试述糖苷酶甘草中α-葡萄糖苷酶抑制物质提取、纯化和结构大纲

论文导读：
摘要：随着人们生活水平的提升，糖尿病发生率与治疗费用在快速攀升，成为严重的公共卫生不足之一。在糖尿病患者中Ⅰ型糖尿病和Ⅱ型糖尿病占绝大多数，都不可根治，只能通过补充外来胰岛素和制约饮食、配合降糖药物进行治疗。当前传统口服降糖药物对血糖的制约效果尚不理想，难以达到血糖制约目标。α-葡萄糖苷酶抑制剂是一类新型口服降糖药，于上世纪90年代首次研发出来，目前已作为临床治疗Ⅱ型糖尿病的首选药和1型糖尿病的辅助药物。α-葡萄糖苷酶抑制剂的制备主要源于植物提取及人工合成。探讨表明，植物来源的α-葡萄糖苷酶抑制剂的安全性优于人工合成的α-葡萄糖苷酶抑制剂。基于上面陈述的探讨近况，本论文以我国重要中药材甘草为原料，探讨了甘草中α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取和纯化工艺，并对提取物质进行了结构浅析和含量测定，旨在为新型绿色天然植物源α-葡萄糖苷酶抑制剂的制备及甘草为代表的中药材活性物质研发提供论述及技术支撑。本论文的工作主要分为三部分，其主要内容如下：一、以甘草中提取了α-葡萄糖苷酶抑制物质，并采取正交实验确定了最优提取工艺。正交实验表明，提取温度、提取时间及物料比均对甘草中α-葡萄糖苷酶抑制物质的提取有较大影响。其中提取时间的不同对提取效果的影响最大，温度次之，物料比对提取效果的影响最小。甘草中α-葡萄糖苷酶抑制剂的最佳提取条件为：水做提取剂，提取温度30℃，提取时间1h，物料比为1:10；在此条件下，所得甘草α-葡萄糖苷酶抑制剂粗提物对α-葡萄糖苷酶抑制率达到48.11%。二、利用大孔树脂对所提取的甘草α-葡萄糖苷酶抑制物质进行纯化探讨，确定了最佳纯化工艺。选择8种大孔吸附树脂对α-葡萄糖苷酶抑制物质进行吸附纯化探讨。探讨表明，强极性树脂OU-2对甘草提取液静态吸附及动态吸附效果最佳。推测甘草提取物中α-葡萄糖苷酶抑制物质亦极性较强。通过对影响大孔树脂吸附及解吸的各种因素的探讨，最后确定了OU-2型大孔树脂的最佳纯化条件为：吸附温度为30℃，pH值为5.5，提取液-树脂体积质量比例为25:1，洗脱剂为70%乙醇。在上面陈述的条件下，经OU-2处理后的甘草α-葡萄糖苷酶抑制剂粗提物得到纯化，其酶活性抑制率大为增强。三、甘草中α-葡萄糖苷酶抑制物质的结构鉴定及其含量测定对经过分离纯化后的α-葡萄糖苷酶抑制物质采取红外光谱、紫外光谱、质谱、液相色谱、气相色谱等手段进行结构剖析，签定其为异黄酮类化合物A。高效液相色谱浅析表明纯化物中的异黄酮类化合物A纯度高达99.43%。异黄酮类化合物是多种中草药的主要有效成分，具有抗癌作用，如可防治乳腺癌、前列腺癌以及结肠癌，以及抗菌、解痉挛、降脂保肝、抗心律不齐、保护心血管、抗脂质过氧化和抑制螺旋杆菌等生理活性。本探讨首次发现并证明甘草中异黄酮化合物还具有α-葡萄糖苷酶抑制作用。该探讨将深化对天然α-葡萄糖苷酶抑制剂提取物结构-活性方面的机理认识，推动甘草为代表的中药材的高值化利用；同时本探讨为新型α-葡萄糖苷酶抑制剂的制备提供新途径，在提升病患存活质量等方面具有良好的社会作用。关键词：甘草论文降血糖论文α-葡萄糖苷酶抑制物质论文提取工艺论文大孔吸附树脂论文
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ABSTRACT7-12
第一章 绪论12-22

1.1 糖尿病近况及流行走势12-13

1.1 糖尿病的近况12-13

1.2 糖尿病类型及其治疗方式13

1.2 α-葡萄糖苷酶抑制剂及其制备策略13-16

1.2.1 α-葡萄糖苷酶抑制剂的降血糖作用13-14

1.2.2 α-葡萄糖苷酶抑制剂的制备14-16

1.3 甘草及其提取物的α-葡萄糖苷酶抑制活性探讨近况16-19

1.3.1 甘草的药效16

1.3.2 甘草中有可能作为α-葡萄糖苷酶抑制剂的生理活性物质16-18

1.3.3 α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取及纯化探讨近况18-19

1.4 大孔树脂及其在α-葡萄糖苷酶抑制剂纯化探讨中的运用19-20

1.4.1 大孔树脂分离原理及影响因素19

1.4.2 大孔树脂在α-葡萄糖苷酶抑制剂纯化探讨中的运用近况19-20

1.5 本课题的探讨背景，作用和主要内容20-论文导读：结42-43第四章甘草中α-葡萄糖苷酶抑制物质的结构剖析43-504.1引言434.2实验材料与策略43-454.2.1主要实验材料434.2.2主要实验仪器434.2.3甘草中α-葡萄糖苷酶抑制物质的化学结构鉴定43-444.2.4异黄酮化合物含量测定44-454.2.5异黄酮化合物的α-葡萄糖苷酶抑制活性测定454.3结果与讨论45-494.3.1甘草中α-葡萄糖苷
22
第二章 甘草中α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取探讨22-33

2.1 引言22

2.2 实验材料及仪器22-23

2.1 实验试剂22

2.2 实验试剂配制22

2.3 实验仪器22-23

2.3 实验策略23-26

2.3.1 酶活性抑制率检测策略23-24

2.3.2 不同提取条件对甘草提取物α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响探讨24-25

2.3.3 正交实验法确定甘草α-葡萄糖苷酶抑制剂的最佳提取条件探讨25-26

2.4 结果与讨论26-32

2.4.1 提取试剂对甘草提取物α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响26

2.4.2 提取温度对甘草提取物α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响26-27

2.4.3 提取时间对甘草提取物α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响27-28

2.4.4 物料比对甘草提取物α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响28-29

2.4.5 正交实验对优化甘草提取液提取条件的探讨29-32

2.5 本章小结32-33

第三章 大孔树脂纯化甘草中α-葡萄糖苷酶抑制物质的探讨33-43

3.1 引言33

3.2 实验试剂与仪器33-34

3.

2.1 主要实验试剂33

3.

2.2 主要实验仪器33-34

3.3 实验策略34-36

3.1 吸附树脂的预处理34

3.2 大孔树脂的筛选34-35

3.3 树脂 OU-2 对甘草α-葡萄糖苷酶抑制物质的静态吸附35

3.4 树脂 OU-2 对甘草中α-葡萄糖苷酶抑制物质的动态吸附35-36

3.4 结果与讨论36-42

3.4.1 不同种类大孔吸附树脂对甘草中α-葡萄糖苷酶抑制物质的吸附探讨36-38

3.4.2 树脂 OU-2 对甘草提取物中α-葡萄糖苷酶抑制物质的静态吸附曲线38

3.4.3 温度和树脂质量对 OU-2 吸附甘草提取物中α-葡萄糖苷酶抑制物质的影响38-39
3.4.4 pH 值对 OU-2 吸附甘草提取物中α-葡萄糖苷酶抑制物质的影响39-40
3.4.5 洗脱剂对 OU-2 树脂吸附甘草提取物中α-葡萄糖苷酶抑制物质的影响40-42

3.5 本章小结42-43

第四章 甘草中α-葡萄糖苷酶抑制物质的结构剖析43-50

4.1 引言43

4.2 实验材料与策略43-45

4.

2.1 主要实验材料43

4.

2.2 主要实验仪器43

4.

2.3 甘草中α-葡萄糖苷酶抑制物质的化学结构鉴定43-44

4.

2.4 异黄酮化合物含量测定44-45

4.

2.5 异黄酮化合物的α-葡萄糖苷酶抑制活性测定45

4.3 结果与讨论45-49
4.

3.1 甘草中α-葡萄糖苷酶抑制活性物质的理化性质浅析45

4.

3.2 甘草中α-葡萄糖苷酶抑制活性物质的结构剖析45-47

4.

3.3 异黄酮类化合物含量测定47-48

4.

3.4 异黄酮类化合物的α-葡萄糖苷酶抑制作用48-49

4.4 本章小结49-50
结论与展望50-52
结论50
革新性50-51
展望51-52
参考文献52-56
攻读硕士学位期间取得的探讨成果56-57
致谢57-58
附件58