对于先天性22q11微缺失在先天性心脏病中检测及相关性资料网

论文导读：准，对多重PCR策略进行如下评价：灵敏度为100%；特异度为99.48%；假阳性率约为0.52%；Kappa为0.929。4.22q11微缺失与先天性心脏病联系：在实验组中，22q11微缺失率为3.5%（7/200）；对照组中，22q11微缺失率为0%（0/120）。经Fisher精确概率法检验，p=0.048（≤0.05），差别有统计学作用。

5.22q11微缺失与先天性心脏病表型的联系：（1）根据已检

摘要：目的：采取荧光原位杂交(FISH)及多重PCR技术对先天性心脏病患儿进行22q11微缺失检测，探讨22q11微缺失与先天性心脏病的发病及表型之间的联系；比较FISH法和多重PCR技术的优缺点。策略：选取200例散发先天性心脏病患儿作为实验组和120例健康儿童作为对照组，留取全血，分别进行以下实验：1.标本进行预处理，制成浓度合适的细胞悬液，分装于2个EP管中并分别标记A组、B组；2. A组标本：采取TUPLE1/ARSA DNA探针，结合FISH技术，检测其22q11微缺失情况；3. B组标本：选择覆盖经典缺失区域（typical deletion region，TDR）的4个短串联重复序列多态位点（STR）：22D_4_1、22D_4_2、22D_4_3、D22S873，采取盲法，运用多重PCR技术对标本进行扩增，通过毛细管电泳观察峰值，检测22q11微缺失情况。结果：1.FISH检测结果显示：在200例先天性心脏病患儿检出22q11微缺失7例，检出率为3.5%。其中，在85例室间隔缺损患儿中检测到22q11微缺失3例，缺失率为3.5%；32例法洛氏四联症患儿中检测到22q11微缺失2例，缺失率为6.3%；26例室间隔缺损合并房间隔缺损患儿中检测到22q11微缺失2例，缺失率为7.6%。而其余先天性心脏病患儿及正常对照组儿童均未检测出22q11微缺失。2.多重PCR检测结果显示：在200例先天性心脏病患儿检出22q11微缺失8例，其中7例和FISH检测结果一致，有1例室间隔缺损患儿STR标记浅析22q11微缺失结果为阳性，而该例患儿FISH检测结果为阴性。3.以FISH法为金标准，对多重PCR策略进行如下评价：灵敏度为100%；特异度为99.48%；假阳性率约为0.52%；Kappa为0.929。4.22q11微缺失与先天性心脏病联系：在实验组中，22q11微缺失率为3.5%（7/200）；对照组中，22q11微缺失率为0%（0/120）。经Fisher精确概率法检验，p=0.048（≤0.05），差别有统计学作用。5.22q11微缺失与先天性心脏病表型的联系：（1）根据已检测出22q11微缺失阳性结果将实验组分为法洛氏四联症组、室间隔缺损组、室间隔缺损合并房间隔缺损组，并进行统计学浅析。经Fisher精确概率法检验，p值为0.636（p＞0.05），无显著性差别；（2）将实验组中复合畸形患儿分为法洛氏四联症组（包括法洛氏四联症伴多发畸形）及其他复合畸形两组，并进行统计学浅析。经Fisher精确概率法检验，p值为0.608（p＞0.05），无显著性差别；（3）将实验组分为圆锥动脉干畸形组、非圆锥动脉干畸形组进行比较，经Fisher精确概率法检验，p值为0.311（p＞0.05），差别无统计学作用。结论：1.22q11微缺失与先天性心脏病发病相关。2.22q11微缺失与非综合征型先天性心脏病表型可能无关。3.基于STR的多重PCR检测策略可用于先天性心脏病患儿22q11微缺失的筛查。关键词：22q11微缺失论文先天性心脏病论文多重PCR论文FISH论文STR论文
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ABSTRACT5-10
第1章 引言10-13
第2章 材料和策略13-24

2.1 探讨对象13-14

2.2 主要仪器设备14

2.3 主要试剂及耗材14-15

2.3.1 主要试剂14-15

2.3.2 主要耗材15

2.4 主要的溶液成分和试剂的配制15-16

2.5 策略16-24

2.5.1 标本采集及要求16

2.5.2 外周血样本的预处理16-17

2.5.3 荧光原位杂交技术(FISH)实验17-19

2.5.4 多重 PCR 实验19-22

2.5.5 数据处理22-23

2.5.6 技术路线图23-24

第3章 结果24-31

3.1 荧光原位杂交技术(FISH)实验结果：24-25

3.2 多重 PCR 实验结果25-27

3.3 结果浅析27-31

3.1 STR 的多态性浅析及结果判断27

3.2 FISH 法和多重 PCR 比较27-28

3.3 22q11 微缺失在先天性心脏病患儿和正常儿童中的比较28-29

3.4 22q11 微缺失和先天性心脏病表型联系29-31

第4章 讨论31-39

4.1 22q11 微缺失与先天性心脏病的联系32-35

4.

1.1 22q11 微缺失与先天性心脏病的发病联系32

4.

1.2 22q11 微缺失在非综合型先天性心脏病患儿中的检出率浅析32-33

4.

1.3 22q11 微缺失与先天性心脏病表型的联系33-35

4.2 FISH、多重 PCR 实验35-37

4.3 实验需改善之处37

4.4 展望37-39

第5章 结论39-40
致谢40-41
参考文献41-44
攻读学位期间的探讨成果44-45
综述45-53
参考文献52-53