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浅议癌细胞他莫昔芬(TAM)对乳腺癌T47D细胞雌激素受体(ER)表达与~(18)F-氟代脱氧葡萄糖(~(18)F-FDG)摄取影响学位

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论文导读:调(对照组144.73±25.19,TAM组92.11±15.48);ERβ无显著转变(对照组248.44±6.92,TAM组247.95±7.66)。WesternBlot的结果与免疫荧光结果相一致。结论乳腺癌T47D细胞株同时表达ERα和ERβ两种受体,TAM主要意义于ERα,使其表达下降,ERβ的表达无显著转变。第二部分TAM对乳腺癌T47D细胞~(18)F-FDG摄取的影响目的探讨测定乳腺癌T47
摘要:第一部分乳腺癌T47D细胞ER的表达及TAM治疗后的表达转变目的探讨测定乳腺癌T47D细胞ERα和ERβ的表达及经TAM意义后的转变状况。办法在凹形细胞培养皿内接种的细胞数量为1×104个/皿,培养24小时后,使用免疫荧光的办法测定ERα和ERβ的表达状况。采取细胞增殖和细胞毒性检测试剂(CCK-8)法,在96孔板内接种的细胞数量为1×10~4/孔,分别测定加入不同浓度的TAM(0~1.0×10-5mol/L)200μl,培养24h后的细胞生长抑制率,并计算TAM的半数致死剂量(IC50),用所得IC50处理细胞24h后,使用免疫荧光的办法测定ERα和ERβ的转变状况,并使用蛋白印迹(Western Blot)的办法验证免疫荧光法的结果。结果经免疫荧光法测定乳腺癌T47D细胞表达ERα和ERβ。在浓度为0、1.0×10~(-8)、1.0×10~(-7)、1.0×10~(-6)、1.0×10~(-5)mol/L的TAM意义下,T47D细胞的生长抑制率分别为(9.88±3.41)%、(23.61±3.30)%、(32.76±5.99)%、(48.85±1.90)%和(64.86±2.54)%。IC50约为1.0×10-6mol/L。免疫荧光法测得TAM意义T47D细胞后ERα下调(对照组144.73±25.19,TAM组92.11±15.48);ERβ无显著转变(对照组248.44±6.92,TAM组247.95±7.66)。Western Blot的结果与免疫荧光结果相一致。结论乳腺癌T47D细胞株同时表达ERα和ERβ两种受体,TAM主要意义于ERα,使其表达下降,ERβ的表达无显著转变。第二部分TAM对乳腺癌T47D细胞~(18)F-FDG摄取的影响目的探讨测定乳腺癌T47D细胞经TAM意义后对细胞摄取~(18)F-FDG的影响及与ER表达的联系。办法采取细胞增殖和细胞毒性检测试剂(CCK-8)法,在96孔板内接种的细胞数量为1×104/孔,分别测定加入不同浓度的TAM(0~1.0×10~(-5)mol/L)200μl,培养24h后的细胞生长抑制率。在六孔板内接种的细胞数量为1×10~6/孔,分别测定加入不同浓度的TAM(0~1.0×10~(-5)mol/L)2ml、培养24h后的测定~(18)F-FDG的细胞摄取率,并计算~(18)F-FDG的细胞摄取抑制论文导读:D细胞后ERα下调(对照组178.83±15.11,TAM组111.27±18.19);ERβ无显著转变(对照组230.25±13.37,TAM组233.80±12.30)。结论TAM意义24h后引起乳腺癌T47D细胞的~(18)F-FDG细胞摄取率下降,且TAM意义后ERα的表达下降与~(18)F-FDG的摄取下降呈正相关性。第三部分乳腺癌T47D细胞~(18)F-FDG摄取实验办法研究目的从乳腺癌T47D细胞极为
率。在凹形细胞培养皿内接种的细胞数量为1×10~4个/皿,培养24小时后,分别加入不含任何药物的培养基、含TAM浓度为1×10~(-6)mol/L的培养基及与TAM量相等体积的无水乙醇的培养基继续培养24h后,使用免疫荧光的办法测定ERα和ERβ的表达状况。结果TAM浓度分别为0、1.0×10~(-8)、1.0×10~(-7)、1.0×10~(-6)和1.0×10~(-5)mol/L的状况下意义24h后,细胞生长抑制率分别为(9.88±3.41)%、(23.61±3.30)%、(32.76±5.99)%、(48.85±1.90)%和(64.86±2.54)%。细胞~(18)F-FDG摄取抑制率分别为(4.40±1.94)%、(6.73±3.88)%、(13.00±4.93)%、(44.11±5.33)%和(61.97±8.76)%。免疫荧光法测得TAM意义T47D细胞后ERα下调(对照组178.83±15.11,TAM组111.27±18.19);ERβ无显著转变(对照组230.25±13.37,TAM组233.80±12.30)。结论TAM意义24h后引起乳腺癌T47D细胞的~(18)F-FDG细胞摄取率下降,且TAM意义后ERα的表达下降与~(18)F-FDG的摄取下降呈正相关性。第三部分乳腺癌T47D细胞~(18)F-FDG摄取实验办法研究目的从乳腺癌T47D细胞极为与化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)意义后~(18)F-FDG的摄取转变为例,研究实验办法改善方面的意见。办法在不同条件下测定乳腺癌T47D细胞的~(18)F-FDG细胞摄取率,细胞数量为1×10~4~5×10~6/孔,~(18)F-FDG放射性活度为1.85~29.6kBq,反应时间为20~120min,葡萄糖浓度为0~11mol/L,无糖培养基培养的时间为0~12h。采取细胞增殖和细胞毒性检测试剂(CCK-8)法分别测定加入不同剂量(0~8.0×10~(-6)mol/L)5-FU200μl,培养24h后测定细胞生长抑制率。测定加入不同剂量(0~8.0×10~(-6)mol/L)5-FU2ml,培养24h后~(18)F-FDG的细胞摄取率。结果当每孔1×10~6个细胞、加入3.7kBq~(18)F-FDG、葡萄糖浓度为0mol/L、意义时间为100min、无糖培养基培养时间为6h时,细胞摄取率可达论文导读:与办法15-172结果17-233讨论23-254小结25参考文献25-27第二部分TAM对乳腺癌T47D细胞~(18)F-FDG摄取的影响27-411材料与办法28-292结果29-353讨论35-374小结37参考文献37-39附图39-41第三部分乳腺癌T47D细胞摄取~(18)F-FDG实验办法研究41-491材料与办法41-422结果42-443讨论44-454小结45-46参考文献46-47
到(28.07±0.45)%。加入1.0×10~(-6)、2.0×10~(-6)、4.0×10~(-6)和8.0×10~(-6)mol/L5-FU24h后,细胞生长抑制率分别为(26.96±1.33)%、(42.94±2.25)%、(52.65±2.10)%和(60.03±4.35)%。细胞摄取抑制率分别为(17.86±2.96)%、(28.44±7.10)%、(42.62±3.62)%和(69.02±4.03)%。结论5-FU可从影响乳腺癌T47D细胞对~(18)F-FDG的摄取下降。相同浓度下,TAM引起的下降更显著。无糖培养基的培养时间不影响乳腺癌T47D细胞对~(18)F-FDG的摄取。关键词:乳腺癌细胞论文TAM论文ER论文~(18)F-FDG论文5-FU论文
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Abstract7-12
探讨背景12-15
参考文献13-15
第一部分 乳腺癌 T47D 细胞 ER 的表达及 TAM 治疗后的表达转变15-27
1 材料与办法15-17
2 结果17-23
3 讨论23-25
4 小结25
参考文献25-27
第二部分 TAM 对乳腺癌 T47D 细胞~(18)F-FDG 摄取的影响27-41
1 材料与办法28-29
2 结果29-35
3 讨论35-37
4 小结37
参考文献37-39
附图39-41
第三部分 乳腺癌 T47D 细胞摄取~(18)F-FDG 实验办法研究41-49
1 材料与办法41-42
2 结果42-44
3 讨论44-45
4 小结45-46
参考文献46-47
附图47-49
总结49-50
综述50-59
参考文献56-59
中英文缩略写词对照表59-60
攻读学位期间公开发表的论文60-61
致谢61-62