浅谈核糖体我国动物源金葡萄球菌耐药性和分型

论文导读：
摘要：金葡萄球菌是革兰氏阳球菌,它广泛分布于自然界中,能感染人和动物,是一种重要的共患病原菌；其产生的肠毒素可污染食物而致人食物中毒,严重威胁人类的食品安全和公共卫生。近年来,耐药菌株(尤其是甲氧西林耐药金葡萄球菌,即MRSA)的增加给临床治疗带来很大困难。探讨我国动物源金葡萄球菌的耐药性近况及通过表型分型和基因分型了解菌株的分布情况,辨别我国的流行菌株和非流行菌株,同时比较各地区金葡萄球菌菌株之间的相关性,对于兽医临床及公共卫生都有重要作用。本探讨以2008年至2010年，收集并分离到我国不同地区的不同动物源(主要是猪源和牛源)金葡萄球菌共124株。分离鉴定历程采取科马嘉显色培养基对样本进行初筛,并用梅里埃API拭条和凝固酶试验确证,同时利用PCR策略扩增nuc gene进一步以基因水平鉴定,分离率达到16%。选用13种抗生素,采取微量肉汤稀释法对分离到的菌株进行耐药性浅析。结果显示,MRSA检出率为27%,主要分布在猪源菌株；受试菌株对氨苄西林、青霉素和红霉素的耐药率最高,分别为97%、86%和75%,对其余抗生素的耐药率在50%-0%之间,未发现万古霉素耐药菌株。选择头孢西丁耐药菌株,对其进行甲氧西林耐药基因mecA的扩增,结果表明mecA基因的携带与头孢西丁耐药表型的完全相符。用商品化的凝固酶分型血清对分离菌株进行凝固酶分型探讨。分型结果显示,实验室分离株的优势血清型为凝固酶Ⅶ型,Ⅵ型和复合型,没有Ⅲ型和Ⅴ型,分型率达到91%牛源菌株和猪源菌株的流行血清型有着较大差别。我国动物源金葡萄球菌凝固酶血清型别多样,分布相对集中,具有独特的流行特点。结合凝固酶表型分型,扩增凝固酶基因,对基因序列进行比对浅析,共扩增出400-1，000bp大小不同的凝固酶基因片段,共6种,构建了36株菌株凝固酶基因的系统进化树。进化树体现了凝固酶基因的多样性,基于该基因的分型策略的分辨力比表型分型高。采取核糖体基因分型(ribotyping)和多位点序列分型(MLST)两种基因分型策略对本试验中不同血清型及不同耐药谱的金葡萄球菌分离株进行了基因分型探讨。核糖体分型结果显示,牛源菌株和猪源菌株在聚类图谱上有着不同的进化方向;不同凝固酶型的菌株在各种杜邦型别之间均有分布,同一凝固酶血清型的菌株基因相似度以50%至100%不等；同一地区(养殖场)的分离株基因相似度较高。MLST分型结果表明,ST9为我国动物源金葡萄球菌的优势序列型,MRSA分离株均为ST9型,MSSA菌株中出现ST9、ST398、 ST97等9种ST型。关键词：金葡萄球菌论文耐药性论文凝固酶分型论文核糖体基因分型论文多位点序列分型论文
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Abstract4-6
目录6-8
符号说明8-9
文献综述9-22
1 金葡萄球菌介绍9-10
2 金葡萄球菌耐药性探讨进展10-14

2.1 金葡萄球菌耐药性探讨策略11-12

2.2 金葡萄球菌的耐药情况12-13

2.3 金葡萄球菌的耐药机制13-14

3 金葡萄球菌流行病学分型策略探讨进展14-18

3.1 表型分型15

3.2 基因分型15-18

3.

2.1 RT分型15-16

3.

2.2 MLST分型16

3.

2.3 PFGE分型16

3.

2.4 质粒及质粒酶切图谱浅析(PPA)16-17

3.

2.5 RAPD分型17

3.

2.6 spa分型17

3.

2.7 SCCmec分型17-18

4 选题依据和作用18
参考文献18-22
第一章 金葡萄球菌分离鉴定策略的建立22-27
摘要22
1 引言22
2 材料和策略22-24

2.1 材料22-24

2.2 策略24

3 结果与浅析24-26
4 讨论26
参考文献26-27
第二章 金葡萄球菌的耐药性及甲氧西林耐药基因(mecA)的检测27-36
摘要27
1 引言27-28
2 材料与策略28-29

2.1 材料28

2.2 策略28-29

3 结果29-32

3.1 耐药率29-30

3.2 多重耐药率30-31

3.3 耐药基因检测结果31-32

4 讨论32-34
4.1论文导读：体分型和多位点序列分型探讨43-55摘要431引言43-442材料与策略44-462.1材料442.2策略44-463结果与浅析46-513.1核糖体基因分型46-493.2MLST分型结果49-514讨论51-524.1核糖体分型514.2MLST分型51-52参考文献52-55全文结论55-56致谢56-57上一页12
金葡萄球菌的耐药近况32-33

4.2 甲氧西林耐药会葡萄球菌(MRSA)的耐药机制和检测策略33-34

参考文献34-36
第三章 金葡萄球菌凝固酶分型及凝固酶基因的序列浅析36-43
摘要36
1 引言36
2 材料与策略36-37

2.1 材料36-37

2.2 策略37

3 结果37-40

3.1 凝固酶分型37-38

3.2 凝固酶基因扩增及序列浅析38-40

4 讨论40-41
参考文献41-43
第四章 金葡萄球菌核糖体分型和多位点序列分型探讨43-55
摘要43
1 引言43-44
2 材料与策略44-46

2.1 材料44

2.2 策略44-46

3 结果与浅析46-51

3.1 核糖体基因分型46-49

3.2 MLST分型结果49-51

4 讨论51-52

4.1 核糖体分型51

4.2 MLST分型51-52

参考文献52-55
全文结论55-56
致谢56-57