简论生物学几种动物来源益生菌部分生物学特性比较

论文导读：狐貉源（p＜0.05）；对金葡萄球菌的抑制意义则体现为鸡源＞猪源＞狐貉源，鸡源抑制效果同猪源抑制效果差别不明显（p＞0.05），但同狐貉源差别明显（p＜0.05）。在益生菌抗病毒实验中，选用猪传染性胃肠炎病毒（TranissibleGastroenteritisCoronirus，TGEV）作为病原体。TGEV的增殖与毒力测定，选择TGEV感染猪睾丸（ST）细胞，应用MTT比色
摘要：本探讨以猪肠道中分离出50株潜在益生菌，与实验室保存的8株鸡源益生菌、7株狐貉源益生菌根据不同来源设置分组。对不同动物来源益生菌在抑致病原菌、抗病毒、降胆固醇和抗氧化方面的生物学特性进行对比分析，并对筛选出的具有综合优势的菌株进行种属鉴定，为深入探讨益生菌生物学特性意义机制和运用奠定基础。采取碳酸钙平板透明圈法，挑取溶钙环显著且革兰氏染色阳性的菌株，以猪粪便中所分离的50株潜在益生菌，依次命名为P1~P50，作为实验菌株开展探讨工作。同时选取本实验室保存的其他动物来源的益生菌株做对比试验，分别为8株鸡源益生菌，依次命名为C1-C8；7株狐貉源益生菌，依次命名为H1-H7。检测这些益生菌菌株对致病菌大肠杆菌O78和金葡萄球菌的抑制实验，采取牛津杯法，结果表明所有菌株对两种致病菌均体现出不同程度的抑制意义，并且抑制意义呈现出益生菌菌株的来源差别性、种属差别性和菌株差别性。对大肠杆菌的抑制意义：鸡源＞猪源＞狐貉源，且鸡源的抑制效果明显高于猪源和狐貉源（p＜0.05）；对金葡萄球菌的抑制意义则体现为鸡源＞猪源＞狐貉源，鸡源抑制效果同猪源抑制效果差别不明显（p＞0.05），但同狐貉源差别明显（p＜0.05）。在益生菌抗病毒实验中，选用猪传染性胃肠炎病毒（Tranissible GastroenteritisCoronirus，TGEV）作为病原体。TGEV的增殖与毒力测定，选择TGEV感染猪睾丸（ST）细胞，应用MTT比色法测定细胞活性，筛选出具有较强抗TGEV活性的菌株。探讨结果显示猪源益生菌菌株抗TGEV的效果最好（p＜0.05），其次为鸡源益生菌，狐貉源益生菌抗猪源TGEV意义不明显。通过益生菌抗新城疫病毒（NDV）的血凝试验结果对照，证明鸡源益生菌对同源病毒（NDV）的抑制效果最强。应用硫酸铁铵显色法测定益生菌菌悬液对高胆固醇培养基（MRS-CHOL）中胆固醇的降解率。实验结果表明猪源益生菌胆固醇降解率在1.54%～43.80%之间；鸡源益生菌胆固醇降解率为13.02%～25.79%；狐貉源益生菌胆固醇降解率在4.28%～16.28%。不同菌株、不同来源益生菌降解胆固醇能力差别明显。益生菌抗氧化性实验中，选取稳定性较高的DPPH自由基作为清除对象，将菌液上清与DPPH乙醇溶液混匀后，在517nm处测定光密度值。结果表明异源益生菌在不同程度上具有清除DPPH自由基能力，平均清除能力为猪源＞鸡源＞狐貉源。筛选出具有综合抗致病特性优势的菌株进行耐酸耐胆盐实验，选择耐受性最强的5株进行生化鉴定及16S rRNA鉴定。结果显示P9为罗伊氏乳杆菌，P13为食淀粉乳杆菌，P26、P47和C1均为枯草芽孢杆菌。通过益生菌在上面陈述的几个方面的生物学特性探讨中发现：相同动物来源益生菌组内不同菌株抗致病特性意义有着明显差别；不同动物来源益生菌组间抗致病特性意义也有着明显差别；因此推断益生菌株发挥抗病特性意义时有着来源特异性、种属特异性和菌株差别性，并且当益生菌来源同病毒来源一致时，抗病毒特性意义效果最为明显。关键词：益生菌论文生物学特性论文对比探讨论文鉴定论文
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CONTENTS6-8
摘要8-10
Abstract10-12
1 引言12-22

1.1 益生菌概述12-14

1.1 益生菌定义12

1.2 益生菌种类12-13

1.3 益生菌在畜牧业中运用近况13-14

1.2 益生菌株的选择标准14-15

1.2.1 菌种的安全性14

1.2.2 意义的功能性14-15

1.2.3 技术的可行性15

1.3 益生菌的生物学特性15-20

1.3.1 益生菌的抑菌意义15-16

1.3.2 益生菌的抗病毒意义16-18

1.3.3 益生菌的降胆固醇意义18-19

1.3.4 益生菌的抗氧化意义19-20

1.4 探讨的目的及作用20-22

2 材料与办法22-29

2.1 材料和仪器22-24

2.

1.1 主要材料22

2.

1.2 主要培养基及溶液22-23

2.

1.3 主要试剂23-24

2.

1.4 主要实验仪器24

2.2 试验办法24-29
2.2论文导读：物学特性的对比探讨26-272.2.7具有综合优势益生菌的耐酸、耐胆盐测定272.2.8菌株鉴定27-282.2.9数据分析28-293结果29-543.1猪肠道益生菌的分离293.2益生菌抗致病菌的测定29-313.3益生菌抗病毒的测定31-353.3.1TGEV的毒力测定313.3.2益生菌抗TGEV的测定31-333.3.3益生菌抗NDV血凝的测定33-353.4益生菌降胆固
.1 猪肠道益生菌的分离纯化24

2.2 益生菌抗致病菌的测定24-25

2.3 益生菌抗病毒的测定25-26

2.4 益生菌降胆固醇的测定26

2.5 益生菌抗氧化性的测定26

2.6 益生菌部分生物学特性的对比探讨26-27

2.7 具有综合优势益生菌的耐酸、耐胆盐测定27

2.8 菌株鉴定27-28

2.9 数据分析28-29

3 结果29-54

3.1 猪肠道益生菌的分离29

3.2 益生菌抗致病菌的测定29-31

3.3 益生菌抗病毒的测定31-35

3.1 TGEV 的毒力测定31

3.2 益生菌抗 TGEV 的测定31-33

3.3 益生菌抗 NDV 血凝的测定33-35

3.4 益生菌降胆固醇的测定35-37

3.4.1 胆固醇标准曲线35

3.4.2 益生菌降胆固醇的测定35-37

3.5 益生菌抗氧化性的测定37-40

3.6 益生菌部分生物学特性的对比探讨40-49

3.6.1 相同动物来源益生菌的对比40-47

3.6.2 不同动物来源益生菌的对比47-49

3.7 具有综合优势益生菌的耐酸、耐胆盐测定49-51

3.7.1 具有综合优势益生菌的筛选49-50

3.7.2 具有综合优势益生菌株的耐酸性的测定50

3.7.3 具有综合优势益生菌株的耐胆盐的测定50-51

3.8 菌株鉴定51-54

3.8.1 菌落特点及形态学观察51

3.8.2 生理生化鉴定51-53

3.8.3 16 S rRNA 鉴定53-54

4 讨论54-59

4.1 益生菌抗病原体特性的对比54-55

4.2 益生菌降胆固醇和抗氧化性特性的对比55

4.3 具有综合优势益生菌株的筛选55-59

4.

3.1 实验办法的选定55-56

4.

3.2 筛选标准的确立56-57

4.

3.3 益生菌株耐酸耐胆盐的测定57-59

5 结论59-60
致谢60-61
参考文献61-68
攻读学位期间发表的学术论文68