试谈细胞舌鳞状细胞癌醛脱氢酶（ALDH）高表达亚群细胞生物学特性鉴定
最后更新时间：2024-02-08
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论文导读：胞亚群是可能实现的。本实验拟通过检测舌鳞癌细胞株中ALDH的表达，以期分选出ALDH~(hig)细胞亚群，并通过体外增殖、诱导分化、无血清培养和动物致瘤等实验对ALDH~(hig)细胞进行鉴定，以期为寻找舌癌干细胞标志物提供实验依据。第一部分舌鳞状细胞癌醛脱氢酶（ALDH）高表达亚群细胞的分选目的：通过检测醛脱氢酶（ALDH)在人舌鳞状细
摘要：探讨背景肿瘤干细胞（cancer stem cells,CSCs）论述认为在肿瘤细胞中有着一类数量极少的（＜5%)、具有干细胞特性的细胞，具有高度的自我更新、无限增殖和多向分化的潜能。在肿瘤的发生、进展、侵袭、转移和放、化疗的敏感性中起决定性的作用。这一论述的提出转变了人们对肿瘤发生、侵袭和治疗认识，为探讨肿瘤的发病机理、进展、复发和治疗提供了新的思路。寻找高效干细胞标志物，分选和鉴别肿瘤干细胞成为肿瘤的探讨热点。醛脱氢酶（aldehyde dehydrogenas，ALDH）家族是一类具有氧化细胞内各种醛类成为相应的弱羧酸的解毒酶。最近几年有探讨指出醛脱氢酶(ALDH)可以用来富集干细胞样细胞。乙醛脱氢酶1（aldehyde dehydrogenas1,ALDH1,ALDH1A1）已经被用于乳腺癌、头颈部鳞状细胞癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、眼癌、造血系统恶性肿瘤、结直肠癌干细胞探讨，并被认为是一种有效的肿瘤干细胞标志物。由此，通过ALDH分选舌鳞状细胞癌Tca8113细胞株中具有干细胞特性的细胞亚群是可能实现的。本实验拟通过检测舌鳞癌细胞株中ALDH的表达，以期分选出ALDH~(hig)细胞亚群，并通过体外增殖、诱导分化、无血清培养和动物致瘤等实验对ALDH~(hig)细胞进行鉴定，以期为寻找舌癌干细胞标志物提供实验依据。第一部分舌鳞状细胞癌醛脱氢酶（ALDH）高表达亚群细胞的分选目的：通过检测醛脱氢酶（ALDH)在人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞系中的表达，分选出ALDH高表达（ALDH~(hig)）亚群细胞。策略：检测人舌鳞癌细胞Tca8113的ALDH的表达，运用流式细胞技术分选出ALDH高表达（ALDH~(hig)）和ALDH低表达（ALDHlow）亚群肿瘤细胞。结果：人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞系中含有高表达醛脱氢酶（ALDH）活性的细胞亚群，并且含量很低，只有1.3%。第二部分舌鳞癌ALDH~(hig)亚群细胞的体外增殖、分化和无血清培养目的:通过进行体外培养增殖、诱导分化和无血清培养成球实验，了解ALDH~(hig)、ALDHlow和未分选的肿瘤细胞的增殖速度差别，ALDH~(hig)细胞分化情况，和ALDH~(hig)、ALDHlow在无血清培养基里细胞生长情况。策略:将相同数量的ALDH~(hig)、ALDHlow和未分选的肿瘤细胞在传统的普通培养基（serum supplemented medium,S）里进行培养，定期用CCK-8法检测各组细胞增殖情况，绘制细胞生长曲线。将分选收集的ALDH~(hig)肿瘤细胞制备成单细胞悬液，接种至含有RPMI1640完全培养基的培养瓶，置于5%CO2、37℃培养箱中培养，检测培养后第3、5、7、9天细胞中ALDH的表达水平。将分选的ALDH~(hig)、ALDHlow细胞制成单细胞悬液，以2x104个/毫升的密度接种至培养瓶，加入无血清培养基（serum-free medium,M）,每天观察细胞球形成情况，每3天换液。结果:在体外增殖实验中，分选出的ALDH~(hig)肿瘤细胞增殖能力要高于ALDHlow肿瘤细胞和未分选的肿瘤细胞，而且在体外培养的ALDH~(hig)肿瘤细胞中ALDH+比例逐渐下降至分选前的比例，ALDH~(hig)分化形成了ALDH~(hig)和ALDHlow。ALDH~(hig)肿瘤细胞能在M中悬浮生长形成肿瘤细胞球， ALDHlow肿瘤细胞大部分死亡，未形成肿瘤细胞球。第三部分舌鳞癌ALDH~(hig)亚群细胞动物致瘤试验目的:通过动物致瘤实验了解ALDH~(hig)、未分选的肿瘤细胞致瘤能力的差别。策略:将ALDH~(hig)和未分选的肿瘤细胞按不同数量级接种在裸鼠的背部皮肤下，观察各组成瘤情况。结果:ALDH~(hig)亚群肿瘤细胞比未分选肿瘤细胞致瘤性强。结论舌鳞癌Tca8113细胞系中有着一小群高表达醛脱氢酶的细胞，这群细胞具有增殖力强、多向分化、强致瘤力等肿瘤干细胞的生物学特性。ALDH可能是舌鳞癌干细胞的标志物之一。关键词：舌鳞状细胞癌论文醛脱氢酶论文肿瘤干细胞论文细胞鉴定论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。论文导读：16-20前言161材料和策略16-182结果183讨论18-20第二部分舌鳞癌ALDHhig亚群细胞的体外增殖、分化和无血清培养20-28前言201材料和策略20-222结果22-253讨论25-28第三部分舌鳞癌ALDHhig亚群细胞动物致瘤试验28-30前言281材料和策略28-292结果293讨论29-30全文总结30-31参考文献31-34附图34-37文献综述37-44参考文
英汉缩略语名词对照5-6
摘要6-10
ABSTRACT10-14
前言14-16
第一部分 舌鳞状细胞癌醛脱氢酶(ALDH)高表达亚群细胞的分选16-20
前言16
1 材料和策略16-18
2 结果18
3 讨论18-20
第二部分 舌鳞癌 ALDHhig亚群细胞的体外增殖、分化和无血清培养20-28
前言20
1 材料和策略20-22
2 结果22-25
3 讨论25-28
第三部分 舌鳞癌 ALDHhig亚群细胞动物致瘤试验28-30
前言28
1 材料和策略28-29
2 结果29
3 讨论29-30
全文总结30-31
参考文献31-34
附图34-37
文献综述37-44
参考文献41-44
致谢44-45
攻读硕士期间发表的论文45-46
摘要：探讨背景肿瘤干细胞（cancer stem cells,CSCs）论述认为在肿瘤细胞中有着一类数量极少的（＜5%)、具有干细胞特性的细胞，具有高度的自我更新、无限增殖和多向分化的潜能。在肿瘤的发生、进展、侵袭、转移和放、化疗的敏感性中起决定性的作用。这一论述的提出转变了人们对肿瘤发生、侵袭和治疗认识，为探讨肿瘤的发病机理、进展、复发和治疗提供了新的思路。寻找高效干细胞标志物，分选和鉴别肿瘤干细胞成为肿瘤的探讨热点。醛脱氢酶（aldehyde dehydrogenas，ALDH）家族是一类具有氧化细胞内各种醛类成为相应的弱羧酸的解毒酶。最近几年有探讨指出醛脱氢酶(ALDH)可以用来富集干细胞样细胞。乙醛脱氢酶1（aldehyde dehydrogenas1,ALDH1,ALDH1A1）已经被用于乳腺癌、头颈部鳞状细胞癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、眼癌、造血系统恶性肿瘤、结直肠癌干细胞探讨，并被认为是一种有效的肿瘤干细胞标志物。由此，通过ALDH分选舌鳞状细胞癌Tca8113细胞株中具有干细胞特性的细胞亚群是可能实现的。本实验拟通过检测舌鳞癌细胞株中ALDH的表达，以期分选出ALDH~(hig)细胞亚群，并通过体外增殖、诱导分化、无血清培养和动物致瘤等实验对ALDH~(hig)细胞进行鉴定，以期为寻找舌癌干细胞标志物提供实验依据。第一部分舌鳞状细胞癌醛脱氢酶（ALDH）高表达亚群细胞的分选目的：通过检测醛脱氢酶（ALDH)在人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞系中的表达，分选出ALDH高表达（ALDH~(hig)）亚群细胞。策略：检测人舌鳞癌细胞Tca8113的ALDH的表达，运用流式细胞技术分选出ALDH高表达（ALDH~(hig)）和ALDH低表达（ALDHlow）亚群肿瘤细胞。结果：人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞系中含有高表达醛脱氢酶（ALDH）活性的细胞亚群，并且含量很低，只有1.3%。第二部分舌鳞癌ALDH~(hig)亚群细胞的体外增殖、分化和无血清培养目的:通过进行体外培养增殖、诱导分化和无血清培养成球实验，了解ALDH~(hig)、ALDHlow和未分选的肿瘤细胞的增殖速度差别，ALDH~(hig)细胞分化情况，和ALDH~(hig)、ALDHlow在无血清培养基里细胞生长情况。策略:将相同数量的ALDH~(hig)、ALDHlow和未分选的肿瘤细胞在传统的普通培养基（serum supplemented medium,S）里进行培养，定期用CCK-8法检测各组细胞增殖情况，绘制细胞生长曲线。将分选收集的ALDH~(hig)肿瘤细胞制备成单细胞悬液，接种至含有RPMI1640完全培养基的培养瓶，置于5%CO2、37℃培养箱中培养，检测培养后第3、5、7、9天细胞中ALDH的表达水平。将分选的ALDH~(hig)、ALDHlow细胞制成单细胞悬液，以2x104个/毫升的密度接种至培养瓶，加入无血清培养基（serum-free medium,M）,每天观察细胞球形成情况，每3天换液。结果:在体外增殖实验中，分选出的ALDH~(hig)肿瘤细胞增殖能力要高于ALDHlow肿瘤细胞和未分选的肿瘤细胞，而且在体外培养的ALDH~(hig)肿瘤细胞中ALDH+比例逐渐下降至分选前的比例，ALDH~(hig)分化形成了ALDH~(hig)和ALDHlow。ALDH~(hig)肿瘤细胞能在M中悬浮生长形成肿瘤细胞球， ALDHlow肿瘤细胞大部分死亡，未形成肿瘤细胞球。第三部分舌鳞癌ALDH~(hig)亚群细胞动物致瘤试验目的:通过动物致瘤实验了解ALDH~(hig)、未分选的肿瘤细胞致瘤能力的差别。策略:将ALDH~(hig)和未分选的肿瘤细胞按不同数量级接种在裸鼠的背部皮肤下，观察各组成瘤情况。结果:ALDH~(hig)亚群肿瘤细胞比未分选肿瘤细胞致瘤性强。结论舌鳞癌Tca8113细胞系中有着一小群高表达醛脱氢酶的细胞，这群细胞具有增殖力强、多向分化、强致瘤力等肿瘤干细胞的生物学特性。ALDH可能是舌鳞癌干细胞的标志物之一。关键词：舌鳞状细胞癌论文醛脱氢酶论文肿瘤干细胞论文细胞鉴定论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。论文导读：16-20前言161材料和策略16-182结果183讨论18-20第二部分舌鳞癌ALDHhig亚群细胞的体外增殖、分化和无血清培养20-28前言201材料和策略20-222结果22-253讨论25-28第三部分舌鳞癌ALDHhig亚群细胞动物致瘤试验28-30前言281材料和策略28-292结果293讨论29-30全文总结30-31参考文献31-34附图34-37文献综述37-44参考文
英汉缩略语名词对照5-6
摘要6-10
ABSTRACT10-14
前言14-16
第一部分 舌鳞状细胞癌醛脱氢酶(ALDH)高表达亚群细胞的分选16-20
前言16
1 材料和策略16-18
2 结果18
3 讨论18-20
第二部分 舌鳞癌 ALDHhig亚群细胞的体外增殖、分化和无血清培养20-28
前言20
1 材料和策略20-22
2 结果22-25
3 讨论25-28
第三部分 舌鳞癌 ALDHhig亚群细胞动物致瘤试验28-30
前言28
1 材料和策略28-29
2 结果29
3 讨论29-30
全文总结30-31
参考文献31-34
附图34-37
文献综述37-44
参考文献41-44
致谢44-45
攻读硕士期间发表的论文45-46