试析通路疏肝益肾方对三苯氧胺耐药乳腺癌实验

论文导读：
摘要：目的：探讨疏肝益肾方对三苯氧胺耐药的乳腺癌细胞MCF-7LCC9的逆转耐药意义，并明确其发挥意义的机制.办法：1.雌性大鼠去势手术后,分别用疏肝益肾方水煎剂(高、中、低剂量组)、三苯氧胺(TAM组)溶液、生理盐水(空白组)灌胃制备大鼠含药血清.2.MTT法观察高、中、低剂量疏肝益肾方组、TAM组、空白组的含药血清对野生型MCF-7WT细胞和耐药型乳腺癌MCF-7LCC9细胞体外增殖的抑制意义。3. TRANSWELL小室法和Wound heapng划痕实验观察疏肝益肾方组、TAM组、空白组的含药血清对野生型MCF-7WT细胞和耐药型MCF-7LCC9(?)(?)胞体外横向、纵向迁移力的抑制意义。4.利用基因芯片检测疏肝益肾方血清组、空白血清组体外干预后的MCF-7LCC9细胞基因表达谱的变化,以中发现差别表达的基因。5.通过GO-Analysis对筛选出的差别基因进行明显性功能分析,得到差别基因所参与的明显性、靶向性功能。6.从明显性功能为探讨对象,构建功能间所属联系的网络图GO-Map,表现性状差别的体系性功能变化特征。7.对筛选出的差别基因进行明显性Pathway分析,得到差别基因所参与的明显性Pathway。8.使用明显性Pathway为探讨目标,构建Pathway之间的相互意义网络Path-Net,以宏观、体系的角度探讨信号转导历程。9.基于实验已经验证的基因和基因之间的联系,构建差别基因的信号转导网络(Signal-Net),探讨差别基因间的信号转导历程,并以网络中得到起信号中枢意义的基因。结果：1.疏肝益肾方、TAM均能抑制MCF-7WT细胞增殖,48h时疏肝益肾方高剂量组抑制意义最显著。疏肝益肾方高剂量组对MCF-7LCC9细胞增殖的抑制意义也是在48h时做明显,而TAM对MCF-7LCC9细胞的抑制意义不显著。2.疏肝益肾方高剂量组、TAM组意义48h后,对MCF-7WT和MCF-7LCC9的迁移力均有一定的抑制意义。3.基因芯片对中药高剂量组和空白组处理后的MCF-7LCC9进行分析,采取倍数法(1.3倍)共筛选出1867个差别基因,其中,表达上调的有1436个基因,基因表达下调的有931个基因。4.对筛选出的差别基因进行GO-Analys is,发现上调差别基因的明显性功能分析结果133项,涉及mRNA的处理、代谢历程、蛋白质的转运等。下调论文导读：LCC9三苯氧胺耐药的机制可能与抑制MAPK通路、VEGF通路等通路,下调T3的表达有关。关键词：T论文MCF-7论文MAPK通路论文耐药论文乳腺癌论文疏肝益肾方论文三苯氧胺论文VEGF通路论文本论文由www.7ctime.com,需要可从关系人员哦。
差别基因的明显性功能分析结果85项,涉及刺激反应性、凋亡的正调控等等。5.对筛选出的差别基因进行明显性Pathway分祈,得到上调差别基因参与的明显性信号转导通路27项,涉及RNA的降解、嘧啶的代谢、RNA聚合酶等通路；下调差别基因参与的明显性信号转导通路21项,涉及MAPK通路VEGF通路、钙信号通路等。结论：1.疏肝益肾方对MCF-7LCC9的增殖、迁移力有抑制意义,且中药高剂量组抑制意义最强。2.疏肝益肾方逆转MCF-7LCC9三苯氧胺耐药的机制可能与抑制MAPK通路、VEGF通路等通路,下调T3的表达有关。关键词：T论文MCF-7论文MAPK通路论文耐药论文乳腺癌论文疏肝益肾方论文三苯氧胺论文VEGF通路论文
本论文由www.7ctime.com,需要可从关系人员哦。目录4-5
摘要5-7
Abstract7-9
英文缩略词表9-10
综述10-17

1. 探讨作用10

2. 国外探讨近况10-15

2.1 三苯氧胺耐药机制的探讨发展10-15

2.2 逆转耐药的探讨15

2.3 目前的不足15

3. 中医相关治疗乳腺癌近况15-17

第一部分 逆转TAM耐药的药效实验探讨17-36
实验

一、中药含药血清制备17-22

实验材料17-18
实验办法18-20
结果20
讨论20-22
实验

二、MTT法测定疏肝益肾方对三苯氧胺耐药乳腺癌细胞MCF-7增殖的意义22-30

实验材料22-23
实验办法23-25
结果25-29
讨论29-30
实验三 Transwell小室和wound heapng法测定疏肝益肾方对三苯氧胺耐药乳腺癌细胞MCF-7迁移力的影响30-36
实验材料30-31
实验办法31-33
结果33-35
讨论35-36
第二部分 运用基因芯片技术探讨疏肝益肾方逆转TAM耐药的机制36-50
实验材料36-37
实验办法37-39
结果39-41
讨论41-50
结论50-51
附录51-58
参考文献58-66
致谢66-67
个人简历67-68