试议肾上腺NMDA致痉挛发作后脑损伤差别蛋白质组学
最后更新时间：2024-01-18
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论文导读：现痉挛模型组中Pkm2、ATP6V1B2、Prps2、ARHGDIA、CFL1、DPYSL3等蛋白表达下调。（3）孕期应激痉挛模型与痉挛模型差别蛋白质组分析，发现孕期应激YWHAZ下调。(4)ACTH治疗组与非治疗组差别蛋白质组分析发现ACTH治疗后Tuba1a、CFL1、SNAP-25、ARHGDIA、MDH、DDAH1和ANNEX3等表达转变。（5）ARHGDIA在5例婴儿痉挛症患儿的致痫灶中的表
摘要：目的婴儿痉挛症(Infantile spas,IS)是一种特发于婴儿期的年龄依赖性癫痫脑病，临床上从反复痉挛发作、脑电图高度失律、显著的精神运动发育落后为特点。70%～90%的患儿可伴有重度认知功能障碍，智力倒退等严重脑损伤，病因可多达200余种，临床流行病学提示，母孕期精神应激对子代健康的具有影响，婴儿痉挛症的发病与母亲产前不良应激显著相关。婴儿痉挛症属于难治性癫痫，几乎所有的传统抗癫痫药物均药效欠佳，但促肾上腺皮质激素释放激素（ACTH）对其有独特疗效。由此，本探讨通过建立婴儿痉挛症动物模型，使用差别蛋白质组技术，旨在探讨研究婴儿痉挛症的发病机制、孕期应激因素的影响及ACTH对婴儿痉挛的治疗机制。办法使用未成熟脑对N--D-天门冬氨酸(NMDA)高度敏感，制备乳鼠痉挛发作模型，差别蛋白质组技术分析从下三类动物模型间的差别：（1）痉挛模型组与正常对照组对比，研究发病机制；（2）孕期应激痉挛模型组与痉挛模型组对比，分析孕期应激意义机制；（3）ACTH治疗组与非治疗组对比，探讨ACTH的治疗机制。将动物模型的脑组织样本进行双向电泳分离，获得双向胶图，依据实验分组，Imager marster软件分析各组间蛋白表达差别，选取差别蛋白进行胶内酶切，质谱鉴定，生物信息学办法分析并构建差别蛋白相互意义网络，研究生物功能的调节网络。对部分差别表达蛋白进行western-blot验证。并收集了5例婴儿痉挛症患儿的手术切除的颅内致痫灶样本，通过免疫组织化学的办法初步验证差别蛋白的表达，研究其生物学功能。结果（1）孕期应激痉挛动物模型组较痉挛动物模型组，痉挛发作的潜伏期短（t=3.96，P＜0.001），发作次数多（t=8.65，P＜0.001）；孕期应激痉挛模型ACTH治疗组较孕期应激痉挛模型组，痉挛发作潜伏期长（t=6.9，P＜0.001），发作次数少（t=5.75，P＜0.001）。从上均有统计学差别。（2）痉挛模型组与正常对照组差别蛋白质组分析，发现痉挛模型组中Pkm2、ATP6V1B2、Prps2、ARHGDIA、CFL1、DPYSL3等蛋白表达下调。（3）孕期应激痉挛模型与痉挛模型差别蛋白质组分析，发现孕期应激YWHAZ下调。(4)ACTH治疗组与非治疗组差别蛋白质组分析发现ACTH治疗后Tuba1a、CFL1、SNAP-25、ARHGDIA、MDH、DDAH1和ANNEX3等表达转变。（5）ARHGDIA在5例婴儿痉挛症患儿的致痫灶中的表达有着差别，在经ACTH治疗过的患儿中表达更显著（由于样本少，未行统计学分析）。结论（1）母鼠孕期应激，NMDA可诱发其乳鼠更为严重的痉挛发作，而给予ACTH治疗可减轻痉挛发作程度。这更好的反应了动物模型对ACTH治疗敏感的特征，更符合婴儿痉挛症这一疾病的特征。（2）痉挛模型组与正常对照组对比，提示婴儿痉挛脑损伤机制可能涉及能量障碍、脑发育异常及神经重塑等。（3）孕期应激痉挛模型组与痉挛模型组对比，YWHAZ蛋白的下调，可能为导致痉挛加重的重要因素之一。（4）ACTH治疗组与非治疗组对比，差别蛋白涉及细胞骨架、神经突触、能量代谢、血管调节、信号传导等方面，治疗机制可能与神经传导，突触重建、乙酰化密切相关。（5）通过差别蛋白ARHGDIA在5例临床样本中表达水平的检测，初步发现ACTH治疗与ARHGDIA表达可能相关，有进一步的开展基础与临床探讨的价值。关键词：婴儿痉挛症论文差别蛋白质组论文脑损伤论文促肾上腺皮质激素论文双向电泳论文
本论文由www.7ctime.com,需要可从关系人员哦。英文缩略对照词表6-7
中文摘要7-9
Abstract9-11
主要仪器设备11-12
第一章 婴儿痉挛症脑损伤机制及孕期应激因素对发病影响的探讨－NMDA 痉挛模型的差别蛋白质组分析12-41
前言12-15
材料和办法15-26
结果26-33
讨论33-35
小结35-36
参考文献36-41
第二章 ACTH 对婴儿痉挛症所致脑损伤保护机制的探讨－ACTH 干预 NMDA 痉挛模型的差别蛋白质组分析41-56
材料和办法42-45
结果45-50
讨论50-53
小结53论文导读：参考文献53-56第三章差别蛋白生物学功能的初步探讨－婴儿痉挛症患儿致痫灶中ARHGDIA的表达56-61材料与办法56-58结果58-59讨论59-60参考文献60-61综述:癫痫的蛋白质组学探讨发展61-68参考文献66-68个人简历68-69致谢69-70上一页12
参考文献53-56
第三章 差别蛋白生物学功能的初步探讨－婴儿痉挛症患儿致痫灶中 ARHGDIA 的表达56-61
材料与办法56-58
结果58-59
讨论59-60
参考文献60-61
综述: 癫痫的蛋白质组学探讨发展61-68
参考文献66-68
个人简历68-69
致谢69-70
摘要：目的婴儿痉挛症(Infantile spas,IS)是一种特发于婴儿期的年龄依赖性癫痫脑病，临床上从反复痉挛发作、脑电图高度失律、显著的精神运动发育落后为特点。70%～90%的患儿可伴有重度认知功能障碍，智力倒退等严重脑损伤，病因可多达200余种，临床流行病学提示，母孕期精神应激对子代健康的具有影响，婴儿痉挛症的发病与母亲产前不良应激显著相关。婴儿痉挛症属于难治性癫痫，几乎所有的传统抗癫痫药物均药效欠佳，但促肾上腺皮质激素释放激素（ACTH）对其有独特疗效。由此，本探讨通过建立婴儿痉挛症动物模型，使用差别蛋白质组技术，旨在探讨研究婴儿痉挛症的发病机制、孕期应激因素的影响及ACTH对婴儿痉挛的治疗机制。办法使用未成熟脑对N--D-天门冬氨酸(NMDA)高度敏感，制备乳鼠痉挛发作模型，差别蛋白质组技术分析从下三类动物模型间的差别：（1）痉挛模型组与正常对照组对比，研究发病机制；（2）孕期应激痉挛模型组与痉挛模型组对比，分析孕期应激意义机制；（3）ACTH治疗组与非治疗组对比，探讨ACTH的治疗机制。将动物模型的脑组织样本进行双向电泳分离，获得双向胶图，依据实验分组，Imager marster软件分析各组间蛋白表达差别，选取差别蛋白进行胶内酶切，质谱鉴定，生物信息学办法分析并构建差别蛋白相互意义网络，研究生物功能的调节网络。对部分差别表达蛋白进行western-blot验证。并收集了5例婴儿痉挛症患儿的手术切除的颅内致痫灶样本，通过免疫组织化学的办法初步验证差别蛋白的表达，研究其生物学功能。结果（1）孕期应激痉挛动物模型组较痉挛动物模型组，痉挛发作的潜伏期短（t=3.96，P＜0.001），发作次数多（t=8.65，P＜0.001）；孕期应激痉挛模型ACTH治疗组较孕期应激痉挛模型组，痉挛发作潜伏期长（t=6.9，P＜0.001），发作次数少（t=5.75，P＜0.001）。从上均有统计学差别。（2）痉挛模型组与正常对照组差别蛋白质组分析，发现痉挛模型组中Pkm2、ATP6V1B2、Prps2、ARHGDIA、CFL1、DPYSL3等蛋白表达下调。（3）孕期应激痉挛模型与痉挛模型差别蛋白质组分析，发现孕期应激YWHAZ下调。(4)ACTH治疗组与非治疗组差别蛋白质组分析发现ACTH治疗后Tuba1a、CFL1、SNAP-25、ARHGDIA、MDH、DDAH1和ANNEX3等表达转变。（5）ARHGDIA在5例婴儿痉挛症患儿的致痫灶中的表达有着差别，在经ACTH治疗过的患儿中表达更显著（由于样本少，未行统计学分析）。结论（1）母鼠孕期应激，NMDA可诱发其乳鼠更为严重的痉挛发作，而给予ACTH治疗可减轻痉挛发作程度。这更好的反应了动物模型对ACTH治疗敏感的特征，更符合婴儿痉挛症这一疾病的特征。（2）痉挛模型组与正常对照组对比，提示婴儿痉挛脑损伤机制可能涉及能量障碍、脑发育异常及神经重塑等。（3）孕期应激痉挛模型组与痉挛模型组对比，YWHAZ蛋白的下调，可能为导致痉挛加重的重要因素之一。（4）ACTH治疗组与非治疗组对比，差别蛋白涉及细胞骨架、神经突触、能量代谢、血管调节、信号传导等方面，治疗机制可能与神经传导，突触重建、乙酰化密切相关。（5）通过差别蛋白ARHGDIA在5例临床样本中表达水平的检测，初步发现ACTH治疗与ARHGDIA表达可能相关，有进一步的开展基础与临床探讨的价值。关键词：婴儿痉挛症论文差别蛋白质组论文脑损伤论文促肾上腺皮质激素论文双向电泳论文
本论文由www.7ctime.com,需要可从关系人员哦。英文缩略对照词表6-7
中文摘要7-9
Abstract9-11
主要仪器设备11-12
第一章 婴儿痉挛症脑损伤机制及孕期应激因素对发病影响的探讨－NMDA 痉挛模型的差别蛋白质组分析12-41
前言12-15
材料和办法15-26
结果26-33
讨论33-35
小结35-36
参考文献36-41
第二章 ACTH 对婴儿痉挛症所致脑损伤保护机制的探讨－ACTH 干预 NMDA 痉挛模型的差别蛋白质组分析41-56
材料和办法42-45
结果45-50
讨论50-53
小结53论文导读：参考文献53-56第三章差别蛋白生物学功能的初步探讨－婴儿痉挛症患儿致痫灶中ARHGDIA的表达56-61材料与办法56-58结果58-59讨论59-60参考文献60-61综述:癫痫的蛋白质组学探讨发展61-68参考文献66-68个人简历68-69致谢69-70上一页12
参考文献53-56
第三章 差别蛋白生物学功能的初步探讨－婴儿痉挛症患儿致痫灶中 ARHGDIA 的表达56-61
材料与办法56-58
结果58-59
讨论59-60
参考文献60-61
综述: 癫痫的蛋白质组学探讨发展61-68
参考文献66-68
个人简历68-69
致谢69-70