浅论细胞姜黄素对宫颈癌Hela细胞株放疗增敏作用及其机制

论文导读：
摘要：目的：探讨姜黄素对宫颈癌Hela细胞株的细胞毒性意义极为放疗增敏意义，并研究其可能的增敏机制，为姜黄素能够作为宫颈癌的放疗增敏剂运用于临床提供论述依据。办法：（1）从人宫颈癌Hela细胞为探讨对象。四唑盐（MTT）比色实验检测姜黄素和放射线单独意义从及放射线与姜黄素联合运用时对Hela细胞增殖的抑制意义,确定射线最佳工作剂量从及姜黄素最佳工作浓度。（2）克隆形成实验观察姜黄素对人宫颈癌Hela细胞的放疗增敏意义，在倒置显微镜下计数含50个细胞从上的集落数，计算出细胞生存分数（），对比射线单独意义与射线和姜黄素联合意义后细胞的增殖能力。（3）流式细胞法检测姜黄素和放射线单独意义从及放射线与姜黄素联合运用后宫颈癌Hela细胞的周期分布及凋亡状况，结果用Multicycle软件进行分析。（4）Western-blot法检测姜黄素和放射线单独意义从及放射线与姜黄素联合运用后宫颈癌Hela细胞中P53、P21、Bax、Bcl-2蛋白的表达状况。结果：（1）不同浓度的姜黄素对人宫颈癌Hela细胞的均有生长抑制意义，并呈时间和浓度依赖性；在射线剂量为12Gy从内时，射线对Hela细胞的生长抑制意义呈现出一定的量效和时效联系，当辐射剂量大于12Gy时，细胞增殖抑制率不再随射线剂量的加大和意义时间的延长而增多；不同浓度姜黄素和12Gy照射剂量共同意义时，姜黄素浓度为3.125-25μmol／L时对Hela细胞的毒性显示出显著的浓度依赖性，25μmol／L从上浓度的姜黄素对宫颈癌Hela细胞毒性未见显著增多。通过上面陈述的结果确定随后进行的增敏实验所选取的射线最佳工作剂量为4GY，姜黄素最佳工作浓度为25μmoL／L。（2）不同剂量的射线单独意义与姜黄素和不同剂量的射线联合意义，均可抑制人宫颈癌Hela细胞集落形成，并且联合运用比射线单独意义抑制更加明显，因此，姜黄素对人宫颈癌Hela细胞具有放疗增敏意义。（3）与空白组对比，姜黄素与放射性均能使细胞周期阻滞于放射敏感时相G2/M期，诱导细胞凋亡（p﹤0.05），放射性与姜黄素联合意义比单独意义阻滞及诱导凋亡效果更加明显（p﹤0.01，p=0.000）。（4）Western blot法检测各处理组P53、P21、Bax、Bcl-2蛋白表达状况，结果表明姜黄素与放射性均能升高P53、P21、Bax蛋白的表达，降低Bcl-2蛋白的表达（p0.05），放射线与姜黄素联合意义比单独意义变化更加明显（p0.01）。结论：（1）姜黄素及X射线均对人宫颈癌Hela细胞具有细胞毒性意义。（2）姜黄素对人宫颈癌Hela细胞具有放疗增敏意义。（3）姜黄素对人宫颈癌Hela细胞的放疗增敏意义可能与阻滞细胞周期于G2/M期、诱导细胞凋亡、上调p53、p21蛋白及下调Bcl-2/Bax比例有关。关键词：姜黄素论文Hela细胞论文放疗增敏论文细胞周期论文细胞凋亡论文
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中文摘要5-7
Abstract7-10
英文词汇缩略词列表10-11
前言11-16
1 材料16-19

1.1 实验细胞16

1.2 实验试剂16

1.3 主要仪器16-17

1.4 主要试剂的配制17-19

2 办法19-25

2.1 宫颈癌Hela细胞的培养19

2.2 宫颈癌Hela细胞的照射条件19

2.3 宫颈癌Hela细胞的计数19-20

2.4 MTT 法检测姜黄素与射线对宫颈癌Hela细胞的细胞毒性及意义特征20-22

2.4.1 放射线对宫颈癌Hela细胞增殖的影响20

2.4.2 姜黄素对宫颈癌Hela细胞的细胞毒性20-21

2.4.3 MTT法测定姜黄素的辐射敏感性21-22

2.5 克隆形成实验观察姜黄素对Hela细胞的放疗增敏意义22-23

2.6 流式细胞法检测姜黄素对Hela细胞周期及细胞凋亡的影响23

2.7 WESTERN BLOT法检测P53、P2

1、BAX、BCL-2 蛋白含量23-25

2.

7.1 蛋白的提取23-24

2.7.2 BCA 法测定蛋白含量24

2.7.3 WESTERN BLOT法检测P53、P21、BAX、BCL-2蛋论文导读：姜黄素对Hela细胞增殖的影响26-273.1.3姜黄素对Hela细胞的放射增敏意义273.2克隆形成实验观察姜黄素对Hela细胞的放射增敏性27-283.3细胞周期分析及凋亡检测283.4WESTERNBLOT法检测P53、P21、BAX、BCL-2蛋白含量28-293.4.1P53、P21、BAX蛋白含量变化28-293.4.2BCL-2蛋白含量变化29讨论29-34结论34-35参考文献35-40
白含量24-25

2.8 统计学办法25

3 结果25-29

3.1 MTT法测定姜黄素对Hela细胞的放射增敏性25-27

3.

1.1 Hela细胞对射线照射的敏感性25-26

3.

1.2 姜黄素对Hela细胞增殖的影响26-27

3.

1.3 姜黄素对Hela细胞的放射增敏意义27

3.2 克隆形成实验观察姜黄素对Hela细胞的放射增敏性27-28

3.3 细胞周期分析及凋亡检测28

3.4 WESTERN BLOT法检测 P53、P2

1、BAX、BCL-2 蛋白含量28-29

3.4.1 P53、P2

1、BAX蛋白含量变化28-29

3.4.2 BCL-2 蛋白含量变化29
讨论29-34
结论34-35
参考文献35-40
附图40-42
附录42-50
致谢50