谈谈细胞硼替佐咪与阿糖胞苷对K562/ADM作用

论文导读：探讨硼替佐米(bortezomib，Bor)单独或联合阿糖胞苷(Arabinosylcytonsin，Ara-c)运用于白血病耐药细胞株K562/ADM，对其增殖抑制和诱导凋亡作用。策略：以不同浓度Bor、Ara-c处理K562/ADM细胞48小时，MTT法分别测定Bor、Ara-c两药对K562/ADM细胞作用48h的IC50值，将两药以48h的IC50值的浓度单独和联合作用于细胞48h后，利用MTT比色法
摘要：目的：本探讨探讨硼替佐米(bortezomib， Bor)单独或联合阿糖胞苷(Arabinosylcytonsin，Ara-c)运用于白血病耐药细胞株K562/ADM，对其增殖抑制和诱导凋亡作用。策略：以不同浓度Bor、Ara-c处理K562/ADM细胞48小时，MTT法分别测定Bor、Ara-c两药对K562/ADM细胞作用48h的IC50值，将两药以48h的IC50值的浓度单独和联合作用于细胞48h后，利用MTT比色法检测细胞增殖抑制活性，流式细胞术检测细胞的凋亡，及用RT-PCR测MDR基因的表达，并浅析硼替佐米是否具有抑制增殖和诱导凋亡的作用。结果：1． Bor的浓度在0-5nmol/L对K562/ADM细胞作用48时，未见显著的增殖抑制作用，其中5nmoL／L剂量处理12小时后开始有细胞的凋亡发生，而5-50nmol／L浓度的Bor则能有效的抑制K562/ADM细胞增殖并引起其凋亡，而随着延长Bor作用时间或增加Bor剂量可使细胞凋亡率显著增加。2．1.0μmol/L Ara-c作用于K562/ADM细胞48h时，未见显著的增殖抑制作用。当Ara-c的浓度增高至5μmol/L其抑制作用开始加强，并随着Ara-c剂量加大或延长Ara-c作用时间，可以使细胞凋亡率加强。3．MTT法测得Ara-c对K562/ADM细胞在48h的IC50值为5μmol/L，Bor对K562/ADM细胞在48h的IC50值为20nmoL／L；而联合用药组细胞的生长抑制率和凋亡率均高于两药分别单独处理组(P0．05)，且在各联合用药组中， C组(Ara-C、Bor同时给药组)细胞生长抑制率和凋亡率分别为(69.70±4.16％)和（35.97±3.72%），均高于先予Ara-C预处理后再加入Bor的A组(68.87±3.63％)和（34.43±2.64%）和先加入Bor预处理6h后序贯Ara-C的B组(62.77±2.69％)和（33.03±4.48%）；联合用药A组生长抑制率稍高于联合用药B组，但将各联合组之间数值进行比较，无统计学作用(P＞0．05)。4．半定量RT-PCR测得用Ara-c、Bor单药组后MDR的表达分别为84.7±9.4%和85.1±8.4%，在Ara-c单药组与Bor单药组组间的MDR的表达无显著差别；将联合组分别与Ara-c、Bor单药组进行比较，联合论文导读：.2.10统计学处理20-21第3章结果21-253.1细胞生长曲线的绘制213.2倒置显微镜下的细胞形态学观察21-223.3阿霉素影响K56

2、K562/ADM细胞增殖抑制上一页123下一页

组的MDR的表达显著低于两单药组，差别具有统计学作用（P0．05）；而在各联合用药组中，以C组(Ara-C、Bor同时给药组) MDR的表达最低，值为41.5±1.8％，均低于先予Ara-C预处理后再加入Bor的A组（47.3±2.0％）和先加入Bor预处理6h后序贯Ara-C的B组（53.0±1.6%），但将各联合组之间数值进行比较，无统计学作用(P＞0．05)。结论：1．Bor的浓度在0-5nmol/L对K562/ADM细胞的增殖抑制不显著，当药物浓度5nmol/L时对K562/ADM细胞有显著抑制作用。2．Ara-c的浓度在0-2μmol/L时，对K562/ADM细胞的增殖抑制不显著，当浓度≥5μmol/L时对K562/ADM细胞有显著抑制作用。3． Bor和Ara-C均能诱导K562/ADM细胞凋亡，两者联合作用于K562/ADM时，可以使其抗细胞的增殖和诱导凋亡作用更强，以而起到了更好的抗肿瘤作用。关键词：硼替佐米论文阿糖胞苷论文K562/ADM细胞论文凋亡论文
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ABSTRACT5-9
英文缩略词表9-10
第1章 前言10-13
第2章 材料和策略13-21

2.1 材料13-15

2.

1.1 细胞种类和来源13

2.

1.2 主要试剂13-14

2.

1.3 主要实验仪剂14

2.

1.4 溶液配制14-15

2.2 实验策略15-21

2.1 细胞传代培养15-16

2.2 细胞计数策略16

2.3 细胞形态学观察16

2.4 细胞生长曲线的绘制16-17

2.2.5 MTT 法检测在硼替佐米、阿糖胞苷作用下 K562/ADM 细胞细胞增殖抑制受抑时的 IC50浓度17

2.6 实验分组17

2.7 用 MTT 法测定各组的细胞增殖抑制率17

2.8 运用流式细胞仪检测细胞凋亡17-18

2.9 RT—PCR 法检测 MDR mRNA 表达水平18-20

2.10 统计学处理20-21

第3章 结果21-25

3.1 细胞生长曲线的绘制21

3.2 倒置显微镜下的细胞形态学观察21-22

3.3 阿霉素影响 K562、K562/ADM 细胞增殖抑制论文导读：实验有着的不足与展望29-30致谢30-31参考文献31-33附图33-36攻读学位期间的探讨成果36-37综述37-44参考文献40-44上一页123
的比较22

3.4 Bor、Ara-c 单用对 K562/ADM 的增殖抑制作用22-23

3.5 Bor、Ara-c 联合运用对 K562/ADM 的增殖抑制作用23

3.6 流式细胞仪结果凋亡率23-24

3.7 MDR 基因表达的结果24-25

第4章 讨论25-29
第5章 结论29-30

5.1 结论29

5.2 实验有着的不足与展望29-30

致谢30-31
参考文献31-33
附图33-36
攻读学位期间的探讨成果36-37
综述37-44
参考文献40-44