试议污染物大气混合污染物对大鼠肺脏HO-1蛋白变化影响

论文导读：
摘要：随着经济建设和工业化的发展,环境大气中颗粒污染物及多种气体污染物日渐增加。本探讨通过制备大气混合污染物动物模型的办法,在病理学及分子水平上,对环境大气中所含颗粒污染物及多种气体污染物引起肺损伤的意义机制加从探索和探讨,分析血红素氧合酶1(HO-1)在大气混合污染物致肺损伤时的意义机制。本实验所采取的试验动物模型,为颗粒污染物及多种气体污染物染毒大鼠，具体办法采取向大鼠进行气管内注入PM2.5混悬液进行染尘,然后,动态吸入含有SO_2、NO_2及CO的空气混合气体进行染毒,对大鼠的各种病变进行观察,以而模拟大气污染所诱导的肺损伤。观察染尘染毒后大鼠肺组织大体形态的病理学变化及分子水平变化,采取常规切片染色法观察大鼠肺组织组织病理学变化,从RT-PCR技术分析大鼠肺组织中HO-1的mRNA表达的变化,采取Western blot法分析大鼠肺组织中HO-1蛋白的表达变化,采取免疫组化办法分析大鼠肺组织中HO-1蛋白的表达部位及变化,通过测定HO-1反应系底物浓度变化,分析大鼠肺组织中HO-1蛋白活性的变化,通过上面陈述的办法,探讨HO-1在大气混合污染物诱导肺损伤时的分子及蛋白水平变化,探索肺损伤时其对机体的影响和意义机制。实验结果显示,染毒组大鼠,于染毒后7d,肺组织与对照组相比出现充血、水肿、炎细胞浸润等病理变化,并持续至染毒后30d,染毒后30d大鼠肺组织出现水肿、炎细胞浸润等病理变化外,伴有部分间质纤维组织增生,染毒组大鼠中,染毒后7d开始大鼠肺组织中HO-1的mRNA表达及蛋白水平与对照组相比显著升高,并持续至染毒30d,免疫组化结果显示,染毒7d组大鼠肺泡上皮细胞及巨噬细胞呈现HO-1阳性,染毒后30d,大鼠肺泡和支气管上皮细胞持续HO-1阳性表达,同时,染毒组大鼠于染毒30d后HO-1蛋白活性比对照组显著升高。本探讨提示在大气混合污染物所致大鼠肺损伤的历程中,伴随着HO-1基因及蛋白表达的增多,及HO-1蛋白活性的增强。本探讨结果提示,HO-1参与大气混合污染物所致肺损伤这一病理历程,在污染物所致肺损伤7天从后,HO-1诱导性增高,结合HO-1分解血红素的生理意义和其代谢产物的影响,提示诱导HO-1增高可作为预防和保护大气混合污染物所致肺损伤的一种办法,另外,在大气混合污染物诱导肺损伤的历程中, HO-1基因及蛋白表达也可作为检测早期肺损伤的敏感性指标之一。关键词：HO-1论文大气混合污染物论文大鼠论文肺损伤论文
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中文摘要6-9
Abstract9-15
前言15-17
第1章 文献回顾17-21

1.1 血红素氧合酶 1(HO-1)的分子生物学特性17-18

1.2 血红素氧合酶 1(HO-1)的诱导和调节18

1.3 血红素氧合酶 1(HO-1)和信号转导18-19

1.4 血红素氧合酶 1(HO-1)的抗炎症意义19

1.5 血红素氧合酶 1(HO-1)和肺脏疾患19-21

第2章 材料和办法21-31

2.1 实验技术路线图21-22

2.2 主要仪器与设备22

2.3 主要试剂22-23

2.4 试剂配制23-24

2.5 实验动物24

2.6 试验办法24-30

2.6.1 大气混合污染物的制备24

2.6.2 动物分组及模型的制备24-25

2.6.3 标本采集25

2.6.4 指标检测25-30

2.7 统计学处理30-31

第3章 结果31-37

3.1 肺组织病理形态学转变和肺损伤程度评分31-32

3.

1.1 肺组织病理变化光镜观察31-32

3.

1.2 肺组织病理变化形态学评分:32

3.2 肺组织 HO-1mRNA 的表达32-33

3.3 肺组织 HO-1 蛋白的表达(Western blot)33-35

3.4 肺组织中 HO-1 蛋白的表达(免疫组化)35-36

3.5 肺组织 HO-1 的活性测定36-37

第4章 讨论37-40
第5章 结论40-41
参考文献41-45
致谢45