简谈诱变产壳聚糖酶海洋微生物菌株筛选鉴定、发酵产酶条件和酶解产物性能

论文导读：明圈法,对海洋生物与海洋养殖环境样品中产壳聚糖酶的野生菌株进行筛选,获得1株高产壳聚糖酶的微生物菌株XW-1002,经常规形态、生理生化反应和分子生物学鉴定,属于节杆菌属{Arthrobactersp).通过对Arthrobactersp.XW-1002发酵条件的探讨,确定了最佳产酶发酵条件为：壳聚糖底物浓度为3%、发酵温度30℃、250ml三角瓶装量为50-
摘要：海洋微生物由于具有物种、基因组成和生态功能的多样性,成为酶制剂开发的新来源。海洋环境中甲壳质的含量非常丰富,为寻找产壳聚糖酶的新菌株和新型壳聚糖酶提供可能。本论文采取富集培养和透明圈法,对海洋生物与海洋养殖环境样品中产壳聚糖酶的野生菌株进行筛选,获得1株高产壳聚糖酶的微生物菌株XW-1002,经常规形态、生理生化反应和分子生物学鉴定,属于节杆菌属{Arthrobacter sp).通过对Arthrobacter sp. XW-1002发酵条件的探讨,确定了最佳产酶发酵条件为：壳聚糖底物浓度为3%、发酵温度30℃、250ml三角瓶装量为50-100ml、接种量为3%。在上面陈述的培养条件下,24h时摇瓶中发酵液的最高酶活力为0.414U/ml。菌株Arthrobacter sp. XW-1002产生的是诱导型胞外酶。采取端基法测定了菌株Arthrobacter sp. XW-1002酶解产物-壳寡糖的平均聚合度和分子量,采取分光光度法测定壳寡糖的抑菌活性,利用种子水培法测定壳寡糖的促水稻生长情况。结果表明酶解10、20、30分钟的壳寡糖平均聚合度分别为5.4、2.66和1.7,平均分子量为870.16、446.25和292.04；壳寡糖对多种细菌和酵母类真菌有显著的抑制作用,但对水稻纹枯病菌的抑制作用不显著,抑菌效果随着壳寡糖作用浓度的增加而增强；低浓度的酶解产物对水稻幼苗的生长有推动作用,高浓度的酶解产物对水稻幼苗生长有抑制作用。为提升野生型产壳聚糖酶菌株Arthrobacter sp. XW-1002的产酶活力,本论文采取化学诱变剂硫酸二乙酯(DES)和紫外照射两种策略对其进行诱变处理,得到2株突变株,分别命名为YY-1和UV-1。结果表明：DES对菌株Arthrobacter sp.XW-1002的最适诱变剂量为2%,最适诱变时间为50min,突变菌株YY-1的壳聚糖酶活力稳定在2.50U/ml左右,较诱变前菌株提升了1.7倍；紫外突变菌株UV-1酶活为2.50U/ml,比野生型菌株酶活提升了1.39倍,菌株生长周期以8天缩短至7天。关键词：壳聚糖酶论文海洋微生物论文节杆菌属论文壳寡糖论文生理活性论文诱变论文
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摘要7-8
Abstract8-10
目次10-11
第1章 前言11-24

1.1 壳聚糖和壳寡糖概述11-16

1.2 壳寡糖的制备策略16-18

1.3 壳聚糖酶的探讨进展18-23

1.4 探讨目的与作用23-24

第2章 产壳聚糖酶海洋微生物菌株的筛选和鉴定24-43

2.1 实验材料与策略24-33

2.2 实验结果与浅析33-41

2.3 实验讨论41-43

第3章 产壳聚糖酶菌株XW-1002的发酵产酶条件探讨43-52

3.1 实验材料与策略43-46

3.2 实验结果与浅析46-50

3.3 实验讨论和小结50-52

第4章 产壳聚糖酶菌株XW-1002酶解产物的生理活性探讨52-66

4.1 实验材料与策略52-55

4.2 实验结果和浅析55-63

4.3 实验讨论与小结63-66

第5章 产壳聚糖菌株XW-1002的诱变选育探讨66-80

5.1 实验材料与策略67-70

5.2 实验结果与浅析70-77

5.3 实验讨论与小结77-80

结语80-81
参考文献81-90
附录90-93
附录1：不同浓度的培养液培养11天后对水稻生长的影响结果数据90-91
附录2：壳寡糖对六种不同菌类的抑菌率测量所得吸光度数据91-93
作者介绍93