤压前后玉米蛋白的分子量变化不显著。通过观察近红外图谱发现挤压前后玉米醇溶蛋白、碱溶蛋白、盐溶蛋白、水溶蛋白基团的变化。从2709碱性蛋白酶水解挤压后的玉米蛋，从酶解温度、酶解时间、酶添加量、pH值为考察因素，从水解度（DH）和总抗氧化能力为指标，进行单因素和四因素三水平正交试验。探讨表明，最佳酶解条件为PH=10，酶添加量13%，酶解温度55℃，酶解时间4h。在此条件下，得到水解度达到31.95%，总抗氧化能力为1.15单位/毫克蛋白的玉米蛋白肽。对玉米蛋白酶解液采取DA201-C大孔吸附树脂脱盐，工艺条件：将pH值为8、肽浓度为30mg/ml玉米蛋白水解液从2BV/h流速上样，75%乙醇为解吸剂从2BV/h流速对吸附饱和树脂洗脱。此条件下，脱盐率达90.10%，氮回收率达79.67%，脱盐效果良好。对脱盐后冻干得到的玉米肽溶解性、粘度、起泡性和起泡稳定性、氨基酸组成进行测定。采取超滤离心办法纯化玉米肽，得到抗氧化性相对高的组分（MW3KDa）。使用SephadexG-25凝胶层析确定该组分的分子量分布，并对该组分玉米肽的羟自由基（·OH）清除能力、超氧阴离子自由基(O2-·)清除能力、二苯代苦味酰基自由基(DPPH)清除能力、脂质过氧化抑制能力、铁离子还原能力几方面的抗氧化能力进行探讨。关键词：玉米蛋白论文挤压论文酶解论文多肽论文抗氧化论文
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Abstract9-11
1 引言11-22

1.1 玉米蛋概述11-13

1.1 玉米蛋的组成11

1.2 玉米蛋的加工运用11-13

1.2 挤压膨化办法的运用概况13-15

1.2.1 挤压机在食品中的运用13-14

1.2.2 挤压历程中蛋白质的变化14-15

1.3 自由基与抗氧化肽15-18

1.3.1 自由基的产生及性质15

1.3.2 肽的抗氧化活性15-16

1.3.3 抗氧化肽的制备16-17

1.3.4 抗氧化肽活性的测定指标17-18

1.4 国内外抗氧化肽探讨近况18-20

1.4.1 国外抗氧化肽的探讨发展18-19

1.4.2 国内抗氧化肽的探讨发展19

1.4.3 玉米抗氧化肽的开发及运用前景19-20

1.5 立题作用与探讨内容20-22

1.5.1 立题作用20

1.5.2 探讨内容20-22

2 材料与办法22-32

2.1 原料与设备22-23

2.

1.1 原料22

2.

1.2 实验仪器22

2.

1.3 化学试剂22-23

2.2 实验办法23-32

2.1 玉米蛋基本成分测定23

2.2 酶活力测定23-24

2.3 水解度（DH）测定24

2.4 玉米蛋白酶解物总抗氧化能力试验24

2.5 玉米蛋的挤压膨化24-26

2.6 酶解条件的确定26-27

2.7 大孔吸附树脂对玉米肽的纯化27-28

2.8 玉米肽理化性质测定28

2.9 抗氧化能力试验28-30

2.10 分子量分布的测定30-32

3 结果与分析32-59

3.1 玉米蛋常规指标的测定32

3.2 酶活力测定32

3.3 玉米蛋的挤压膨化32-43

3.1 单因素的试验32-35

3.2 挤压工艺参数的响应曲面优化试验35-40

3.3 扫描电镜分析40-41

3.4 电泳检测41

3.5 红外光谱分析41-43

3.4 酶解条件的确定43-48

3.4.1 单因素的试验43-46

3.4.2 酶解工艺参数的优化4论文导读：味酰基自由基(DPPH)自由基清除能力55-563.7.4脂质过氧化抑制能力563.7.5铁离子还原能力56-573.8玉米多肽的分子量57-594讨论59-615结论61-62致谢62-63参考文献63-69攻读学位期间发表的学术论文69上一页12
6-48

3.5 大孔吸附树脂对玉米肽的纯化48-49

3.5.1 大孔吸附树脂对玉米肽的吸附和解吸48

3.5.2 脱盐效果分析48-49

3.6 肽理化性质49-52

3.6.1 溶解性49

3.6.2 粘度49-50

3.6.3 起泡性及起泡稳定性50-51

3.6.4 氨基酸组成分析51-52

3.7 玉米多肽的抗氧化试验52-57

3.7.1 羟自由基(HO·) 清除能力53-54

3.7.2 超氧阴离子自由基(O2-·)清除能力54-55

3.7.3 二苯代苦味酰基自由基(DPPH)自由基清除能力55-56

3.7.4 脂质过氧化抑制能力56

3.7.5 铁离子还原能力56-57

3.8 玉米多肽的分子量57-59

4 讨论59-61
5 结论61-62
致谢62-63
参考文献63-69
攻读学位期间发表的学术论文69