谈曲菌高产MonacolinK红曲菌株复合诱变及固态发酵法

论文导读：
摘要：红曲是中国及周边国家的传统发酵产品，自古以来被认为具有药食同源之功。20世纪70年代，探讨者在红曲菌发酵产物中发现了一种胆固醇合成抑制剂-MonacopnK，它与土曲霉中发现的lovastatin系同一物质，具有抑制生物体内胆固醇合成途径中关键酶HMG-CoA还原酶活性的作用，以而调节生物体内异常血脂。鉴于MonacopnK探讨价值与商业价值，如何提升红曲菌产品中的Monacopn K含量成为探讨的重点。本课题探讨目的是提升功能性红曲的Monacopn K产量，探讨结果如下：（1）以红曲粉中分离出4株红曲菌，编号分别是M-H1、M-H2、M-H3及M-H4，将其纯化，通过薄层层析（TLC）法检测各红曲菌株固态发酵萌芽米中的酸型和内酯型Monacopn K，初步筛选出可以产Monacopn K的2支，再采取高效液相色谱（HPLC）法准确检测Monacopn K含量，以而复筛出Monacopn K产量最高的一支红曲菌M-H2，其产量为2.12mg/g。利用形态观察等常用的霉菌鉴定策略对此株进行鉴定，该菌株为红色红曲菌。（2）以蛋白质和糖分含量较高且富含γ-氨基丁酸特性的萌芽米（发芽糙米）作为红曲菌固态发酵底物，再额外添加不同的碳源、氮源和金属离子，探讨这三种因素对Monacopn K在发酵历程中代谢积累的影响。结果表明：以甘油为碳源，蛋白胨为氮源，无机盐选用ZnSO4，对Monacopn K的合成有推动作用，根据正交试验确定甘油浓度0.2%，蛋白胨浓度0.15%，ZnSO4的添加量为0.0005g/g米，为最优配比。（3）将红曲菌M-H2作为出发菌株，对其进行紫外线和LiCl复合诱变处理，结合抑菌圈筛选，获得Monacopn K产量较高的菌株M-H4-3。对此菌株M-H4-3进行遗传稳定性试验，将其接种在麦芽汁培养基上连续传代至第五代，每代均接种到萌芽米上进行固态发酵培养。利用HPLC对发酵样品进行检测，结果显示菌株M-H4-3性能稳定，其产量高达4.02mg/g，比出发菌株相比提升近两倍。（4）通过响应面法对红曲菌M-H2的固态发酵条件进行优化浅析，结果表明：在前期温度T1为30℃，后期温度T2为24℃，初始含水量为60%的条件下，MonacopnK的产量最高可达5.33mg/g。关键词：红曲菌论文固态发酵论文Monacopn论文K论文复合诱变论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。摘要4-5
ABSTRACT5-9
第一章 文献综述9-17
1 红曲菌9-13

1.1 红曲菌的分类9

1.2 红曲菌的生理生化特点9-10

1.3 红曲菌的代谢产物10-13

2. 红曲13-14

2.1 色素红曲13

2.2 酿造用红曲13-14

2.3 功能性红曲14

3. 红曲固态发酵技术的探讨近况14-16

3.1 固态发酵法的优缺点14-15

3.2 固态发酵影响因素15-16

3.3 红曲固态发酵法的探讨近况16

4. 探讨的目的、作用及主要内容16-17

4.1 目的与与作用16

4.2 论文探讨的主要内容16-17

第二章 红曲菌的选育17-22
1 材料与策略17-18
2 结果与浅析18-21

2.1 单菌落培养结果18-20

2.2 载玻片培养结果20-21

3 结论21-22
第三章 发酵产物中 Monacopn K 测定策略的探讨22-27
1 材料与策略22-24
2 结果与浅析24-26

2.1 标准曲线的绘制24-25

2.2 精密度实验25

2.3 样品含量测定及浅析25-26

3 结论26-27
第四章 红曲菌固态发酵基质配方的优化27-33
1 材料与策略27-29
2 结果与浅析29-32

2.1 辅加碳源的影响29-30

2.2 辅加氮源的影响30-31

2.3 辅加无机盐的影响31

2.4 培养基组分的正交优化31-32

3 结论32-33
第五章 理化复合诱变选育 Monacopn K 高产红曲菌株33-38
1 材料与策略33-35
2 结果与讨论35-37

2.1 紫外线复合 LiCl（0.8‰）诱变对菌株的影响35-36

2.2 复合诱变实验结果36

2.3 遗传稳定性试验36-37

3 结论37-38
第六论文导读：固态发酵条件的优化38-491材料与策略38-392结果与浅析39-472.1前期发酵温度对MonacopnK产量的影响39-402.2后期发酵温度对MonacopnK产量的影响40-422.3初始含水量对MonacopnK产量的影响42-432.4固态发酵条件的响应面浅析43-472.5拟合优化的验证473结论47-49参考文献49-54致谢54-55攻读学位期间的探讨成果55
章 红曲菌固态发酵条件的优化38-49
1 材料与策略38-39
2 结果与浅析39-47

2.1 前期发酵温度对 Monacopn K 产量的影响39-40

2.2 后期发酵温度对 Monacopn K 产量的影响40-42

2.3 初始含水量对 Monacopn K 产量的影响42-43

2.4 固态发酵条件的响应面浅析43-47

2.5 拟合优化的验证47

3 结论47-49
参考文献49-54
致谢54-55
攻读学位期间的探讨成果55