简述消减舌鳞癌Tca8113细胞系中高、低醛脱氢酶活性细胞亚群差别表达基因cDNA文库构建学术

论文导读：帮助。关键词：人舌鳞癌Tca8113论文抑制性消减杂交技术论文cDNA文库论文肿瘤干细胞论文醛脱氢酶论文本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。英汉缩略语名词对照5-7摘要7-8Abstract8-10前言10-11第一部分Tca8113细胞常规培
摘要：目的构建舌鳞癌Tca8113细胞系中高、低醛脱氢酶活性(high/lowaldehyde dehydrogenase activity， ALDH~(low)~(high)/ALDH~(low)low)细胞差别基因cDNA文库。策略用流式细胞仪检测ALDEFLUOR染色的Tca8113细胞中干细胞标志物ALDH~(low)的表达，并收集ALDH~(low)~(high)和ALDH~(low)low细胞；用Trizol分别提取两亚群细胞的总RNA；用抑制性消减杂交（SSH）对两组RNA进行差别基因筛选和扩增，扩增产物与pMD18-T载体连接并转化大肠杆菌DH5a。文库扩增后，每库随机挑取24克隆进行酶切、测序及同源性浅析。果分选得到ALDH~(low)~(high)和ALDH~(low)low两亚群细胞，其中ALDH~(low)~(high)细胞的比例为2.5%；分光光度计测得ALDH~(low)~(high)和ALDH~(low)low的RNA OD_(260)/OD_(280)的比值分别为1.93和1.92；构建了ALDH~(low)~(high)和ALDH~(low)low细胞差别基因cDNA双向文库，每个库约500个克隆菌落，每库随机挑选24个菌落进行PCR浅析，克隆片段均匀分布在200bp～700bp，无假阳性克隆。测序结果经同源性比对浅析和PubMed检索，其中与肿瘤有关的基因有，SLC25A13、KLHL2、NPC1、WAPL、BARD1、Notch2、EEF2K。论成功构建的ALDH~(low)~(high)和ALDH~(low)low细胞差别基因cDNA文库，为下一步找出两亚群细胞的差别基因和为最终找到舌鳞癌干细胞特异性标志物提供帮助。关键词：人舌鳞癌Tca8113论文抑制性消减杂交技术论文cDNA文库论文肿瘤干细胞论文醛脱氢酶论文
本论文由www.7ctime.com,需要论文可以联系人员哦。英汉缩略语名词对照5-7
摘要7-8
Abstract8-10
前言10-11
第一部分 Tca8113 细胞常规培养及悬浮培养11-17
1 材料与策略11-12
2 结果12-15
3 讨论15-16
4 结论16-17
第二部分 舌鳞癌Tca8113细胞系中高、低醛脱氢酶活性细胞亚群差别表达基因cDNA文库的构建17-26
1 材料与策略17-19
2 结果19-22
3 讨论22-25
4 结论25-26
全文总结26-27
参考文献27-30
综述30-41
参考文献37-41
致谢41-42
攻读硕士期间发表的学术论文目录42-43