试析酵母菌乳制品中细菌总数、酵母菌和霉菌快速检测策略

论文导读：
摘要：随着人们生活水平的提升，乳制品逐渐成为生活中不可或缺的营养食品，然而由微生物引起的食品安全不足时有发生，快速高效地检测乳制品中的微生物含量成为亟待解决的不足。本论文探讨了乳制品中细菌总数、酵母菌和霉菌的快速检测办法，并建立了完整的检测历程，与传统办法相比极大地提升了检测效率。1.乳制品中细菌总数的快速检测为了使牛奶中的细菌能够通过孔径为0.45μm的滤膜进行富集，需要去除牛奶中的大颗粒物质脂肪和蛋白质，通过试验确定了最优的前处理条件，进而建立起快速有效的检测办法。检测办法：取25mL牛奶倒入装有225mL无菌生理盐水的锥形瓶中充分混匀，用移液管以锥形瓶中取出5mL牛奶于10mL离心管中，室温下从3000r/min的转速离心12min，去除离心管中上层脂肪后震荡混匀得到脱脂牛奶。用移液管以脱脂后的牛奶中取出2mL于小试管中，加入0.7mL混合酶溶液(胰蛋白酶0.01g/mL，胰凝乳蛋白酶0.002g/mL)，在40℃水浴条件下酶解5min。用针管吸取酶解后的牛奶1mL，采取孔径为0.45μm、截流液体积为70μL的聚醚砜微孔滤膜过滤。然后在滤器中打入50μL无菌空气，反复吹吸使浓缩液混合均匀。用微量移液吸取滤器中的浓缩菌液2μL置于载玻片上，倒置晾干，在菌膜处滴加3μL浓度为0.01%次蓝染色液，染色2min，用无菌水冲洗掉染液后，吸水纸吸干多余水珠，插入微生物快速检测仪中检测计数。整个检测历程在60min从内。对牛奶中细菌的快速检测办法进行了准确度分析，确定此快速检测办法的检测范围为20cfu/mL-106cfu/mL。独立样本t-检验结果显示快速检测法和国标法检测结果不有着明显差别(t-检验结果P0.05)，快速检测法与国标法检测结果的回归曲线为y=0.9764x+0.0952，且相关性好(R20.99)，说明此办法能够用于乳制品中细菌总数的快速检测。2.乳制品中酵母菌的快速检测本论文从酸奶为代表探讨了乳制品中酵母菌的快速检测办法，通过试验确定用微滤的办法富集酵母菌，染色制成玻片后在微生物快速检测体系中检测。检测办法：取酸奶1mL，用生理盐水稀释10倍制成待检溶液，用针管吸取5mL通过孔径为1.2μm的混合纤维素微孔滤膜过滤，然后再向滤器中打入50μL无菌空气，此时微孔滤膜的上层截流液剩下20μL，反复吹吸使浓缩菌液混匀，用微量移液以过滤器中吸取2μL截流液，滴于载玻片上，倒置自然晾干后滴加3μL浓度为0.02%的次蓝染色液染色1min，用滴管吸取无菌水慢慢冲洗干净，吸水纸吸干残留水珠，插入微生物快速检测仪检测。整个检测历程时间在30min从内。分别用国标法和快速检测法对酸奶样品进行检测，分析检测结果，确定了此快速检测办法的检测范围为2cfu/mL-106cfu/mL，独立样本t-检验结果显示，两种办法检测结果不有着明显差别。两种办法检测结果的回归方程为y=1.0093x-0.0912，相联系数R20.99，说明两者具有良好的相关性，此办法可从用于乳制品中酵母菌的快速检测。3.乳制品中霉菌的快速检测用孔径为3μm的混合纤维素微孔滤膜对酸奶中的霉菌进行富集，制成涂片后在微生物快速检测仪中进行检测。检测办法和酵母菌的检测办法相同，通过与国标法的检测结果比较，确定此快速检测办法的检测范围为2cfu/mL-5.0×105cfu/mL。对两种办法的检测结果进行独立样本t-检验，证明两种办法不有着明显性差别。建立了乳制品中霉菌快速检测办法和国标法检测结果的相关性曲线，回归方程为y=0.9684x+0.0342，相联系数R20.99，说明两者具有很好的相关性，此快速检测办法能够用于乳制品中霉菌的快速检测。关键词：乳制品论文细菌总数论文酵母菌论文霉菌论文快速检测论文
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Abstract7-9
目录9-13
第1章 绪论13-29

1.1 课题探讨的目的和作用13-14

1.2 牛奶介绍14-16

1.2.1 牛奶的组成14-15

1.2.2 牛奶的腐败15

1.2.3 牛奶的保鲜15-16

1.3 食品中细菌总数检测技术的进展论文导读：

近况16-22

1.3.1 生化检测技术16-18

1.3.2 代谢学技术18-19

1.3.3 免疫学技术19-20

1.3.4 分子生物学技术20-21

1.3.5 生物传感器21-22

1.3.6 细菌直接计数法22

1.4 酵母菌和霉菌检测技术的进展近况22-23

1.5 计算机视觉技术23-24

1.6 微生物快速检测体系24-27

1.6.1 设计原理25

1.6.2 硬件组成25-26

1.6.3 软件组成26

1.6.4 微生物快速检测体系的特征26-27

1.7 课题的提出及主要探讨内容27-29

1.7.1 课题的提出27

1.7.2 主要探讨内容27-29

第2章 乳制品中细菌总数快速检测办法的探讨29-53

2.1 引言29

2.2 材料与设备29-30

2.1 试验材料29

2.2 试验仪器29-30

2.3 试验试剂30

2.3 试验办法及结果分析30-47

2.3.1 牛奶中脂肪去除办法的探讨30-36

2.3.2 牛奶中蛋白质去除办法的探讨36-42

2.3.3 细菌图像的处理和识别42-44

2.3.4 牛奶中细菌总数快速检测办法的验证44-47

2.5 牛奶中细菌总数快速检测办法的准确性分析47-50

2.5.1 试验办法47-48

2.5.2 结果与分析48-50

2.6 本章小结50-53

第3章 乳制品中酵母菌快速检测办法的探讨53-67

3.1 引言53

3.2 酵母菌介绍53

3.3 比色法检测酵母菌53-57

3.1 比色法测定原理53

3.2 材料与设备53-54

3.3 试验办法54-55

3.4 结果与分析55-57

3.4 微生物快速检测仪检测办法57-62

3.4.1 试验原理57-58

3.4.2 材料与设备58

3.4.3 试验办法58-59

3.4.4 结果与分析59-61

3.4.5 酵母菌图像处理办法61-62

3.5 酵母菌快速检测办法的准确性分析62-65

3.5.1 试验办法63

3.5.2 结果与分析63-65

3.6 本章小结65-67

第4章 乳制品中霉菌快速检测办法的探讨67-75

4.1 引言67

4.2 霉菌的检测原理67

4.3 检测办法67

4.4 图像处理及识别67-70

4.1 霉菌的形态特点67-68

4.2 图像的分割68

4.3 图像的平滑处理68-69

4.4 中轴提取69

4.5 特点值提取及菌体识别69-70

4.5 霉菌快速检测办法的准确性分析70-74

4.5.1 材料与设备70-71

4.5.2 试验办法71-72

4.5.3 结果与分析72-74

4.6 本章小结74-75

第5章 结论75-79
参考文献79-84
致谢84