试述纯化茯苓皮中三萜类化学成分分离纯化、结构鉴定及茯苓药材指纹图谱

论文导读：另外3个化合物的结构尚未确定，经UPLC-UV-MS鉴定，纯度和分子量已知。该实验为进一步探讨茯苓的药效物质基础，特别是茯苓皮中所含有特点性3,4-开环-羊毛甾类三萜成分提供了参考和依据。本实验使用液质联用的办法建立了茯苓药材的UPLC-UV-MS指纹图谱，共标定了22个色谱峰，其中9个峰共有且含量较高。通过与实验室自制的6个单体化合
摘要：茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos(Schw.) Wolf的干燥菌核，是我国珍贵的传统中药材，在我国已有两千多年的药用历史，常与其他中药方剂配伍利用，作为利尿、镇静、滋补的良药。现代药理探讨表明，三萜类成分是茯苓主要的药效成分之一。茯苓皮作为茯苓菌核的干燥外皮，在加工历程中，从往常常被当成废料处理，然而近年探讨发现茯苓皮中所含有的三萜类成分不仅丰富，还具有几点特点性成分。故本论文从茯苓皮为探讨对象，对其三萜类成分进行提取、分离、纯化与鉴定；并使用UPLC-UV-MS的办法，对收集到的不同药用部位不同产地的的茯苓药材进行指纹图谱对比探讨。本文采取碱溶酸析法，将茯苓皮药材用甲醇回流提取，提取液浓缩至浸膏状，加水混悬后，用萃取，得到的部分分别用饱和的NaHCO_3水溶液和5%的NaOH水溶液萃取，然后两部分的萃取物均用6mol/L HCl酸化，经萃取后，得到FractionA（饱和NaHCO_3层）和Fraction B （5%的NaOH层）两个部位。使用柱色谱法、薄层色谱法、制备高效液相色谱法和核磁共振等技术对Fraction A（饱和的NaHCO_3层）部位中所含三萜类成分进行分离纯化和鉴定，共获得8个单体化合物，其中5个化合物的结构经~1H-NMR和~(13)C-NMR核磁共振检测后结构已确定，分别为：茯苓酸A(Poricoic acid A)、茯苓酸B(Poricoic acid B)、茯苓酸AM(Poricoic acid AM)、茯苓酸G(Poricoic acid G)、去氢土莫酸(Dehydrotumulosic acid)；另外3个化合物的结构尚未确定，经UPLC-UV-MS鉴定，纯度和分子量已知。该实验为进一步探讨茯苓的药效物质基础，特别是茯苓皮中所含有特点性3,4-开环-羊毛甾类三萜成分提供了参考和依据。本实验使用液质联用的办法建立了茯苓药材的UPLC-UV-MS指纹图谱，共标定了22个色谱峰，其中9个峰共有且含量较高。通过与实验室自制的6个单体化合物[去氢土莫酸(Dehydrotumulosicacid)、茯苓酸A(Poricoic acid A)、茯苓酸B(Poricoic acid B)、茯苓酸AM(Poricoic acid AM)、茯苓酸(Pachymic acid)、去氢茯苓酸(Dehtdrapachymic论文导读：
acid)]与色谱峰比对，并结合离子质谱图质荷比与相关文献参照，初步归属了其中的17个色谱峰。办法学考察结果符合指纹图谱技术要求；相似度和聚类分析结果表明，茯苓皮和茯苓块中三萜类成分有着明显差别，茯苓药材的质量与产地也密切相关。此探讨办法稳定、可靠、重现性好，可为茯苓药材质量评价办法提供参考依据。关键词：茯苓皮论文三萜论文提取论文分离纯化论文指纹图谱论文
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中文摘要4-6
ABSTRACT6-9
前言9-10
第一章 茯苓皮中三萜类化合物提取分离与结构鉴定10-33
第一节 实验部分10-14
第二节 结果与分析14-32
第三节 分析与讨论32-33
第二章 不同药用部位茯苓 UPLC-UV-MS 指纹图谱对比探讨33-47
第一节 仪器和试药34-35
第二节 办法和结果35-45
第三节 分析与讨论45-47
第三章 总结与创新47-48
文献综述48-66
第一节 茯苓的探讨概况48-63
第二节 HPLC-MS 联用技术在中药材指纹图谱探讨中的运用63-66
参考文献66-74
附录74-75
致谢75